| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 研究背景 | 第11-18页 |
| 1.1.1 MicroRNA的研究进展 | 第11-15页 |
| 1.1.2 MiRNA-21在肿瘤细胞中的作用 | 第15-16页 |
| 1.1.3 五氟尿嘧啶(5-FU)的作用机制 | 第16-18页 |
| 1.1.4 FasL的作用机制 | 第18页 |
| 1.2 课题研究的意义及技术路线 | 第18-21页 |
| 1.2.1 课题研究的意义 | 第18-19页 |
| 1.2.2 课题研究内容及技术路线 | 第19-21页 |
| 第2章 MiR-21靶基因的预测及功能富集分析 | 第21-28页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-22页 |
| 2.4 实验结果 | 第22-27页 |
| 2.4.1 保守的miR-21序列 | 第22-23页 |
| 2.4.2 预测miR-21的靶基因 | 第23-24页 |
| 2.4.3 miR-21靶基因的功能注释分析 | 第24-26页 |
| 2.4.4 MiR-21靶基因的KEGG通路分析 | 第26-27页 |
| 2.4.5 确定实验用miR-21靶基因 | 第27页 |
| 2.5 本章小结 | 第27-28页 |
| 第3章 MiR-21靶向FasL抑制结肠癌细胞对5-FU的化学敏感性 | 第28-52页 |
| 3.1 实验材料 | 第28-31页 |
| 3.1.1 实验细胞 | 第28页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.3 实验设备 | 第29页 |
| 3.1.4 引物、siRNA及miRNA mimics合成 | 第29-31页 |
| 3.2 试验方法 | 第31-43页 |
| 3.2.1 结肠癌RKO细胞培养 | 第31-33页 |
| 3.2.2 总RNA提取和反转录 | 第33-34页 |
| 3.2.3 实时定量PCR | 第34-35页 |
| 3.2.4 细胞转染 | 第35-36页 |
| 3.2.5 载体构建 | 第36-40页 |
| 3.2.6 细胞活性检测 | 第40页 |
| 3.2.7 Western blotting | 第40-42页 |
| 3.2.8 统计学分析 | 第42-43页 |
| 3.3 实验结果 | 第43-51页 |
| 3.3.1 miR-21潜在靶基因的确定 | 第43页 |
| 3.3.2 最可能的潜在的miR-21的靶基因的筛选 | 第43-47页 |
| 3.3.3 确定FasL是miR-21的直接靶基因 | 第47-48页 |
| 3.3.4 过表达miR-21和干扰FasL表达影响结肠癌细胞对5-FU耐药性 | 第48-49页 |
| 3.3.5 miR-21靶向FasL降低5-FU诱导的结肠癌细胞凋亡 | 第49-51页 |
| 3.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 讨论 | 第52-56页 |
| 结论 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文和科研成果 | 第67页 |
