| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-16页 |
| 实验材料 | 第16-26页 |
| 实验方法 | 第26-57页 |
| 1、细胞培养 | 第26页 |
| 2、F9细胞药物敏感浓度的确定 | 第26-27页 |
| 3、质粒扩增、提取、纯化 | 第27-29页 |
| 4、F9细胞中稳定Tet-off系统的建立 | 第29-31页 |
| 5、荧光素酶报告基因检测 | 第31页 |
| 6、F9-3E5细胞生物学特性检测 | 第31-32页 |
| 7、F9全基因组随机基因突变细胞文库的构建 | 第32-34页 |
| 8、控制小鼠睾丸畸胎瘤转移的关键基因和遗传通道的筛选和鉴定 | 第34-37页 |
| 9、F9-3E5高转移细胞株基因组DNA的提取 | 第37-38页 |
| 10、高转移性细胞基因组中TNO-PB的整合位点分析 | 第38-41页 |
| 11、基因组DNA PB插入位点的确认 | 第41-42页 |
| 12、候选基因的生物信息学分析 | 第42页 |
| 13、TSC22D1-PB克隆生物学分析 | 第42-46页 |
| 14、TSC22D1过表达载体的构建 | 第46-52页 |
| 15、TSC22D1 shRNA表达载体构建 | 第52-54页 |
| 16、TSC22D1稳定过表达及shRNA表达细胞的建立 | 第54-57页 |
| 实验结果 | 第57-77页 |
| 1、小鼠畸胎瘤细胞系F9药物敏感性检测 | 第57页 |
| 2、质粒酶切鉴定 | 第57-58页 |
| 3、稳定Tet-off调控F9细胞株的建立 | 第58页 |
| 4、F9-3E5克隆的生物学分析 | 第58-61页 |
| 5、F9全基因组随机基因突变细胞文库的构建 | 第61-63页 |
| 6、高转移小鼠畸胎瘤F9-3E5细胞株的筛选 | 第63-65页 |
| 7、候选高转移小鼠畸胎瘤F9-3E5细胞株的功能验证 | 第65-66页 |
| 8、控制肿瘤转移候选基因的克隆 | 第66-71页 |
| 9、TNO-PB插入位点确定 | 第71页 |
| 10、TSC22D1-PB单克隆中PB插入位点的确认 | 第71页 |
| 11、TSC22D1-PB单克隆受Dox调控效果 | 第71-73页 |
| 12、TSC22D1-PB单克隆的体内转移能力 | 第73-74页 |
| 13、TSC22D1过表达载体的构建 | 第74页 |
| 14、TSC22D1 shRNA表达载体的构建 | 第74页 |
| 15、TSC22D1稳定过表达及敲低细胞系的建立 | 第74-77页 |
| 讨论 | 第77-89页 |
| 总结 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-96页 |
| 缩略语 | 第96-98页 |
| 文献综述 | 第98-105页 |
| 参考文献 | 第102-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 个人简历 | 第106-107页 |
