| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-17页 |
| 1 文献综述 | 第17-31页 |
| 1.1 低温与植物生理生化代谢 | 第18-24页 |
| 1.1.1 低温对细胞膜的伤害 | 第19-21页 |
| 1.1.2 低温对光合作用的影响 | 第21-22页 |
| 1.1.3 低温对物质代谢的影响 | 第22-24页 |
| 1.2 植物耐低温调控机制 | 第24-30页 |
| 1.2.1 低温胁迫下信号转导 | 第24-25页 |
| 1.2.2 低温胁迫下基因表达调控 | 第25-30页 |
| 1.3 研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 2 西瓜交替氧化酶基因低温胁迫下功能研究 | 第31-94页 |
| 2.1 文献综述 | 第31-40页 |
| 2.1.1 高等植物线粒体与非生物胁迫响应 | 第31-32页 |
| 2.1.2 高等植物线粒体电子传递链 | 第32-34页 |
| 2.1.3 高等植物交替氧化途径及交替氧化酶 | 第34-35页 |
| 2.1.4 交替氧化途径与非生物胁迫 | 第35-37页 |
| 2.1.5 交替氧化途径的调控 | 第37-38页 |
| 2.1.6 AOX的结构及功能性位点 | 第38-40页 |
| 2.2 本研究项目的提出 | 第40页 |
| 2.3 西瓜交替氧化酶基因家族及其多态性鉴定 | 第40-57页 |
| 2.3.1 材料与方法 | 第40-48页 |
| 2.3.1.1 实验材料及生长环境 | 第40-43页 |
| 2.3.1.2 西瓜叶片DNA提取 | 第43页 |
| 2.3.1.3 RNA提取 | 第43-44页 |
| 2.3.1.4 cDNA合成 | 第44-45页 |
| 2.3.1.5 简并引物设计及AOX基因家族克隆 | 第45-46页 |
| 2.3.1.6 PCR产物纯化回收 | 第46-47页 |
| 2.3.1.7 PCR产物T-克隆构建 | 第47-48页 |
| 2.3.1.8 测序结果分析 | 第48页 |
| 2.3.1.9 进化树构建 | 第48页 |
| 2.3.1.10 不同西瓜亚种间ClAOX多态性检测 | 第48页 |
| 2.3.2 结果分析 | 第48-55页 |
| 2.3.2.1 ClAOX基因家族成员鉴定 | 第48-52页 |
| 2.3.2.2 ClAOX进化分析 | 第52页 |
| 2.3.2.3 ClAOX基因结构 | 第52-54页 |
| 2.3.2.4 ClAOX多态性 | 第54-55页 |
| 2.3.3 结论与讨论 | 第55-57页 |
| 2.4 ClAOX单核苷酸多态性位点对西瓜低温抗性的调控 | 第57-94页 |
| 2.4.1 材料与方法 | 第58-70页 |
| 2.4.1.1 实验材料及生长环境 | 第58页 |
| 2.4.1.2 ClAOX~K、ClAOX~N基因开放阅读框及启动子的克隆 | 第58-59页 |
| 2.4.1.3 质粒提取 | 第59-60页 |
| 2.4.1.4 相关植物表达载体构建 | 第60-61页 |
| 2.4.1.5 酶切法ClAOX-pro-GUS载体构建 | 第61-62页 |
| 2.4.1.6 农杆菌(GV3101)感受态制备及植物表达载体转化 | 第62-63页 |
| 2.4.1.7 花序浸染法拟南芥转化 | 第63-64页 |
| 2.4.1.8 转基因拟南芥筛选鉴定 | 第64页 |
| 2.4.1.9 aoxla T-DNA插入突变体鉴定 | 第64-65页 |
| 2.4.1.10 ClAOX低温条件下表达分析 | 第65-66页 |
| 2.4.1.11 ClAOX基因RT-PCR组织表达分析 | 第66页 |
| 2.4.1.12 Gus染色 | 第66-67页 |
| 2.4.1.13 ClAOX基因的亚细胞定位 | 第67-68页 |
| 2.4.1.14 低温和氧化胁迫下表性分析 | 第68页 |
| 2.4.1.15 低温胁迫下Fv/Fm测定 | 第68页 |
| 2.4.1.16 DAB/NBT染色 | 第68-69页 |
| 2.4.1.17 外源过氧化氢抗性测定 | 第69-70页 |
| 2.4.2 结果分析 | 第70-89页 |
| 2.4.2.1 转基因植株筛选与鉴定 | 第70-71页 |
| 2.3.2.2 低温胁迫下ClAOX基因诱导表达 | 第71-72页 |
| 2.3.2.3 ClAOX组织特异性表达 | 第72-74页 |
| 2.3.2.4 ClAOX亚细胞定位 | 第74-76页 |
| 2.3.2.5 正常生长条件下植株表型 | 第76-78页 |
| 2.3.2.6 低温胁迫条件下植株表型 | 第78-80页 |
| 2.3.2.7 过氧化氢胁迫条件下植株表型 | 第80-84页 |
| 2.3.2.8 低温胁迫与ROS信号通路 | 第84-89页 |
| 2.4.3 结论与讨论 | 第89-94页 |
| 3 、西瓜ClCASP基因家族功能研究 | 第94-117页 |
| 3.1 文献综述 | 第94-96页 |
| 3.1.1 植物凯氏带 | 第94-95页 |
| 3.1.2 植物凯氏带的生理功能 | 第95-96页 |
| 3.1.3 植物凯氏带的形成及相关的基因家族 | 第96页 |
| 3.2 本研究项目的提出 | 第96-97页 |
| 3.3 材料及方法 | 第97页 |
| 3.4 结果分析 | 第97-112页 |
| 3.4.1 西瓜ClCASP基因家族 | 第97-99页 |
| 3.4.2 西瓜C1CASP基因家族组织表达 | 第99-101页 |
| 3.4.3 西瓜ClCASPL基因 | 第101-103页 |
| 3.4.4 ClCASP基因表达分析 | 第103-106页 |
| 3.4.5 CASPL负调控植株生长 | 第106-108页 |
| 3.4.6 CASPL对根系凯氏带形成的影响 | 第108-109页 |
| 3.4.7 CASPL负调控植株低温响应 | 第109-112页 |
| 3.5 西瓜ClAOX与ClCASPL之间的关系 | 第112-114页 |
| 3.6 结论与讨论 | 第114-117页 |
| 4、结论与展望 | 第117-119页 |
| 4.1 本论文的主要研究成果 | 第117-118页 |
| 4.2 本论文的主要创新之处 | 第118页 |
| 4.3 本论文的后续工作设想 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-139页 |
| 附录一 常用培养基和相关试剂的配制 | 第139-141页 |
| 附录二 本文中所用到的载体图谱 | 第141-144页 |
| 附录三 正常生长21d植株表型 | 第144-145页 |
| 附录四 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第145页 |
