| 摘要 | 第3-9页 |
| ABSTRACT | 第9-14页 |
| 前言 | 第17-20页 |
| 第一章 pLKO.1-PXR-siRNA质粒构建 | 第20-38页 |
| 1.1 引言 | 第20-21页 |
| 1.2 材料 | 第21-22页 |
| 1.2.1 主要仪器与设备 | 第21页 |
| 1.2.2 主要药品及试剂 | 第21-22页 |
| 1.2.3 菌株与质粒 | 第22页 |
| 1.3 实验方法 | 第22-31页 |
| 1.3.1 溶液的配制 | 第22-24页 |
| 1.3.2 干扰序列 | 第24页 |
| 1.3.3 pLKO.1、pMD2.G、psPAX2质粒鉴定 | 第24-27页 |
| 1.3.4 质粒重组 | 第27-31页 |
| 1.4 实验结果 | 第31-36页 |
| 1.4.1 LKO.1、pMD2.G、psPAX2 质粒鉴定 | 第31-35页 |
| 1.4.2 PXR shRNA重组质粒鉴定 | 第35-36页 |
| 1.5 讨论 | 第36-38页 |
| 第二章 PXR基因沉默细胞株的构建 | 第38-55页 |
| 2.1 引言 | 第38页 |
| 2.2 材料 | 第38-41页 |
| 2.2.1 主要仪器与设备 | 第38-39页 |
| 2.2.2 主要药品及试剂 | 第39-40页 |
| 2.2.3 人肝癌细胞(HepG2) | 第40-41页 |
| 2.3 实验方法 | 第41-49页 |
| 2.3.1 溶液的配制 | 第41-43页 |
| 2.3.2 复苏、传代、冻存 | 第43-44页 |
| 2.3.3 HepG2细胞生长曲线建立 | 第44页 |
| 2.3.4 细胞稳定转染 | 第44-45页 |
| 2.3.5 Western-blot实验 | 第45-49页 |
| 2.3.6 统计分析 | 第49页 |
| 2.4 实验结果 | 第49-53页 |
| 2.4.1 HepG2细胞生长曲线 | 第49-50页 |
| 2.4.2 蛋白定量 | 第50-51页 |
| 2.4.3 Western blot对PXR、CYP3A4、P-gp蛋白水平表达的检测 | 第51-53页 |
| 2.5 讨论 | 第53-55页 |
| 第三章 黄连素通过PXR通路调控CYP3A4和P-gp的表达 | 第55-71页 |
| 3.1 引言 | 第55页 |
| 3.2 材料 | 第55-56页 |
| 3.2.1 主要仪器与设备 | 第55页 |
| 3.2.2 主要药品及试剂 | 第55-56页 |
| 3.3 实验方法 | 第56-60页 |
| 3.3.1 溶液的配制 | 第56页 |
| 3.3.2 BBR对HepG2细胞毒性实验 | 第56-57页 |
| 3.3.3 分组给药 | 第57页 |
| 3.3.4 Western-blot实验 | 第57页 |
| 3.3.5 RTQ-PCR实验 | 第57-60页 |
| 3.3.6 统计分析 | 第60页 |
| 3.4 实验结果 | 第60-67页 |
| 3.4.1 BBR对HepG2和PXR沉默细胞毒性试验结果 | 第60-61页 |
| 3.4.2 BBR对CYP3A4、P-gp蛋白水平表达的影响 | 第61-65页 |
| 3.4.3 BBR对CYP3A4、MDR1 mRNA水平表达的影响 | 第65-67页 |
| 3.5 讨论 | 第67-71页 |
| 第四章 结论与展望 | 第71-74页 |
| 4.1 结论 | 第71-72页 |
| 4.2 展望 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 综述 | 第80-93页 |
| 参考文献 | 第90-93页 |
| 中英文缩写词对照表 | 第93-94页 |
| 攻读学位期间成果 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
