| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| 1.1 棉花遗传转化研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 常见的棉花遗传转化技术 | 第14-20页 |
| 1.2.1 基因枪法 | 第15-16页 |
| 1.2.2 花粉管通道法 | 第16-18页 |
| 1.2.3 农杆菌介导法 | 第18-20页 |
| 1.3 抗草甘膦基因工程研究进展 | 第20-24页 |
| 1.3.1 草甘膦简介 | 第20-21页 |
| 1.3.2 草甘膦作用机理 | 第21-22页 |
| 1.3.3 抗草甘膦棉花新品种选育 | 第22-24页 |
| 1.4 抗除草剂转基因棉花推广种植情况 | 第24-25页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第25-26页 |
| 第二章 高抗草甘膦表达载体的构建 | 第26-42页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第26-29页 |
| 2.1.1 菌株与质粒载体 | 第26-27页 |
| 2.1.2 培养基及试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要试剂(盒)、酶 | 第28-29页 |
| 2.2 试验方法 | 第29-36页 |
| 2.2.1 设计引物与活化验证试验的菌株 | 第29-30页 |
| 2.2.2 大肠杆菌质粒DNA的抽提 | 第30-31页 |
| 2.2.3 大肠杆菌感受态制备及热击转化 | 第31-32页 |
| 2.2.4 质粒载体的改造 | 第32-35页 |
| 2.2.5 农杆菌电击感受态的制备及电击 | 第35-36页 |
| 2.3 结果与分析 | 第36-40页 |
| 2.3.1 菌株鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3.2 重组质粒酶切验证 | 第37-38页 |
| 2.3.3 重组质粒PCR验证EPSPS-G6目的基因 | 第38-39页 |
| 2.3.4 转化后农杆菌菌株的验证 | 第39-40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 农杆菌活体转化法的优化与高抗草甘膦棉花新种质创制 | 第42-67页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42-46页 |
| 3.1.1 材料与试剂、设备 | 第42-43页 |
| 3.1.2 方法与操作 | 第43-46页 |
| 3.2 转化后代的筛选 | 第46-47页 |
| 3.2.1 不同转化方法的转化效率 | 第46页 |
| 3.2.2 草甘膦筛选植株PCR检测 | 第46-47页 |
| 3.3 抗性棉花品系的分子学检测及农艺性状测定 | 第47-50页 |
| 3.3.1 抗草甘瞵棉系的分子特征鉴定 | 第47-49页 |
| 3.3.2 莽草酸含量测定 | 第49-50页 |
| 3.3.3 转基因棉系抗性分析 | 第50页 |
| 3.3.4 转基因棉系农艺性状等测定 | 第50页 |
| 3.4 结果与分析 | 第50-64页 |
| 3.4.1 转基因抗草甘膦棉花种质系的创制 | 第50-52页 |
| 3.4.2 不同转化条件效果对比 | 第52-53页 |
| 3.4.3 转EPSPS-G6基因棉花种质系的抗性表现 | 第53-57页 |
| 3.4.4 转EPSPS-G6基因棉花种质系的基因表达情况 | 第57-59页 |
| 3.4.5 转EPSPS-G6基因棉花种质系的农艺性状与纤维品质 | 第59-64页 |
| 3.5 讨论 | 第64-67页 |
| 第四章 高抗草甘膦棉花新种质生产应用前景 | 第67-75页 |
| 4.1 金华市棉花生产基本状况 | 第67-69页 |
| 4.2 金华市植棉技术转变及棉田杂草调研 | 第69-71页 |
| 4.2.1 金华市植棉方式转变 | 第69-70页 |
| 4.2.2 棉田主要杂草 | 第70-71页 |
| 4.3 除草成本调研 | 第71-72页 |
| 4.4 棉田喷施草甘膦的药害情况 | 第72页 |
| 4.5 高抗草甘膦棉花新品种应用前景 | 第72-75页 |
| 4.5.1 高抗草甘膦棉花新种质 | 第72-73页 |
| 4.5.2 应用抗草甘膦棉花品种的限制因素 | 第73页 |
| 4.5.3 高抗草甘膦棉花品种的应用前景 | 第73-75页 |
| 全文小结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
