| 本论文的创新性研究工作 | 第1-4页 |
| 中文摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 本论文中常用英文缩写词汇含义说明 | 第11-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-24页 |
| 1 历史与分布 | 第17页 |
| 2 病原特征 | 第17页 |
| 3 DPV对组织器官的侵染和增殖规律 | 第17-18页 |
| 4 鸭瘟疫苗 | 第18-20页 |
| ·鸭瘟传统疫苗 | 第18-19页 |
| ·基因疫苗 | 第19-20页 |
| 5 基因疫苗的常用免疫佐剂 | 第20-22页 |
| 6 基因疫苗检测方法 | 第22-23页 |
| 7 本课题的研究目的和内容 | 第23-24页 |
| 第二部分 实验研究 | 第24-67页 |
| 第一章 鸭瘟病毒的纯化、负染超微结构观察及兔抗DPV高免血清的制备和纯化 | 第24-34页 |
| 1 试验材料 | 第24-27页 |
| ·毒株 | 第24页 |
| ·鸭胚 | 第24页 |
| ·试验动物 | 第24页 |
| ·主要试剂及配制 | 第24-26页 |
| ·病毒增殖的试剂配制 | 第24-25页 |
| ·病毒纯化的试剂配制 | 第25页 |
| ·电镜观察的试剂配制 | 第25页 |
| ·病毒含量测定的试剂配制 | 第25页 |
| ·琼脂板的制备 | 第25页 |
| ·兔抗DPV IgG提纯的试剂配制 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE试剂的配制 | 第25-26页 |
| ·考马斯亮兰染色系统 | 第26页 |
| ·其他试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| 2 试验方法 | 第27-30页 |
| ·病毒增殖 | 第27页 |
| ·病毒纯化 | 第27页 |
| ·电镜观察 | 第27页 |
| ·病毒含量测定 | 第27-28页 |
| ·兔抗DPV高免血清的制备 | 第28-29页 |
| ·DPV免疫抗原的制备 | 第28页 |
| ·试验兔的免疫程序 | 第28-29页 |
| ·兔抗DPV抗体效价的检测 | 第29页 |
| ·兔抗DPV IgG提取和纯化 | 第29-30页 |
| ·饱和硫酸铵粗提兔抗DPV IgG | 第29页 |
| ·兔抗DPV IgG纯化 | 第29页 |
| ·兔抗DPV IgG纯度的检测 | 第29-30页 |
| 3 试验结果 | 第30-31页 |
| ·病毒增殖和纯化 | 第30页 |
| ·病毒粒子的超微结构观察 | 第30页 |
| ·病毒含量的测定 | 第30页 |
| ·抗体效价检测 | 第30页 |
| ·兔抗DPV IgG提取和纯化 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| ·关于DPV病毒的纯化 | 第31页 |
| ·关于DPV病毒粒子的大小和形态 | 第31-32页 |
| ·兔抗DPV IgG的制备和纯化 | 第32-33页 |
| 5 小结 | 第33-34页 |
| 第二章 间接免疫组化检测DPV gC基因疫苗在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律 | 第34-54页 |
| 1 试验材料 | 第34-35页 |
| ·质粒与毒株 | 第34页 |
| ·试验动物与免疫组织材料 | 第34页 |
| ·主要试剂的配制 | 第34-35页 |
| ·组织固定液 | 第34-35页 |
| ·苏木素染色剂 | 第35页 |
| ·免疫组化染色试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器及设备 | 第35页 |
| 2 试验方法 | 第35-38页 |
| ·试验动物免疫与组织采样 | 第35-36页 |
| ·组织样品的处理 | 第36页 |
| ·间接免疫组化检测DPV gC抗原方法的建立和优化 | 第36-38页 |
| ·间接免疫组化检测DPV gC抗原方法的优化 | 第36-37页 |
| ·间接免疫组化检测DPV gC抗原方法的建立 | 第37-38页 |
| ·判断标准 | 第38页 |
| ·特异性试验 | 第38页 |
| 3 试验结果 | 第38-47页 |
| ·间接免疫组化检测DPV gC抗原方法的建立和优化 | 第38-39页 |
| ·间接免疫组化检测DPV gC抗原方法的优化 | 第38-39页 |
| ·特异性实验 | 第39页 |
| ·基因枪轰击不同剂量的pcDNA-DPV-gC在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律 | 第39-41页 |
| ·肌肉注射不同剂量的pcDNA-DPV-gC在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律. | 第41-42页 |
| ·不同免疫途径免疫脂质体/DNA基因疫苗在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律 | 第42-44页 |
| ·不同免疫途径免疫壳聚糖/DNA基因疫苗在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律 | 第44-45页 |
| ·鸭瘟弱毒疫苗在雏鸭体内的增殖和分布规律 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-53页 |
| ·间接免疫组化染色检测pcDNA-DPV-gC在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律 | 第47-49页 |
| ·不同免疫途径对pcDNA-DPV-gC的抗原表达时相和分布规律的影响 | 第49-51页 |
| ·不同免疫剂量对pcDNA-DPV-gC的抗原表达时相和分布规律的影响 | 第51页 |
| ·不同免疫佐剂对pcDNA-DPV-gC的抗原表达时相和分布规律的影响 | 第51-52页 |
| ·pcDNA-DPV-gC基因疫苗的抗原表达和DPV弱毒疫苗增殖和分布规律的比较. | 第52-53页 |
| 5 小结 | 第53-54页 |
| 第三章 间接免疫荧光检测DPV gC基因疫苗在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律 | 第54-67页 |
| 1.试验材料 | 第54页 |
| ·质粒与毒株 | 第54页 |
| ·试验动物与免疫组织材料 | 第54页 |
| ·主要试剂及配制方法 | 第54页 |
| ·主要仪器及设备 | 第54页 |
| 2 试验方法 | 第54-56页 |
| ·试验动物免疫与组织采样 | 第54-55页 |
| ·组织样品的处理 | 第55页 |
| ·间接免疫荧光检测石蜡切片中DPV gC抗原方法的建立和优化 | 第55-56页 |
| ·间接免疫荧光检测优化条件的筛选 | 第55页 |
| ·间接免疫荧光的染色程序 | 第55-56页 |
| ·判断标准 | 第56页 |
| ·特异性试验 | 第56页 |
| 3.试验结果 | 第56-65页 |
| ·间接免疫荧光检测DPV gC抗原方法的建立和优化 | 第56-57页 |
| ·间接免疫荧光检测DPV gC抗原方法的优化 | 第56页 |
| ·特异性实验 | 第56-57页 |
| ·基因枪轰击不同剂量的pcDNA-DPV-gC在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律 | 第57-58页 |
| ·肌肉注射不同剂量的pcDNA-DPV-gC在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律. | 第58-60页 |
| ·不同免疫途径免疫脂质体/DNA基因疫苗在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律 | 第60-62页 |
| ·不同免疫途径免疫壳聚糖/DNA基因疫苗在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律 | 第62-63页 |
| ·鸭瘟弱毒疫苗在雏鸭体内的增殖和分布规律 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65页 |
| ·间接免疫荧光方法检测pcDNA-DPV-gC在雏鸭体内的抗原表达时相和分布规律 | 第65页 |
| ·鸭瘟基因疫苗研究意义和展望 | 第65页 |
| 5 小结 | 第65-67页 |
| 第三部分 结论 | 第67-68页 |
| 第四部分 参考文献 | 第68-76页 |
| 附录 | 第76-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 作者简介以及攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第115页 |
