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铜胁迫下海州香薷酸性转化酶基因启动子的甲基化研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
1 绪论第11-23页
    1.1 土壤铜污染及其危害第11-12页
        1.1.1 土壤铜污染现状及来源第11页
        1.1.2 土壤铜污染的特点和危害第11-12页
    1.2 兼性金属型植物海州香薷第12-13页
    1.3 植物酸性转化酶第13-15页
        1.3.1 酸性转化酶概述第13页
        1.3.2 细胞壁转化酶第13-14页
        1.3.3 液泡转化酶第14-15页
    1.4 植物启动子第15-16页
        1.4.1 启动子的基本结构第15页
        1.4.2 启动子的类型和功能第15-16页
    1.5 表观遗传学与DNA甲基化第16-22页
        1.5.1 表观遗传学基本概念第16-17页
        1.5.2 植物DNA甲基化及作用机制第17-18页
        1.5.3 DNA甲基化与基因表达的调控第18-20页
        1.5.4 非生物胁迫与植物DNA甲基化第20-21页
        1.5.5 DNA甲基化检测方法第21-22页
    1.6 研究内容、目的和意义第22-23页
2 海州香薷基因组DNA提取方法改良第23-36页
    2.1 实验材料、试剂和仪器第23-26页
        2.1.1 植物材料第23-24页
        2.1.2 主要试剂及其配制第24-25页
        2.1.3 仪器设备第25-26页
    2.2 实验方法第26-28页
        2.2.1 传统CTAB法提取海州香薷基因组DNA第26页
        2.2.2 改良CTAB法提取海州香薷基因组DNA第26-27页
        2.2.3 试剂盒法提取海州香薷基因组DNA第27页
        2.2.4 DNA质量和浓度检测第27-28页
    2.3 结果与讨论第28-35页
        2.3.1 实验结果第28-34页
        2.3.2 分析与讨论第34-35页
    2.4 小结第35-36页
3 铜胁迫对海州香薷酸性转化酶基因启动子甲基化的影响第36-65页
    3.1 实验材料、试剂和仪器第36-37页
        3.1.1 植物培养与铜处理第36页
        3.1.2 主要试剂第36-37页
        3.1.3 仪器设备第37页
    3.2 实验方法第37-46页
        3.2.1 海州香薷基因组DNA提取及质量检测第37页
        3.2.2 海州香薷酸性转化酶基因启动子PCR扩增第37-38页
        3.2.3 基因组DNA亚硫酸氢盐转化第38-40页
        3.2.4 亚硫酸氢盐转化后目的序列的PCR扩增(BSP)第40-44页
        3.2.5 PCR扩增产物的检测、纯化、体外重组和转化第44-45页
        3.2.6 阳性克隆菌液PCR验证及测序第45-46页
        3.2.7 启动子序列分析和CpG岛预测第46页
        3.2.8 数据分析第46页
    3.3 实验结果第46-60页
        3.3.1 提取基因组DNA完整性、纯度和浓度检测第46-47页
        3.3.2 海州香薷酸性转化酶基因启动子PCR扩增第47-49页
        3.3.3 亚硫酸氢钠转化效率检测及验证第49-50页
        3.3.4 海州香薷液泡转化酶基因启动子(EhvINVP)分段BSP第50-53页
        3.3.5 海州香薷细胞壁转化酶基因启动子(EhcwINVP)分段BSP第53-55页
        3.3.6 海州香薷液泡转化酶基因启动子(EhvINVP)的甲基化水平第55-56页
        3.3.7 海州香薷液泡转化酶基因启动子(EhvINVP)的甲基化模式第56-58页
        3.3.8 海州香薷细胞壁转化酶基因启动子(EhcwINVP)的甲基化水平第58页
        3.3.9 海州香薷细胞壁转化酶基因启动子(EhcwINVP)的甲基化模式第58-60页
    3.4 分析与讨论第60-64页
        3.4.1 关于亚硫酸氢盐测序技术的探讨第60-61页
        3.4.2 海州香薷液泡转化酶基因启动子(EhvINVP)的甲基化水平和模式第61-62页
        3.4.3 海州香薷细胞壁转化酶基因启动子(EhcwINVP)的甲基化水平和模式第62-63页
        3.4.4 铜胁迫下海州香薷酸性转化酶基因启动子甲基化的进一步探讨第63-64页
    3.5 小结第64-65页
4 结论与展望第65-67页
    4.1 结论第65-66页
    4.2 展望第66-67页
参考文献第67-77页
致谢第77-78页

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