| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-31页 |
| 1.1 水产养殖与鱼类疾病 | 第14页 |
| 1.2 鱼用疫苗 | 第14-17页 |
| 1.2.1 灭活疫苗 | 第15页 |
| 1.2.2 亚单位疫苗 | 第15页 |
| 1.2.3 核酸疫苗 | 第15-16页 |
| 1.2.4 减毒活疫苗 | 第16-17页 |
| 1.3 鱼类的免疫系统 | 第17-22页 |
| 1.3.1 鱼类免疫器官 | 第17-19页 |
| 1.3.2 鱼类免疫细胞 | 第19-20页 |
| 1.3.3 鱼类免疫分子 | 第20-22页 |
| 1.4 斑马鱼在免疫学研究中的应用 | 第22-29页 |
| 1.4.1 斑马鱼免疫系统 | 第23-26页 |
| 1.4.2 斑马鱼在病原感染研究中的应用 | 第26-29页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第29-31页 |
| 第2章 鳗弧菌减毒活疫苗注射接种斑马鱼的免疫效果 | 第31-44页 |
| 2.1 前言 | 第31页 |
| 2.2 实验材料 | 第31-32页 |
| 2.2.1 菌株和实验动物 | 第31页 |
| 2.2.2 试剂及主要实验仪器 | 第31-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-36页 |
| 2.3.1 斑马鱼饲养及常规处理 | 第32页 |
| 2.3.2 鳗弧菌减毒活疫苗株的培养及注射斑马鱼安全剂量考察 | 第32-34页 |
| 2.3.3 鳗弧菌减毒活疫苗注射接种 | 第34页 |
| 2.3.4 血清取样 | 第34页 |
| 2.3.5 注射攻毒 | 第34-35页 |
| 2.3.6 斑马鱼肠道及肝脏病理切片制作 | 第35页 |
| 2.3.7 血清中特异抗体水平检测 | 第35-36页 |
| 2.3.8 交叉保护 | 第36页 |
| 2.4 实验结果 | 第36-42页 |
| 2.4.1 鳗弧菌MVAV6203注射接种斑马鱼的免疫保护力 | 第36-37页 |
| 2.4.2 免疫后斑马鱼血清中特异性抗体水平变化 | 第37-39页 |
| 2.4.3 交叉保护 | 第39-42页 |
| 2.5 讨论 | 第42页 |
| 2.6 本章小结 | 第42-44页 |
| 第3章 鳗弧菌减毒活疫苗浸泡免疫斑马鱼的免疫应答 | 第44-63页 |
| 3.1 前言 | 第44页 |
| 3.2 实验材料 | 第44页 |
| 3.2.1 菌株和实验动物 | 第44页 |
| 3.2.2 试剂及主要实验仪器 | 第44页 |
| 3.3 实验方法 | 第44-51页 |
| 3.3.1 菌株培养及浸泡免疫 | 第44-45页 |
| 3.3.2 取样 | 第45页 |
| 3.3.3 浸泡攻毒 | 第45-46页 |
| 3.3.4 血清中特异抗体水平检测 | 第46页 |
| 3.3.5 RNA抽提及逆转录 | 第46页 |
| 3.3.6 组织中免疫相关基因转录水平的检测 | 第46-50页 |
| 3.3.7 浸泡免疫后斑马鱼组织中的菌体分布 | 第50-51页 |
| 3.3.8 不同剂量对免疫效果的影响 | 第51页 |
| 3.4 实验结果 | 第51-58页 |
| 3.4.1 鳗弧菌减毒活疫苗浸泡免疫斑马鱼的保护力分析 | 第51-53页 |
| 3.4.2 免疫后斑马鱼血清中特异性抗体水平变化 | 第53-54页 |
| 3.4.3 免疫后斑马鱼脾脏和肝脏中免疫相关基因的转录水平变化 | 第54-57页 |
| 3.4.4 浸泡免疫后斑马鱼组织中的菌体分布 | 第57页 |
| 3.4.5 不同接种剂量对免疫效果的影响 | 第57-58页 |
| 3.5 讨论 | 第58-61页 |
| 3.6 本章小结 | 第61-63页 |
| 第4章 鳗弧菌减毒活疫苗免疫后的斑马鱼对感染的免疫应答 | 第63-72页 |
| 4.1 前言 | 第63页 |
| 4.2 实验材料 | 第63页 |
| 4.3 实验方法 | 第63-64页 |
| 4.3.1 浸泡攻毒 | 第63页 |
| 4.3.2 取样 | 第63-64页 |
| 4.3.3 血清中特异抗体水平的检测 | 第64页 |
| 4.3.4 RNA抽提及逆转录 | 第64页 |
| 4.3.5 组织中免疫相关基因转录水平的检测 | 第64页 |
| 4.4 实验结果 | 第64-69页 |
| 4.4.1 免疫后斑马鱼血清中特异性抗体水平变化 | 第64页 |
| 4.4.2 攻毒后斑马鱼脾脏和肝脏中免疫相关基因的转录水平变化 | 第64-69页 |
| 4.5 讨论 | 第69-70页 |
| 4.6 本章小结 | 第70-72页 |
| 第5章 加强免疫对于斑马鱼免疫保护力的影响 | 第72-76页 |
| 5.1 前言 | 第72页 |
| 5.2 实验材料 | 第72页 |
| 5.3 实验方法 | 第72-73页 |
| 5.3.1 菌株培养及浸泡免疫 | 第72-73页 |
| 5.3.2 取样 | 第73页 |
| 5.3.3 浸泡攻毒 | 第73页 |
| 5.4 实验结果 | 第73-74页 |
| 5.4.1 攻毒后斑马鱼累计死亡率 | 第73页 |
| 5.4.2 抗体水平变化 | 第73-74页 |
| 5.5 讨论 | 第74-75页 |
| 5.6 本章小结 | 第75-76页 |
| 第6章 接种鳗弧菌减毒活疫苗对斑马鱼免疫系统母源转移的影响 | 第76-92页 |
| 6.1 前言 | 第76页 |
| 6.2 实验材料 | 第76-77页 |
| 6.2.1 菌株及实验动物 | 第76页 |
| 6.2.2 实验试剂和溶液 | 第76-77页 |
| 6.3 实验方法 | 第77-84页 |
| 6.3.1 斑马鱼雌性亲鱼注射免疫 | 第77页 |
| 6.3.2 斑马鱼亲鱼交配与产卵受精 | 第77-78页 |
| 6.3.3 斑马鱼胚胎胞质液的制备 | 第78页 |
| 6.3.4 斑马鱼胚胎胞质中鳗弧菌特异性抗体水平检测 | 第78页 |
| 6.3.5 斑马鱼胚胎胞质液杀菌活力检测 | 第78-80页 |
| 6.3.6 斑马鱼胚胎胞质中蛋白变化检测 | 第80-81页 |
| 6.3.7 胚胎胞质中溶菌酶蛋白的检测 | 第81-82页 |
| 6.3.8 荧光定量PCR检测胚胎中免疫相关基因转录水平 | 第82页 |
| 6.3.9 鳗弧菌浸泡攻毒斑马鱼幼鱼及残留检测 | 第82-84页 |
| 6.3.10 鳗弧菌浸泡攻毒后斑马鱼幼鱼中相关免疫基因转录水平变化 | 第84页 |
| 6.4 实验结果 | 第84-88页 |
| 6.4.1 斑马鱼胚胎胞质中鳗弧菌特异性抗体水平 | 第84-85页 |
| 6.4.2 斑马鱼胚胎胞质中杀菌活力水平 | 第85页 |
| 6.4.3 斑马鱼胚胎胞质的总蛋白分析 | 第85-87页 |
| 6.4.4 Western blotting检测斑马鱼胚胎胞质中的溶菌酶 | 第87页 |
| 6.4.5 斑马鱼胚胎中免疫相关基因转录水平 | 第87-88页 |
| 6.4.6 斑马鱼幼鱼鳗弧菌攻毒后残留 | 第88页 |
| 6.4.7 鳗弧菌浸泡攻毒斑马鱼幼鱼后免疫相关基因转录水平 | 第88页 |
| 6.5 讨论 | 第88-91页 |
| 6.6 本章小结 | 第91-92页 |
| 第7章 结论和创新点 | 第92-95页 |
| 7.1 主要结论 | 第92-93页 |
| 7.2 论文创新点 | 第93页 |
| 7.3 展望 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-107页 |
| 攻读博士学位期间撰写的论文 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
