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Omi/HtrA2裂解线粒体融合蛋白OPA1诱导脑缺血再灌注细胞凋亡的机制

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
主要英文缩略索引第10-15页
第一章 绪论第15-26页
    1.1 脑缺血再灌注损伤主要机制的概述第15-16页
    1.2 氧化应激与缺血再灌注损伤第16-17页
        1.2.1 ROS的产生第16页
        1.2.2 氧化应激导致缺血再灌注损伤的机制第16-17页
    1.3 Omi/HtrA2与脑缺血再灌注损伤第17-20页
        1.3.1 线粒体丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2的结构第17-18页
        1.3.2 Omi/HtrA2诱导细胞凋亡第18-19页
        1.3.3 Omi/HtrA2的神经保护作用第19-20页
        1.3.4 Omi/HtrA2参与脑损伤第20页
    1.4 线粒体应激与脑缺血再灌注损伤第20-22页
    1.5 线粒体融合分裂与脑缺血再灌注损伤第22-26页
        1.5.1 线粒体内膜融合相关蛋白OPA1第22-24页
        1.5.2 线粒体网络动态平衡与脑损伤第24-26页
第二章 材料与方法第26-36页
    2.1 实验材料第26-29页
        2.1.1 实验动物第26页
        2.1.2 实验细胞株第26页
        2.1.3 主要仪器及来源第26-27页
        2.1.4 主要药品及来源第27-28页
        2.1.5 主要溶液的配制第28-29页
    2.2 实验方法第29-35页
        2.2.1 tMCAO模型的制备第29页
        2.2.2 TTC(红四氮唑)染色第29-30页
        2.2.3 H&E染色第30页
        2.2.4 PC12细胞的培养第30-31页
        2.2.5 MTT法测定细胞生存率第31页
        2.2.6 总蛋白的提取第31页
        2.2.7 蛋白浓度的测定第31-32页
        2.2.8 Western Bloting第32-33页
        2.2.9 JC-1 染色第33-34页
        2.2.10 Mitotracker染色第34页
        2.2.11 免疫共沉淀第34-35页
    2.3 统计学处理第35-36页
第三章 实验结果第36-52页
    3.1 Omi/Htr A2在脑缺血再灌注损伤中的作用第36-39页
        3.1.1 TTC 染色观察大鼠各组大脑梗死面积第36-37页
        3.1.2 H&E 染色观察大鼠脑皮质神经细胞损伤变化第37页
        3.1.3 Western Blot 检测大鼠脑缺血侧皮质凋亡相关蛋白的表达第37-38页
        3.1.4 Western Blot 检测大鼠脑缺血侧皮质 Omi/Htr A2 的表达第38-39页
    3.2 Omi/Htr A2对氧化应激诱导凋亡的影响第39-45页
        3.2.1 MTT检测不同浓度H2O2作用下PC12细胞存活率第39-40页
        3.2.2 Western Blot检测不同浓度H2O2作用下PC12细胞凋亡蛋白的表达第40-41页
        3.2.3 倒置显微镜下观察PC12细胞形态学变化第41-42页
        3.2.4 台盼蓝染色测定PC12细胞存活率第42-43页
        3.2.5 Western Blot检测细胞凋亡第43-44页
        3.2.6 Western Blot检测PC12细胞Omi/HtrA2表达变化第44-45页
    3.3 Omi/HtrA2 对 PC12 细胞线粒体形态及功能的影响第45-49页
        3.3.1 Mitotracker染色观察Omi/HtrA2对PC12细胞线粒体形态变化的影响第45-47页
        3.3.2 Western Blot检测PC12细胞线粒体应激反应相关蛋白的变化第47-48页
        3.3.3 JC-1 染色检测PC12细胞线粒体膜电势变化第48-49页
    3.4 Omi/HtrA2对PC12细胞OPA1表达变化的影响第49-52页
        3.4.1 Western Blot检测PC12细胞OPA1变化第49-51页
        3.4.2 免疫共沉淀检测Omi/Htr A2与OPA1的相互作用第51-52页
第四章 讨论第52-56页
结论第56-57页
参考文献第57-63页
作者简介及科研成果第63-64页
致谢第64页

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