| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 猪细小病毒研究进展 | 第9-21页 |
| 1 PPV的分类地位 | 第9-10页 |
| 2 PPV病毒分离 | 第10-13页 |
| 3 PPV的细胞嗜性及体外培养 | 第13-15页 |
| 4 病毒理化特性 | 第15页 |
| 5 PPV基因组结构 | 第15-16页 |
| 6 流行病学 | 第16-19页 |
| 7 PPV疫苗的研究情况 | 第19-20页 |
| 8 小结与展望 | 第20-21页 |
| 第二章 猪血清中猪细小病毒的检测及病毒分离 | 第21-33页 |
| 1 材料与方法 | 第21-26页 |
| 1.1 病料、分离细胞及实验动物 | 第21页 |
| 1.2 主要仪器 | 第21页 |
| 1.3 主要试剂 | 第21-22页 |
| 1.4 血清中DNA的提取 | 第22页 |
| 1.5 引物设计 | 第22-24页 |
| 1.6 病原检测 | 第24页 |
| 1.7 病毒分离 | 第24-25页 |
| 1.8 豚鼠红细胞的制备 | 第25页 |
| 1.9 病毒血凝效价的测定 | 第25页 |
| 1.10 病毒液中DNA的提取 | 第25-26页 |
| 1.11 病毒液DNA PCR检测 | 第26页 |
| 1.12 序列测定及同源性分析 | 第26页 |
| 2 结果 | 第26-30页 |
| 2.1 猪细小病毒病原检测结果 | 第26-27页 |
| 2.2 病毒分离结果 | 第27-28页 |
| 2.3 血凝效价结果 | 第28页 |
| 2.4 病毒液DNA PCR检测结果 | 第28页 |
| 2.5 测序引物扩增分离株PCR结果 | 第28-29页 |
| 2.6 PPV分离株16WS序列测定 | 第29页 |
| 2.7 PPV分离株16WS核苷酸序列分析 | 第29-30页 |
| 2.8 PPV分离株16WS进化分析 | 第30页 |
| 3 分析与讨论 | 第30-32页 |
| 4 小结 | 第32-33页 |
| 第三章 SYBR Green实时荧光定量PCR检测PPV方法的建立 | 第33-39页 |
| 1 材料与方法 | 第33-34页 |
| 1.1 感受态细胞 | 第33页 |
| 1.2 主要试剂 | 第33页 |
| 1.3 荧光定量PCR引物设计与合成 | 第33页 |
| 1.4 病毒DNA的提取及PCR扩增 | 第33-34页 |
| 1.5 感受态(JM109)细胞的制备 | 第34页 |
| 1.6 PMD-T-NS1重组质粒的构建 | 第34页 |
| 1.7 猪细小病毒SYBR Green实时荧光定量PCR方法的建立 | 第34页 |
| 2 结果 | 第34-37页 |
| 2.1 PPV分离株16WS PCR扩增结果 | 第34-35页 |
| 2.2 阳性鉴定结果 | 第35页 |
| 2.3 检测PPV实时荧光定量标准曲线的建立 | 第35-36页 |
| 2.4 直线回归方程的建立 | 第36-37页 |
| 3 讨论与分析 | 第37-38页 |
| 4 小结 | 第38-39页 |
| 第四章 PPV-16WS株最适培养条件的优化 | 第39-51页 |
| 1 材料与方法 | 第39-42页 |
| 1.1 细胞、毒株 | 第39页 |
| 1.2 主要仪器 | 第39页 |
| 1.3 主要试剂 | 第39页 |
| 1.4 ST细胞生长速度的测定 | 第39-40页 |
| 1.5 病毒孵育时间对病毒滴度的影响 | 第40页 |
| 1.6 细胞密度对病毒滴度的影响 | 第40页 |
| 1.7 接种量对病毒滴度的影响 | 第40-41页 |
| 1.8 收毒时间对病毒滴度的影响 | 第41页 |
| 1.9 比较六孔板培养体积对病毒滴度的影响 | 第41页 |
| 1.10 探究二氧化碳对病毒培养的影响 | 第41-42页 |
| 2 结果 | 第42-48页 |
| 2.1 ST细胞增殖速度的测定 | 第42页 |
| 2.2 病毒孵育时间对病毒滴度的影响 | 第42-43页 |
| 2.3 细胞密度对病毒滴度的影响 | 第43-44页 |
| 2.4 接种量对病毒滴度的影响 | 第44-45页 |
| 2.5 病毒收毒时间对病毒滴度的影响 | 第45-46页 |
| 2.6 六孔板培养体积对病毒滴度的影响 | 第46-47页 |
| 2.7 二氧化碳对病毒滴度的影响 | 第47-48页 |
| 3 讨论与分析 | 第48-49页 |
| 4 小结 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |
| 缩略词表 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |