摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-17页 |
1.1 前言 | 第10页 |
1.2 牛羊无角基因的研究进展 | 第10-12页 |
1.2.1 羊无角的遗传分析 | 第10-11页 |
1.2.2 无角基因的分子标记研究 | 第11-12页 |
1.3 试验中所涉及到的分子标记 | 第12页 |
1.3.1 限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism, RFLP) | 第12页 |
1.3.2 单核苷酸多态性(Single-Nucleotide Polymorphisms,SNPs) | 第12页 |
1.4 差异表达基因的研究方法 | 第12-16页 |
1.4.1 mRNA 差异显示技术(mRNA Differential Display,DDRT-PCR) | 第13页 |
1.4.2 抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization, SSH) | 第13页 |
1.4.3 基因表达系列分析(Serial Analysis of Gene Expression,SAGE) | 第13-14页 |
1.4.4 基因芯片(Gene Chip) | 第14页 |
1.4.5 RNA-Seq 技术 (RNA-Seq Technology) | 第14页 |
1.4.6 δ差异显示技术(Delta Differential DisPlay Reverse TranseriPtion PCR) | 第14-15页 |
1.4.7 应用 | 第15-16页 |
1.5 本研究的意义及其主要内容 | 第16-17页 |
1.5.1 目的意义 | 第16页 |
1.5.2 研究的主要内容 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-33页 |
2.1 实验材料 | 第17-20页 |
2.1.1 分子标记的实验组织样 | 第17页 |
2.1.2 差异显示实验组织样品 | 第17页 |
2.1.3 主要的实验试剂 | 第17-18页 |
2.1.4 主要相关试剂的配制 | 第18-19页 |
2.1.5 主要分析工具软件 | 第19页 |
2.1.6 主要的实验仪器 | 第19-20页 |
2.2 羊无角基因的分子标记的实验方法 | 第20-25页 |
2.2.1 DNA 的提取及浓度和纯度的检测 | 第20-22页 |
2.2.2 SYNJ1 基因的单核苷酸多态性分析 | 第22-25页 |
2.3 羊角基因差异表达研究的实验方法 | 第25-33页 |
2.3.1 总 RNA 提取及浓度和纯度检测 | 第25-26页 |
2.3.2 RNA 池的组建 | 第26页 |
2.3.3 δ差异显示 PCR 及检测 | 第26-28页 |
2.3.4 回收差异条带及差异条带的再扩增 | 第28-30页 |
2.3.5 差异条带的克隆及测序 | 第30-32页 |
2.3.6 假阳性片段的筛选 | 第32页 |
2.3.7 生物信息学分析 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-47页 |
3.1 羊无角 DNA 标记研究的实验结果与分析 | 第33-35页 |
3.1.1 基因组 DNA 的提取结果 | 第33页 |
3.1.2 SYNJ1 基因的单核苷酸多态性结果分析 | 第33-34页 |
3.1.3 RFLPs 结果统计分析 | 第34-35页 |
3.2 羊角基因差异表达研究结果与分析 | 第35-39页 |
3.2.1 羔羊角生长点皮肤组织总 RNA 的检测 | 第35页 |
3.2.2 δ差异 PCR 研究结果 | 第35-36页 |
3.2.3 差异片段再扩增的结果分析 | 第36页 |
3.2.4 差异条带的克隆 | 第36-37页 |
3.2.5 提取质粒 DNA 及克隆片段的酶切鉴定 | 第37页 |
3.2.6 假阳性片段的筛选结果 | 第37-38页 |
3.2.7 差异条带的同源性分析比对结果 | 第38-39页 |
3.3 相关片段序列的生物信息学分析 | 第39-47页 |
3.3.1 UBXN1 生物信息分析 | 第39-42页 |
3.3.2 APOB 生物信息分析 | 第42-43页 |
3.3.3 SYN3 生物信息分析 | 第43-45页 |
3.3.4 延伸因子 1-α1-like 生物信息分析 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-51页 |
4.1 实验材料的采集及处理 | 第47页 |
4.2 关于 SYNJ1 | 第47页 |
4.3 SNPs 的实验结果 | 第47-48页 |
4.4 关于δ差异显示技术 | 第48页 |
4.5 假阳性的验证 | 第48-49页 |
4.6 UBXN1 的功能分析 | 第49页 |
4.7 突触蛋白的功能分析 | 第49页 |
4.8 有待进一步研究的问题 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
在读期间发表的论文 | 第57-58页 |
作者简历 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |