| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一章 BCL10基因的研究进展 | 第13-23页 |
| ·BCL10基因概述 | 第13-15页 |
| ·BCL10基因的功能 | 第15-23页 |
| ·Bcl10基因能诱发细胞凋亡 | 第15-16页 |
| ·Bcl10能激活NF-κB | 第16-19页 |
| ·Bcl10基因在免疫系统中的作用 | 第19页 |
| ·Bcl10基因与MALT淋巴瘤 | 第19-21页 |
| ·Bcl10基因研究进展 | 第21-23页 |
| 第二章 鸡BCL10基因的电子克隆与分子鉴定 | 第23-35页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·组织来源 | 第23页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第23-24页 |
| ·仪器设备 | 第24页 |
| ·菌株及载体 | 第24页 |
| ·主要分子生物学软件 | 第24页 |
| ·试剂及溶液配制 | 第24-25页 |
| ·候选基因BCL10的电子克隆 | 第25页 |
| ·BCL10基因的分子克隆 | 第25-27页 |
| ·引物设计与合成 | 第25-26页 |
| ·RNA提取 | 第26页 |
| ·RT-PCR | 第26-27页 |
| ·PMDV-BcL10重组质粒的构建 | 第27-29页 |
| ·PCR产物与T载体连接 | 第27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·连接产物转化DH5α大肠杆菌 | 第28页 |
| ·菌液PCR鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的提取 | 第29页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-32页 |
| ·电子克隆结果 | 第29-30页 |
| ·鸡Bcl10基因的外显子分析 | 第30页 |
| ·鸡Bcl10基因与其他物种Bcl10基因的同源性分析 | 第30页 |
| ·鸡Bcl10蛋白的二级结构分析 | 第30-31页 |
| ·Bcl10基因的疏水性分析及跨膜区分析 | 第31页 |
| ·Bcl10蛋白质保守结构域分析 | 第31-32页 |
| ·BCL10基因的分子克隆结果 | 第32-33页 |
| ·Bcl10基因的PCR扩增 | 第32页 |
| ·PMDV-Bcl10质粒双酶切鉴定 | 第32-33页 |
| ·PMDV-Bcl10质粒的测序结果 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第三章 鸡BCL10基因的原核表达 | 第35-44页 |
| ·材料 | 第35-38页 |
| ·菌株与质粒 | 第35页 |
| ·主要工具酶和试剂 | 第35-36页 |
| ·主要仪器和设备 | 第36页 |
| ·普通试剂的配制 | 第36页 |
| ·SDS-PAGE常用试剂配制 | 第36-38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·Bcl10基因原核表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·pETD-Bcl10重组质粒的转化及鉴定 | 第39-40页 |
| ·pET-Bcl10重组质粒转化BL21感受态 | 第40页 |
| 方法见第二章2.4.3 | 第40页 |
| ·pET-Bcl10重组质粒的鉴定 | 第40页 |
| ·重组质粒的IPTG诱导 | 第40页 |
| ·重组质粒表达蛋白的检测 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-43页 |
| ·PCR扩增结果 | 第41页 |
| ·pMD-Bcl10质粒的构建结果 | 第41页 |
| ·重组质粒pETD-Bcl10的构建结果 | 第41-42页 |
| ·pET-Bcl10质粒的构建结果 | 第42页 |
| ·重组质粒pET-Bcl10原核表达产物的SDS-PAGE检测结果 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第四章 鸡BCL10基因的真核表达 | 第44-54页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·质粒与菌株 | 第44页 |
| ·主要工具酶和试剂 | 第44-45页 |
| ·主要仪器和设备 | 第45页 |
| ·主要试剂及溶液 | 第45页 |
| ·鸡BCL10基因真核载体的构建 | 第45-50页 |
| ·引物的设计与合成 | 第45-46页 |
| ·Bcl10基因的扩增 | 第46页 |
| ·PCR产物的回收 | 第46页 |
| ·PCR产物与pMD19-T载体的连接 | 第46页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第46页 |
| ·连接产物的转化DH5α大肠杆菌 | 第46页 |
| ·重组质粒的提取 | 第46页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第46-47页 |
| ·目的基因与表达载体pEGFP-C1的连接 | 第47页 |
| ·连接产物的转化 | 第47页 |
| ·重组质粒的提取 | 第47-48页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第48页 |
| ·pEGFP-Bcl10重组质粒大提 | 第48页 |
| ·pEGFP-Bcl10重组质粒转染Vero细胞 | 第48-49页 |
| ·Vero细胞的收集 | 第49页 |
| ·Western Blot检测 | 第49-50页 |
| ·BCL10基因的真核载体构建结果 | 第50-53页 |
| ·PCR扩增结果 | 第50页 |
| ·pMDE-Bcl10重组质粒的构建结果 | 第50-51页 |
| ·重组真核表达载体pEGFP-Bcl10的构建结果 | 第51页 |
| ·测序结果分析 | 第51页 |
| ·pEGFP-Bcl10质粒大提的结果 | 第51页 |
| ·转染Vero细胞 | 第51-52页 |
| ·Western Blot检测pEGFP-Bcl10在Vero细胞中的表达 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
