| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1. 前言 | 第10-20页 |
| 1.1. ABA信号途径研究进展 | 第10-15页 |
| 1.1.1. ABA受体-PYR/PYL/RCAR蛋白 | 第11-13页 |
| 1.1.2. ABA信号途径中的负调控蛋白-2C类蛋白磷酸酶(PP2C) | 第13-14页 |
| 1.1.3. ABA信号途径中的正调控蛋白-SNF1相关蛋白激酶2(SnRK2) | 第14页 |
| 1.1.4. PYR/PYL/RCAR等介导的ABA信号转导途径 | 第14-15页 |
| 1.2. 蛋白相互作用研究技术 | 第15-19页 |
| 1.2.1. 酵母双杂交技术 | 第15-16页 |
| 1.2.2. 荧光双分子互补技术 | 第16-18页 |
| 1.2.3. 免疫共沉淀技术 | 第18页 |
| 1.2.4. Pull-down技术 | 第18-19页 |
| 1.3. 本研究的主要内容、目的和意义 | 第19-20页 |
| 2. 材料与方法 | 第20-36页 |
| 2.1. 植物材料 | 第20页 |
| 2.2. 菌株与载体 | 第20页 |
| 2.3. 仪器设备 | 第20页 |
| 2.4. 常用试剂 | 第20-22页 |
| 2.5. 实验方法 | 第22-36页 |
| 2.5.1. 转录因子文库筛选ABA受体互作蛋白 | 第22-26页 |
| 2.5.2. 酵母双杂交 | 第26-29页 |
| 2.5.3. 荧光双分子互补 | 第29-32页 |
| 2.5.4. 转基因植株构建 | 第32-34页 |
| 2.5.5. 基因的亚细胞定位 | 第34页 |
| 2.5.6. ABA及胁迫处理与POSF21基因表达分析 | 第34-35页 |
| 2.5.7. ABA处理与种子萌发 | 第35页 |
| 2.5.8. 原生质体转化及信号通路分析 | 第35-36页 |
| 3. 结果与分析 | 第36-52页 |
| 3.1 转录因子文库筛选ABA受体相互作用蛋白 | 第36-38页 |
| 3.1.1 pDBLeu载体构建 | 第36-37页 |
| 3.1.2 转录因子文库筛选 | 第37-38页 |
| 3.2 酵母双杂交验证转录因子POSF21与PYLs的互作 | 第38-42页 |
| 3.2.1 酵母双杂交pGADT7载体构建 | 第38-39页 |
| 3.2.2 酵母双杂交pGBKT7载体构建 | 第39-40页 |
| 3.2.3 PYLs与转录因子POSF21的酵母双杂交 | 第40-42页 |
| 3.3 荧光双分子互补验证转录因子POSF21与PYLs的互作 | 第42-45页 |
| 3.3.1 35S-SPYCE载体构建 | 第42-43页 |
| 3.3.2 35S-SPYNE载体构建 | 第43页 |
| 3.3.3 原生质体提取 | 第43-44页 |
| 3.3.4 荧光双分子互补实验 | 第44-45页 |
| 3.4 POSF21的转基因植株构建 | 第45-46页 |
| 3.5 转基因及突变体植株的基因表达量检测 | 第46页 |
| 3.6 转录因子POSF21的亚细胞定位 | 第46-48页 |
| 3.6.1 pGFP2载体构建 | 第46-48页 |
| 3.6.2 原生质体转化及亚细胞定位 | 第48页 |
| 3.7 ABA及胁迫处理与POSF21基因表达分析 | 第48-50页 |
| 3.8 ABA处理与种子萌发 | 第50页 |
| 3.9 原生质体转化及ABA信号通路分析 | 第50-52页 |
| 4. 讨论 | 第52-56页 |
| 4.1 转录因子文库筛选ABA受体相互作用蛋白 | 第52页 |
| 4.2 ABA受体与转录因子POSF21相互作用的进一步验证 | 第52-53页 |
| 4.3 原生质体转化分析 | 第53-54页 |
| 4.4 POSF21基因功能分析 | 第54-56页 |
| 5. 结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
