摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第16-34页 |
1.1 植物的根系构型 | 第16-18页 |
1.2 植物的根系和非生物胁迫 | 第18-19页 |
1.3 植物激素生长素的信号通路 | 第19-20页 |
1.4 植物激素脱落酸的信号通路 | 第20-22页 |
1.5 脱落酸受体的功能冗余和功能多样性 | 第22页 |
1.6 MYB蛋白家族 | 第22-26页 |
1.7 生长素对根系构型的作用 | 第26-27页 |
1.8 脱落酸对根系构型的作用 | 第27-28页 |
1.9 其他植物激素对侧根的作用 | 第28-30页 |
1.10 植物激素生长素和脱落酸的拮抗作用和协同作用 | 第30-34页 |
第2章 实验材料与方法 | 第34-70页 |
2.1 主要实验仪器和试剂盒 | 第34页 |
2.2 植物材料与生长条件 | 第34-35页 |
2.3 植物材料的无菌培养 | 第35-36页 |
2.4 拟南芥侧根以及主根的测量统计 | 第36页 |
2.5 遗传杂交实验 | 第36-37页 |
2.6 分子克隆 | 第37-45页 |
2.6.1 聚合酶链式扩增反应(PCR) | 第37-38页 |
2.6.2 核酸的琼脂糖凝胶电泳及回收 | 第38-39页 |
2.6.3 Gateway克隆 | 第39-40页 |
2.6.4 酶切反应 | 第40页 |
2.6.5 T4连接体系 | 第40-41页 |
2.6.6 大肠杆菌感受态细胞的制备以及化学转化 | 第41-43页 |
2.6.7 菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第43页 |
2.6.8 质粒的小量抽提 | 第43-44页 |
2.6.9 酶切鉴定阳性克隆 | 第44-45页 |
2.7 测序样品的准备 | 第45页 |
2.8 电击转化农杆菌以及农杆菌浸花转化拟南芥 | 第45-46页 |
2.9 拟南芥阳性苗的筛选 | 第46-47页 |
2.10 植物基因组的抽提以及纯合体鉴定 | 第47-49页 |
2.11 植物RNA的抽提 | 第49-50页 |
2.12 RNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第50页 |
2.13 RNA的反转录 | 第50-52页 |
2.14 荧光定量PCR | 第52-53页 |
2.15 拟南芥原生质体的瞬时转化 | 第53-56页 |
2.15.1 质粒大量抽提 | 第53-54页 |
2.15.2 拟南芥原生质体的制备及转化 | 第54-56页 |
2.16 酵母双杂交 | 第56-59页 |
2.17 染色体免疫共沉淀 | 第59-62页 |
2.18 植物总蛋白的粗略抽提 | 第62-63页 |
2.19 蛋白免疫沉淀实验 | 第63-64页 |
2.20 Western Blot实验 | 第64-67页 |
2.21 原核蛋白的表达 | 第67-68页 |
2.22 凝胶阻滞实验 | 第68-70页 |
第3章 脱落酸受体PYL8通过结合MYB转录因子进而调控植物侧根发育 | 第70-84页 |
3.1 实验结果 | 第70-81页 |
3.1.1 PYL8促进侧根从脱落酸的生长抑制中恢复 | 第70-72页 |
3.1.2 脱落酸对侧根的抑制是通过PYLs,PP2Cs,SnRK2s来实现的 | 第72页 |
3.1.3 在pyl8及脱落酸不敏感突变体中脱落酸对主根生长和侧根发生的影响 | 第72-74页 |
3.1.4 外源添加生长素促进pyl8突变体中被脱落酸抑制的侧根生长 | 第74-75页 |
3.1.5 PYL8通过增强MYB77的作用来调控侧根发育 | 第75-79页 |
3.1.6 PYL8同时增强了MYB77的同源蛋白的转录活性 | 第79-81页 |
3.2 实验讨论 | 第81-84页 |
3.2.1 脱落酸信号通路抑制侧根在静止期的生长 | 第81页 |
3.2.2 盐胁迫和施加脱落酸对植物侧根发育的作用机制 | 第81-83页 |
3.2.5 后续实验 | 第83-84页 |
第4章 脱落酸受体PYL9通过结合MYB转录因子进而调控植物侧根发育 | 第84-102页 |
4.1 实验结果 | 第84-96页 |
4.1.1 脱落酸处理下pyl8-1pyl9双突变体的主根和侧根发生的抑制程度比pyl8-1低 | 第84-87页 |
4.1.2 脱落酸处理下pyl8-1pyl9双突变体的侧根静止期长于pyl8-1 | 第87-89页 |
4.1.3 外源添加生长素可以促进pyl8-1pyl9双突变体中被脱落酸抑制的侧根生长 | 第89页 |
4.1.4 诱导表达PYL9蛋白引起主根和侧根的异常生长 | 第89-92页 |
4.1.5 PYL9蛋白和MYB转录因子相互作用 | 第92-93页 |
4.1.6 脱落酸和生长素可以促进PYL9增强MYB转录因子的转录活性 | 第93-96页 |
4.2 实验讨论 | 第96-102页 |
4.2.1 简要总结 | 第96页 |
4.2.2 侧根生长对脱落酸的超敏感揭示了脱落酸的一个重要功能 | 第96-97页 |
4.2.3 脱落酸诱导的侧根生长静止需要脱落酸受体介导其恢复 | 第97-98页 |
4.2.4 生长素和脱落酸的相互作用 | 第98-99页 |
4.2.5 后续实验 | 第99-102页 |
参考文献 | 第102-116页 |
附录A 实验使用的引物序列 | 第116-122页 |
附录B 基因编号信息 | 第122-124页 |
附录C 缩略词 | 第124-126页 |
致谢 | 第126-128页 |
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第128页 |