摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 绪论 | 第11-23页 |
1.1 土壤铜污染及其危害 | 第11-12页 |
1.1.1 土壤铜污染现状及来源 | 第11页 |
1.1.2 土壤铜污染的特点和危害 | 第11-12页 |
1.2 兼性金属型植物海州香薷 | 第12-13页 |
1.3 植物酸性转化酶 | 第13-15页 |
1.3.1 酸性转化酶概述 | 第13页 |
1.3.2 细胞壁转化酶 | 第13-14页 |
1.3.3 液泡转化酶 | 第14-15页 |
1.4 植物启动子 | 第15-16页 |
1.4.1 启动子的基本结构 | 第15页 |
1.4.2 启动子的类型和功能 | 第15-16页 |
1.5 表观遗传学与DNA甲基化 | 第16-22页 |
1.5.1 表观遗传学基本概念 | 第16-17页 |
1.5.2 植物DNA甲基化及作用机制 | 第17-18页 |
1.5.3 DNA甲基化与基因表达的调控 | 第18-20页 |
1.5.4 非生物胁迫与植物DNA甲基化 | 第20-21页 |
1.5.5 DNA甲基化检测方法 | 第21-22页 |
1.6 研究内容、目的和意义 | 第22-23页 |
2 海州香薷基因组DNA提取方法改良 | 第23-36页 |
2.1 实验材料、试剂和仪器 | 第23-26页 |
2.1.1 植物材料 | 第23-24页 |
2.1.2 主要试剂及其配制 | 第24-25页 |
2.1.3 仪器设备 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-28页 |
2.2.1 传统CTAB法提取海州香薷基因组DNA | 第26页 |
2.2.2 改良CTAB法提取海州香薷基因组DNA | 第26-27页 |
2.2.3 试剂盒法提取海州香薷基因组DNA | 第27页 |
2.2.4 DNA质量和浓度检测 | 第27-28页 |
2.3 结果与讨论 | 第28-35页 |
2.3.1 实验结果 | 第28-34页 |
2.3.2 分析与讨论 | 第34-35页 |
2.4 小结 | 第35-36页 |
3 铜胁迫对海州香薷酸性转化酶基因启动子甲基化的影响 | 第36-65页 |
3.1 实验材料、试剂和仪器 | 第36-37页 |
3.1.1 植物培养与铜处理 | 第36页 |
3.1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
3.1.3 仪器设备 | 第37页 |
3.2 实验方法 | 第37-46页 |
3.2.1 海州香薷基因组DNA提取及质量检测 | 第37页 |
3.2.2 海州香薷酸性转化酶基因启动子PCR扩增 | 第37-38页 |
3.2.3 基因组DNA亚硫酸氢盐转化 | 第38-40页 |
3.2.4 亚硫酸氢盐转化后目的序列的PCR扩增(BSP) | 第40-44页 |
3.2.5 PCR扩增产物的检测、纯化、体外重组和转化 | 第44-45页 |
3.2.6 阳性克隆菌液PCR验证及测序 | 第45-46页 |
3.2.7 启动子序列分析和CpG岛预测 | 第46页 |
3.2.8 数据分析 | 第46页 |
3.3 实验结果 | 第46-60页 |
3.3.1 提取基因组DNA完整性、纯度和浓度检测 | 第46-47页 |
3.3.2 海州香薷酸性转化酶基因启动子PCR扩增 | 第47-49页 |
3.3.3 亚硫酸氢钠转化效率检测及验证 | 第49-50页 |
3.3.4 海州香薷液泡转化酶基因启动子(EhvINVP)分段BSP | 第50-53页 |
3.3.5 海州香薷细胞壁转化酶基因启动子(EhcwINVP)分段BSP | 第53-55页 |
3.3.6 海州香薷液泡转化酶基因启动子(EhvINVP)的甲基化水平 | 第55-56页 |
3.3.7 海州香薷液泡转化酶基因启动子(EhvINVP)的甲基化模式 | 第56-58页 |
3.3.8 海州香薷细胞壁转化酶基因启动子(EhcwINVP)的甲基化水平 | 第58页 |
3.3.9 海州香薷细胞壁转化酶基因启动子(EhcwINVP)的甲基化模式 | 第58-60页 |
3.4 分析与讨论 | 第60-64页 |
3.4.1 关于亚硫酸氢盐测序技术的探讨 | 第60-61页 |
3.4.2 海州香薷液泡转化酶基因启动子(EhvINVP)的甲基化水平和模式 | 第61-62页 |
3.4.3 海州香薷细胞壁转化酶基因启动子(EhcwINVP)的甲基化水平和模式 | 第62-63页 |
3.4.4 铜胁迫下海州香薷酸性转化酶基因启动子甲基化的进一步探讨 | 第63-64页 |
3.5 小结 | 第64-65页 |
4 结论与展望 | 第65-67页 |
4.1 结论 | 第65-66页 |
4.2 展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-77页 |
致谢 | 第77-78页 |