| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-27页 |
| 1 新城疫病毒概述 | 第12-16页 |
| ·NDV的一般生物学特性 | 第12-13页 |
| ·NDV的基因组特点 | 第13-14页 |
| ·NDV致病性的分子基础 | 第14-16页 |
| 2 细胞因子研究进展 | 第16-22页 |
| ·干扰素 | 第16-19页 |
| ·白细胞介素 | 第19-22页 |
| 3 实时荧光定量PCR技术的原理及应用 | 第22-26页 |
| ·原理 | 第22-25页 |
| ·应用 | 第25-26页 |
| 4 选题目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 试验研究 | 第27-56页 |
| 1 试验材料 | 第27-29页 |
| ·鸡胚与病毒 | 第27页 |
| ·载体与菌株 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| 2 试验方法 | 第29-37页 |
| ·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·病毒感染细胞TCID_(50)测定 | 第30页 |
| ·引物设计 | 第30-31页 |
| ·质粒标准品的构建 | 第31-34页 |
| ·细胞因子与NDV基因的PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·细胞因子与NDV基因的PCR产物的胶回收 | 第32页 |
| ·感受态细胞的制作 | 第32-33页 |
| ·PCR产物的连接与转化 | 第33页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第33-34页 |
| ·细胞因子基因的DNA序列测定 | 第34页 |
| ·REAL-TIME PCR条件的优化 | 第34页 |
| ·标准曲线的生成 | 第34-35页 |
| ·Real-time PCR标准品目的DNA模板浓度的测定 | 第34-35页 |
| ·Real-time PCR标准品的稀释与标准曲线的生成 | 第35页 |
| ·新城疫F48E9毒株、LASOTA毒株分别感染鸡胚成纤维细胞 | 第35页 |
| ·RNA的提取与反转录 | 第35-36页 |
| ·RNA的提取 | 第35-36页 |
| ·反转录反应 | 第36页 |
| ·REAL-TIME PCR反应 | 第36-37页 |
| ·数据的处理与统计 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-50页 |
| ·TCID_(50)值 | 第37页 |
| ·普通PCR电泳条带 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第38-39页 |
| ·测序结果与同源性的比较 | 第39页 |
| ·质粒标准品OD_(260)的测定 | 第39页 |
| ·REAL-TIME PCR条件优化结果 | 第39-40页 |
| ·REAL-TIME PCR标准曲线 | 第40-46页 |
| ·Beta-actin标准曲线的制作 | 第40-41页 |
| ·IFN-α标准曲线的制作 | 第41页 |
| ·IFN-γ标准曲线的制作 | 第41-42页 |
| ·IL-2标准曲线的制作 | 第42页 |
| ·IL-6标准曲线的制作 | 第42-43页 |
| ·IL-10标准曲线的制作 | 第43页 |
| ·IL-13标准曲线的制作 | 第43-44页 |
| ·IL-15标准曲线的制作 | 第44页 |
| ·IL-16标准曲线的制作 | 第44-45页 |
| ·IL-18标准曲线的制作 | 第45页 |
| ·NDV标准曲线的制作 | 第45-46页 |
| ·REAL-TIME PCR结果 | 第46-50页 |
| ·NDV载量变化 | 第46-47页 |
| ·细胞因子IL-15表达情况 | 第47-48页 |
| ·细胞因子IL-18表达情况 | 第48-49页 |
| ·其它细胞因子表达情况 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-55页 |
| ·NDV不同毒株在鸡胚成纤维细胞中的增殖情况 | 第50-51页 |
| ·IFN-A在鸡胚成纤维细胞中的表达情况 | 第51-52页 |
| ·IFN-Γ在鸡胚成纤维细胞中的表达情况 | 第52页 |
| ·IL-2与IL-15在鸡胚成纤维细胞中的表达情况 | 第52-53页 |
| ·IL-6在鸡胚成纤维细胞中的表达情况 | 第53页 |
| ·IL-10在鸡胚成纤维细胞中的表达情况 | 第53-54页 |
| ·IL-13在鸡胚成纤维细胞中的表达情况 | 第54页 |
| ·IL-16在鸡胚成纤维细胞中的表达情况 | 第54-55页 |
| ·IL-18在鸡胚成纤维细胞中的表达情况 | 第55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
