| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 综述部分 | 第13-28页 |
| 第一章 猪瘟病毒研究进展 | 第13-22页 |
| ·猪瘟病毒概述 | 第13-14页 |
| ·CSFV 的形态和理化特性 | 第13-14页 |
| ·CSFV 在感染宿主体内的分布 | 第14页 |
| ·CSFV 的培养细胞 | 第14页 |
| ·猪瘟病毒基因组结构及其功能 | 第14-18页 |
| ·CSFV 的5′-UTR 和3′-UTR | 第14-15页 |
| ·CSFV 的结构蛋白及其功能 | 第15-16页 |
| ·CSFV 的非结构蛋白及其功能 | 第16-18页 |
| ·猪瘟病毒与分子伴侣的关系 | 第18-22页 |
| ·分子伴侣定义 | 第18页 |
| ·分子伴侣的分类和功能 | 第18页 |
| ·分子伴侣的抗病毒作用 | 第18-19页 |
| ·分子伴侣Jiv90 与瘟病毒属成员的相互作用 | 第19-22页 |
| 第二章 RNAI 及其在抗病毒中的应用 | 第22-28页 |
| ·RNA 干扰的发现 | 第22页 |
| ·RNAI 的作用机制 | 第22-24页 |
| ·转录后水平基因沉默 | 第22-23页 |
| ·转录水平基因沉默 | 第23-24页 |
| ·RNAI 研究的一般策略 | 第24-26页 |
| ·siRNA 序列的设计原则 | 第24页 |
| ·mRNA 靶位点对RNA 干扰效率的影响 | 第24-25页 |
| ·siRNA 常用制备方法 | 第25-26页 |
| ·RNAI 技术在抗病毒研究中的应用 | 第26-28页 |
| 试验研究 | 第28-53页 |
| 第三章 分子伴侣JIV90 基因的克隆和真核表达 | 第28-45页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·材料和常用试剂 | 第28-29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·主要试剂的配制 | 第29-30页 |
| ·方法与步骤 | 第30-36页 |
| ·猪Jiv90 基因的克隆 | 第30-32页 |
| ·真核表达载体pEGFP-C1-Jiv90 的构建及鉴定 | 第32-33页 |
| ·稳定表达Jiv90 细胞株的获得 | 第33-34页 |
| ·Real-time PCR 检测转染后Jiv90m RNA 的表达情况 | 第34-35页 |
| ·细胞接毒试验 | 第35页 |
| ·Real-time PCR 检测病毒RNA 的表达情况 | 第35-36页 |
| ·结果 | 第36-42页 |
| ·总RNA 质量检测 | 第36-37页 |
| ·RT - PCR 扩增结果 | 第37页 |
| ·真核表达载体的构建及鉴定 | 第37-38页 |
| ·转染结果的观察 | 第38页 |
| ·表达Jiv90 SUVEC 株的获得 | 第38-39页 |
| ·表达Jiv90 SUVEC 中Jiv90 基因mRNA 的相对定量结果 | 第39-40页 |
| ·细胞接毒实验结果 | 第40-41页 |
| ·表达Jiv90 SUVEC 中病毒RNA 的相对定量结果 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-45页 |
| 第四章 抑制JIV90 基因表达SHRNA 干扰载体的构建和细胞株的筛选 | 第45-53页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·材料和常用试剂 | 第45页 |
| ·实验仪器 | 第45页 |
| ·相关试剂的配制 | 第45-46页 |
| ·方法与步骤 | 第46-48页 |
| ·J iv90 基因的序列分析及四个靶点shRNA 的设计 | 第46页 |
| ·shRNA 干扰载体的构建 | 第46-48页 |
| ·干扰载体转染猪血管内皮细胞 | 第48页 |
| ·G418 筛选及阳性细胞的获得 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-51页 |
| ·干扰序列设计结果 | 第48页 |
| ·实验合成的DNA 序列 | 第48-49页 |
| ·酶切鉴定结果 | 第49页 |
| ·测序结果 | 第49-50页 |
| ·G418 筛选获得的细胞株 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
