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茉莉酸甲酯通过ROS诱导人非小细胞肺癌细胞凋亡及自噬的机制研究

摘要第10-11页
ABSTRACT第11页
1 前言第12-20页
    1.1 肺癌已成为当今人类生命健康的重大威胁第12页
    1.2 茉莉酸甲酯概述第12-14页
        1.2.1 茉莉酸甲酯第12-13页
        1.2.2 茉莉酸甲酯与瓦博格效应第13-14页
        1.2.3 茉莉酸甲酯抑制肿瘤的其他途径第14页
    1.3 细胞凋亡概述第14-17页
        1.3.1 细胞凋亡的定义第14-15页
        1.3.2 细胞凋亡通路第15-17页
            1.3.2.1 外源性细胞凋亡通路第15页
            1.3.2.2 内源性细胞凋亡通路第15-16页
            1.3.2.3 内质网应激通路第16-17页
    1.4 细胞自噬概述第17-18页
        1.4.1 自噬的定义第17页
        1.4.2 自噬的类别及发生机制第17-18页
        1.4.3 自噬在肿瘤中的作用第18页
    1.5 ROS通路概述第18-20页
2 实验材料和试剂第20-28页
    2.1 肿瘤细胞及培养所需试剂和材料第20页
    2.2 实验试剂第20-22页
        2.2.1 常见试剂第20-21页
        2.2.2 主要抗体第21-22页
        2.2.3 质粒第22页
        2.2.4 siRNA第22页
    2.3 实验仪器第22-23页
    2.4 主要溶液及试剂配方第23-28页
        2.4.1 细胞培养相关的试剂第23-24页
        2.4.2 蛋白裂解相关试剂和配方第24-25页
        2.4.3 蛋白免疫印迹所用试剂和配方第25-28页
3. 实验方法第28-34页
    3.1 细胞培养第28-29页
        3.1.1 肿瘤细胞的复苏第28页
        3.1.2 肿瘤细胞的传代第28页
        3.1.3 肿瘤细胞的冻存第28-29页
    3.2 siRNA转染第29页
    3.3 蛋白免疫印迹实验(Western blot)第29-31页
        3.3.1 蛋白样品制备第29-31页
            3.3.1.1 收集细胞第29-30页
            3.3.1.2 裂解蛋白第30页
            3.3.1.3 考马斯亮蓝法测定蛋白含量第30页
            3.3.1.4 制备蛋白样品第30-31页
        3.3.2 跑胶与显影第31页
    3.4 SRB检测细胞存活率第31-32页
    3.5 流式细胞术检测细胞凋亡第32页
    3.6 统计学分析第32-34页
4 结果第34-48页
    4.1 MJ通过诱导凋亡抑制NSCLC细胞增殖第34-35页
    4.2 MJ通过上调死亡受体TNFRSF10B在NSCLC细胞中诱导凋亡第35-37页
    4.3 MJ通过上调转录因子DDIT3以促进TNFRSF10B的表达第37-40页
    4.4 在MJ诱导的凋亡过程中,CFLAR被下调第40-41页
    4.5 MJ诱导NSCLC细胞自噬,且该自噬能促进MJ诱导的凋亡第41-44页
    4.6 ROS物质的累积同时促进MJ诱导的凋亡和自噬第44-48页
5 讨论第48-54页
    5.1 总览第48页
    5.2 MJ诱导NSCLC细胞凋亡的机制讨论第48-50页
    5.3 MJ诱导NSCLC细胞自噬,以及自噬和凋亡的关系讨论第50-52页
    5.4 MJ诱导ROS增加,且影响自噬和凋亡的讨论第52页
    5.5 总结第52-53页
    5.6 未来的研究方向及研究的价值第53-54页
6 参考文献第54-60页
7 附录 缩略词表第60-62页
8 致谢第62-64页
9 论文发表情况第64-65页
学位论文评阅及答辩情况表第65页

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