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通城猪和大白猪中干扰素诱导基因GBP1、GBP2的不同等位基因鉴定及其抗PRRSV的作用研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
缩略词表第11-12页
1 前言第12-20页
    1.1 研究问题的由来第12-14页
    1.2 文献综述第14-18页
        1.2.1 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)与PRRSV第14页
        1.2.2 IFN诱导的GBPs在抗病毒中的作用第14-18页
        1.2.3 GBP1/GBP2在抗PRRSV中可能的作用第18页
    1.3 研究的目的和意义第18-20页
        1.3.1 研究的目的第18页
        1.3.2 研究的意义第18-20页
2 材料与方法第20-35页
    2.1 材料第20-24页
        2.1.1 实验群体第20页
        2.1.2 细胞系和质粒第20-21页
        2.1.3 所用试剂和试剂盒第21-23页
        2.1.4 主要仪器设备第23-24页
    2.2 方法第24-35页
        2.2.1 RNA水平实验(GBP1/GBP2的CDS全长的扩增)第24-26页
        2.2.2 DNA水平实验(通城猪与大白猪GBP1/GBP2的SNP位点验证)第26-27页
        2.2.3 pRK-7-Flag-Insert-GBP1/GBP2表达载体的构建第27-30页
        2.2.4 Marc-145细胞培养、转染及PRRSV攻毒第30-33页
        2.2.5 PRRSV增殖效率的检测第33-35页
3 结果第35-49页
    3.1 RNA提取及质量检测结果第35-36页
    3.2 通城猪与大白猪的GBP1/GBP2的CDS克隆及多态扫描第36-43页
        3.2.1 GBP1的CDS克隆及多态扫描第36-37页
        3.2.2 GBP2的CDS克隆及多态扫描第37-39页
        3.2.3 GBP1/GBP2种间SNP的酶切验证第39-41页
        3.2.4 GBP1/GBP2在不同物种中的保守性第41-43页
    3.3 表达载体pRK-7-Flag-Insert系统的构建及Marc-145细胞的转染第43-46页
        3.3.1 表达载体pRK-7-Flag-Insert系统的构建第43-45页
        3.3.2 Marc-145细胞的转染及PRRSV感染第45页
        3.3.3 pRK-7-Flag-Insert-GBP1/GBP2的蛋白水平检测(Western Blot)第45-46页
    3.4 感染PRRSV后Marc-145细胞中病毒增殖的变化第46-49页
        3.4.1 攻毒后细胞中PRRSV的mRNA水平变化(Q-PCR)第46-47页
        3.4.2 IFN-γ诱导后攻毒细胞中PRRSV的mRNA水平变化(Q-PCR)第47-49页
4 讨论第49-52页
    4.1 GBP1/GBP2在品种间的特异性第49-50页
    4.2 不同物种GBP1/GBP2蛋白的保守性第50页
    4.3 大白猪与通城猪GBP1/GBP2蛋白的保守性第50页
    4.4 探寻大白猪、通城猪不同单倍型间的抗PRRSV差异第50-51页
    4.5 GBP1/GBP2在抗PRRSV中可能的作用第51-52页
5 小结第52-54页
    5.1 本研究所取得的结果第52页
    5.2 本研究的创新点与特色第52-53页
    5.3 本研究的不足之处与进一步研究的建议第53-54页
附录第54-55页
参考文献第55-61页
致谢第61-62页

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