| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 1 综述 | 第11-29页 |
| 1.1 转基因大豆的研究现状 | 第11-24页 |
| 1.1.1 世界转基因作物产业化现状 | 第11-13页 |
| 1.1.2 转基因大豆的研究和产业化情况 | 第13-16页 |
| 1.1.3 抗除草剂转基因大豆的研究和产业化情况 | 第16-20页 |
| 1.1.4 EPSPS基因与抗草甘膦转基因大豆 | 第20-24页 |
| 1.2 大豆遗传转化技术的研究概况 | 第24-28页 |
| 1.2.1 大豆遗传转化的方法研究 | 第24-26页 |
| 1.2.2 农杆菌介导大豆转化的主要影响因素 | 第26-28页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-31页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 2.1.2 目的基因、载体和菌株 | 第29-30页 |
| 2.1.3 酶类 | 第30-31页 |
| 2.1.4 常用试剂、试剂盒 | 第31页 |
| 2.1.5 各种溶液及培养基的配制 | 第31页 |
| 2.1.6 常用试剂和仪器 | 第31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-44页 |
| 2.2.1 质粒小量制备 | 第31页 |
| 2.2.2 酶切反应 | 第31-32页 |
| 2.2.3 凝胶回收 | 第32页 |
| 2.2.4 DNA片段连接 | 第32-33页 |
| 2.2.5 大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第33-34页 |
| 2.2.6 根癌农杆菌感受态的制备及转化 | 第34页 |
| 2.2.7 PCR技术 | 第34-35页 |
| 2.2.8 农杆菌介导的大豆子叶结转化法 | 第35-37页 |
| 2.2.9 转基因植株快速鉴定方法 | 第37页 |
| 2.2.10 Western blot印记检测 | 第37-38页 |
| 2.2.11 EPSPS定量检测方法 | 第38-39页 |
| 2.2.12 测定总可溶性蛋白的Bradford法 | 第39-40页 |
| 2.2.13 Southern blot | 第40-43页 |
| 2.2.14 转基因大豆植株温室抗药性测定 | 第43-44页 |
| 3 实验结果及分析 | 第44-52页 |
| 3.1 载体构建和检测 | 第44-45页 |
| 3.2 农杆菌介导大豆转化结果 | 第45-46页 |
| 3.3 转基因大豆抗性株系的筛选 | 第46页 |
| 3.4 转基因大豆G10evo的蛋白表达分析 | 第46-48页 |
| 3.4.1 Western blot分析 | 第46-47页 |
| 3.4.2 EPSPS蛋白表达水平测定 | 第47-48页 |
| 3.5 转基因大豆G10evo的拷贝数分析 | 第48页 |
| 3.6 G10evo的遗传稳定性分析 | 第48-50页 |
| 3.7 转基因大豆G10evo的温室草甘膦抗药性测定 | 第50-52页 |
| 4. 讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录A 分子生物学实验主要溶液及培养基 | 第61-65页 |
| 附录B 大豆转化主要培养基 | 第65-67页 |
| 附录C 常用生化试剂和仪器 | 第67页 |