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长牡蛎免疫球蛋白超家族(IgSF)成员结构与功能的研究

致谢第5-6页
摘要第6-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第16-40页
    第一节 免疫球蛋白研究概述第16-26页
        一、免疫球蛋白的定义第16页
        二、免疫球蛋白的结构和分类第16-19页
        三、免疫球蛋白的功能第19-22页
        四、免疫球蛋白多样性的产生机制第22-24页
        五、免疫球蛋白的进化第24-26页
    第二节 免疫球蛋白超家族研究概述第26-31页
        一、免疫球蛋白超家族的定义第26页
        二、免疫球蛋白结构域简介第26-28页
        三、免疫球蛋白家族分子的分类第28-30页
        四、免疫球蛋白家族分子的功能第30-31页
    第三节 无脊椎动物免疫球蛋白超家族的研究进展第31-39页
        一、无脊椎动物免疫球蛋白超家族分子的功能第32-34页
        二、无脊椎动物免疫球蛋白家族与免疫记忆第34-37页
        三、其他重要的免疫球蛋白家族分子第37-39页
    第四节 本实验的目的和意义第39-40页
第二章 实验材料和方法第40-60页
    第一节 实验材料第40-43页
        一、实验涉及的动物及菌株准备第40-41页
        二、实验采用的主要仪器第41-42页
        三、实验设计的引物信息第42-43页
    第二节 实验方法第43-60页
        一、长牡蛎免疫刺激处理及样品的收集第43-44页
        二、长牡蛎各组织总RNA提取和cDNA的合成第44-46页
        三、目的基因的克隆和基因序列信息的分析第46-49页
        四、荧光定量PCR检测第49页
        五、目的蛋白的原核表达、纯化和蛋白复性第49-51页
        六、多克隆抗体的制备第51-52页
        七、蛋白亚细胞定位检测第52页
        八、重组融合蛋白的PAMPs结合活性实验第52-53页
        九、重组融合蛋白的菌结合活性实验第53-54页
        十、LPS的pull down实验第54页
        十一、长牡蛎血淋巴细胞的吞噬率检测第54-55页
        十二、长牡蛎血细胞的凋亡检测第55页
        十三、多克隆抗体的纯化和封闭实验第55-56页
        十四、重组融合蛋白的血细胞凝集活性实验第56页
        十五、重组融合蛋白的微生物凝集活性实验第56-57页
        十六、Extracellular traps(ETs)的诱导及检测第57-58页
        十七、转录组数据分析第58页
        十八、数据的统计处理第58-60页
第三章 实验结果第60-110页
    第一节 长牡蛎免疫球蛋白超家族的鉴定、注释、聚类及进化分析第60-65页
        一、长牡蛎免疫球蛋白超家族基因的鉴定第60页
        二、长牡蛎免疫球蛋白超家族基因的注释第60-62页
        三、长牡蛎免疫球蛋白超家族分子基于隐马尔科夫模型的功能聚类分析第62-64页
        四、长牡蛎免疫球蛋白超家族基因在无脊椎动物中的进化地位第64-65页
    第二节 长牡蛎免疫球蛋白超家族基因的功能转录组学研究第65-74页
        一、长牡蛎免疫球蛋白超家族分子在特异性免疫中的作用机制第65-68页
        二、长牡蛎免疫球蛋白超家族分子在选择适应性免疫中的作用机制第68-72页
        三、长牡蛎免疫球蛋白超家族在各发育时期的表达分析第72-74页
    第三节 长牡蛎连接黏附分子CgJAM-A-L免疫功能及进化研究第74-84页
        一、长牡蛎CgJAM-A-L基因与同源序列的结构域比对第74-75页
        二、长牡蛎CgJAM-A-L基因的系统发生研究第75-77页
        三、长牡蛎CgJAM-A-L对病原刺激的响应模式第77-78页
        四、长牡蛎CgJAM-A-L在CgTNF-1 处理后表达量的变化第78页
        五、长牡蛎CgJAM-A-L蛋白的原核重组表达、纯化和抗体制备第78-79页
        六、长牡蛎CgJAM-A-L在血淋巴细胞中的定位分析第79-80页
        七、长牡蛎rCgJAM-A-L蛋白PAMPs结合活性的检测第80-82页
        八、长牡蛎CgJAM-A-L重组蛋白的菌结合活性检测第82页
        九、长牡蛎重组蛋白 Cg JAM-A-L 对血淋巴细胞吞噬作用的调理功能第82-84页
    第四节 长牡蛎唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素基因CgSiglec-1免疫功能的研究第84-93页
        一、长牡蛎CgSiglec-1 基因同源序列的结构域比对第84-86页
        二、长牡蛎CgSiglec-1 基因mRNA的组织分布第86页
        三、长牡蛎CgSiglec-1 基因mRNA对病原刺激的响应模式第86-87页
        四、长牡蛎CgSiglec-1 蛋白的原核重组表达、纯化和抗体制备第87-89页
        五、长牡蛎CgSiglec-1 基因在血淋巴细胞中的亚细胞定位第89-90页
        六、长牡蛎CgSiglec-1 基因重组蛋白与PAMPs结合活性的检测第90页
        七、CgSiglec-1 调控细胞因子CgTNF-1、CgIL-17和CgIFNL的表达第90-91页
        八、CgSiglec-1 调控血淋巴细胞吞噬作用第91-92页
        九、CgSiglec-1 调节长牡蛎血淋巴细胞的凋亡第92-93页
    第五节 长牡蛎神经黏附分子CgNCAM免疫功能的研究第93-110页
        一、长牡蛎CgNCAM基因同源序列的结构域比对第93-96页
        二、长牡蛎CgNCAM基因与植物lectin的系统发生分析第96-97页
        三、长牡蛎CgNCAM基因mRNA的组织分布第97-98页
        四、长牡蛎 Cg NCAM 基因在灿烂弧菌刺激后的表达模式第98-100页
        五、长牡蛎CgNCAM蛋白的原核重组表达、纯化和抗体制备第100-101页
        六、长牡蛎CgNCAM基因在血淋巴细胞中的定位第101-102页
        七、长牡蛎CgNCAM基因重组蛋白与PAMPs的结合活性检测第102页
        八、长牡蛎CgNCAM基因重组蛋白的菌结合活性检测第102-103页
        九、长牡蛎CgNCAM基因重组蛋白的调理功能第103-104页
        十、长牡蛎CgNCAM基因重组蛋白对家兔红细胞的凝集活性第104-105页
        十一、长牡蛎CgNCAM基因重组蛋白微生物凝集活性第105-107页
        十二、长牡蛎CgNCAM基因重组蛋白参与形成细胞Extracellular traps(ETs)第107-108页
        十三、长牡蛎天然CgNCAM蛋白参与形成血淋巴细胞Extracellular traps(ETs)第108-110页
第四章 讨论第110-122页
    第一节 长牡蛎免疫球蛋白超家族分子结构和功能的多样性第110-113页
    第二节 免疫球蛋白超家族功能转录组学研究第113-116页
        一、免疫球蛋白超家族参与长牡蛎的特异性免疫应答第113-114页
        二、免疫球蛋白超家族在长牡蛎“选择适应性免疫”中发挥重要作用第114-115页
        三、免疫球蛋白超家族参与长牡蛎的发育过程第115-116页
    第三节 长牡蛎关键 Ig SF 分子功能的探究第116-122页
        一、长牡蛎连接黏附分子 Cg JAM-A-L 能够发挥模式识别受体和调理素的功能第116-118页
        二、长牡蛎唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素(Cg Siglec-1)具备广泛的识别能力,以及对吞噬、凋亡和细胞因子释放的抑制作用第118-120页
        三、长牡蛎的神经黏附分子(Cg NCAM)具备凝集素样功能和广泛的识别能力第120-122页
第五章 结论第122-125页
    一、初步查明了牡蛎中IgSF分子的结构、功能与分类第122页
    二、探明了IgSF多态性在特异性免疫和“选择适应性免疫”应答中的响应规律第122-123页
    三、揭示了几种IgSF分子对免疫应答的调控机制第123-125页
参考文献第125-146页
作者简介第146-147页
博士期间完成和发表的论文第147页

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