摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 高分子基因传递载体和苯硼酸在生命科学中的应用研究 | 第13-53页 |
1.1 基因治疗进展概述 | 第13-15页 |
1.2 高分子基因传递系统 | 第15-17页 |
1.2.1 阳离子高分子载体 | 第15-16页 |
1.2.2 中性两亲性高分子载体 | 第16-17页 |
1.3 用于负载基因传递的高分子材料 | 第17-28页 |
1.3.1 聚乙烯亚胺 (polyethyleneimine, PEI) | 第17-18页 |
1.3.2 聚赖氨酸 (poly(L-lysine), PLL) | 第18-19页 |
1.3.3 树形高分子 (dendrimer) | 第19-21页 |
1.3.4 可生物降解高分子 (biodegradable polymers) | 第21-25页 |
1.3.5 天然高分子 (natural polymers) | 第25-27页 |
1.3.6 非离子中性高聚物 (non-ionic neutral polymers) | 第27-28页 |
1.4 靶向基因传递系统 | 第28-29页 |
1.5 苯硼酸在生物医用领域的应用 | 第29-31页 |
1.6 本论文选题思路及研究内容 | 第31-33页 |
参考文献 | 第33-53页 |
第二章 苯硼酸修饰的非离子型两亲性高分子作为基因载体的研究 | 第53-70页 |
2.1 前言 | 第53-54页 |
2.2 实验部分 | 第54-61页 |
2.2.1 试剂 | 第54页 |
2.2.2 质粒 DNA 的提取和纯化 | 第54-55页 |
2.2.3 合成过程 | 第55-58页 |
2.2.4 Polymer/DNA 复合物的制备 | 第58页 |
2.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第58-59页 |
2.2.6 复合物粒径和电位测定 | 第59页 |
2.2.7 细胞培养 | 第59页 |
2.2.8 细胞存活率检测 | 第59页 |
2.2.9 基因转染实验 | 第59-61页 |
2.3 结果与讨论 | 第61-67页 |
2.3.1 Pluronic-PG-BA 的设计与合成 | 第61-62页 |
2.3.2 DNA 复合物的制备及表征 | 第62-64页 |
2.3.3 细胞存活率检测 | 第64页 |
2.3.4 细胞吞噬实验 | 第64-65页 |
2.3.5 体外基因转染 | 第65-67页 |
2.4. 结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
第三章 不同苯硼酸改性的聚乙烯亚胺(PEI)做为基因传递载体的研究 | 第70-86页 |
3.1 前言 | 第70-71页 |
3.2 实验部分 | 第71-74页 |
3.2.1 试剂与仪器 | 第71页 |
3.2.2 质粒 DNA 的提取和纯化 | 第71页 |
3.2.3 苯硼酸修饰的 PEI (PEI1800-BA)的合成与表征 | 第71-72页 |
3.2.4 PEI1800-BA/DNA 复合物的制备 | 第72页 |
3.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第72页 |
3.2.6 复合物粒径和电位测定 | 第72-73页 |
3.2.7 细胞培养 | 第73页 |
3.2.8 细胞存活率检测 | 第73页 |
3.2.9 基因转染实验 | 第73-74页 |
3.3 结果与讨论 | 第74-82页 |
3.3.1 PEI1800-PBX的设计及合成 | 第74-75页 |
3.3.2 PEI1800-BA/pDNA 复合物的制备及表征 | 第75-77页 |
3.3.3 PEI1800-BA 的细胞毒性测定 | 第77-79页 |
3.3.4 PEI1800-BA 的体外基因转染实验 | 第79-82页 |
3.4. 结论 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-86页 |
第四章 苯硼酸修饰的长链烷基改性小分子 PEI 的基因转染研究 | 第86-103页 |
4.1 前言 | 第86-87页 |
4.2 实验部分 | 第87-91页 |
4.2.1 试剂 | 第87页 |
4.2.2 质粒 DNA 的提取和纯化 | 第87页 |
4.2.3 苯硼酸修饰的十二烷基改性 PEI(Dodx-PEI-BAy)的合成与表征 | 第87-88页 |
4.2.4 Dodx-PEI-BAy/DNA 复合物的制备 | 第88页 |
4.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第88页 |
4.2.6 复合物粒径和电位测定 | 第88-89页 |
4.2.7 细胞培养 | 第89页 |
4.2.8 细胞存活率检测 | 第89页 |
4.2.9 基因转染实验 | 第89-91页 |
4.3 结果与讨论 | 第91-98页 |
4.3.1 Dodx-PEI-BAy的合成 | 第91-92页 |
4.3.2 Dodx-PEI-BAy/pDNA 复合物的制备及表征 | 第92-94页 |
4.3.3 Dodx-PEI-BAy的细胞毒性测定 | 第94-95页 |
4.3.4 Dodx-PEI-BAy的体外基因转染实验 | 第95-98页 |
4.4 结论 | 第98-100页 |
参考文献 | 第100-103页 |
第五章 苯硼酸改性的双硫键交联 PEI 作为基因载体的研究 | 第103-117页 |
5.1 前言 | 第103-104页 |
5.2 实验部分 | 第104-107页 |
5.2.1 试剂 | 第104页 |
5.2.2 质粒 DNA 的提取和纯化 | 第104页 |
5.2.3 苯硼酸修饰双硫交联 PEI(PEI800-SSX)的合成 | 第104-105页 |
5.2.4 DNA 复合物的制备 | 第105页 |
5.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第105页 |
5.2.6 复合物粒径和电位测定 | 第105-106页 |
5.2.7 细胞培养 | 第106页 |
5.2.8 细胞存活率检测 | 第106页 |
5.2.9 基因转染实验 | 第106-107页 |
5.3 结果与讨论 | 第107-113页 |
5.3.1 BA-PEI800-SSX的设计及合成 | 第107-108页 |
5.3.2 DNA 复合物的制备及表征 | 第108-110页 |
5.3.3 BAy-PEI800-SSX的细胞毒性测定 | 第110-111页 |
5.3.4 BAy-PEI800-SSX的体外基因传递性能 | 第111-113页 |
5.4. 结论 | 第113-114页 |
参考文献 | 第114-117页 |
附录 作者在攻读博士学位期间已发表和待发表的论文 | 第117-118页 |
致谢 | 第118-119页 |
附件 | 第119-121页 |