摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第一章 细胞凋亡概述 | 第10-13页 |
·经典的细胞凋亡通路 | 第10页 |
·凋亡相关基因 | 第10-13页 |
·半胱天冬酶Caspase 家族 | 第10-11页 |
·Bcl-2 家族 | 第11页 |
·细胞凋亡抑制蛋白( inhibitor of apoptosis of proteins, IAP)家族 | 第11-13页 |
第二章 脂肪细胞凋亡 | 第13-15页 |
第三章 Sirt1 与细胞凋亡 | 第15-21页 |
·Sirt1 概述 | 第15-16页 |
·Sirt1 调控细胞凋亡 | 第16-21页 |
·Sirt1 与FoxOs | 第16-17页 |
·Sirt1 与p53 | 第17-18页 |
·Sirt1 与NF-κB | 第18页 |
·Sirt1 与Ku70 | 第18-21页 |
第四章 猪 Sirt1 基因慢病毒干扰载体的构建 | 第21-29页 |
·材料与方法 | 第21-23页 |
·试剂及仪器 | 第21页 |
·方法 | 第21-23页 |
·结果与分析 | 第23-28页 |
·琼脂糖凝胶检测shRNA 双链的形成 | 第23页 |
·空载体双酶切线性化检测 | 第23-24页 |
·pLentiH1-Sirt1 shRNA 慢病毒表达载体的鉴定 | 第24-25页 |
·慢病毒颗粒的包装及病毒滴度测定 | 第25-26页 |
·重组慢病毒颗粒感染猪前体脂肪细胞 | 第26-27页 |
·Western 印迹检测慢病毒颗粒感染前体脂肪细胞后Sirt1 的表达 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-29页 |
第五章 抑制 Sirt1 基因表达促进猪前体脂肪细胞凋亡 | 第29-35页 |
·材料与方法 | 第29-31页 |
·试剂及仪器 | 第29页 |
·方法 | 第29-31页 |
·结果与分析 | 第31-34页 |
·pLentiH1-Sirt1 shRNA 对前体脂肪细胞Sirt1 基因表达的抑制作用 | 第31页 |
·Sirt1 表达下调后前体脂肪细胞呈现凋亡特征 | 第31-32页 |
·Sirt1 表达下调对细胞凋亡率的影响 | 第32-33页 |
·抑制Sirt1 对cleaved Caspase-3 表达的影响 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
第六章 抑制 Sirt1 基因表达促进喜树碱诱导的猪前体脂肪细胞凋亡 | 第35-45页 |
·材料与方法 | 第35-37页 |
·试剂及仪器 | 第35-36页 |
·方法 | 第36-37页 |
·结果与分析 | 第37-43页 |
·喜树碱处理后前体脂肪细胞的形态学观察 | 第37-38页 |
·喜树碱处理后前体脂肪细胞cleaved Caspase-3 蛋白的表达变化 | 第38-39页 |
·抑制Sirt1 基因表达促进喜树碱诱导的猪前体脂肪细胞凋亡 | 第39-40页 |
·DNA ladder 检测 | 第40-41页 |
·Western 印迹检测Ac-p53、p53 的表达变化 | 第41-42页 |
·Western 印迹检测Bax、Bcl-2 的表达变化 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
结论 | 第45-46页 |
进一步完善或深入研究的问题 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
作者简介 | 第52页 |