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酵母核糖体大亚基组装过程的研究

摘要第3-4页
abstract第4页
主要英文缩略词对照表第8-9页
第1章 前言第9-41页
    1.1 核糖体的组成与功能第9-13页
    1.2 线粒体核糖体结构与功能第13-15页
    1.3 原核生物的翻译过程第15-17页
        1.3.1 翻译起始第15页
        1.3.2 翻译延伸第15-16页
        1.3.3 翻译终止第16页
        1.3.4 核糖体再循环第16-17页
    1.4 真核生物核糖体的翻译第17-19页
        1.4.1 翻译起始第17-19页
        1.4.2 翻译延伸第19页
        1.4.3 翻译终止和再循环第19页
    1.5 核糖体的组装与成熟第19-30页
        1.5.1 最初的 90S核糖体前体第20-23页
        1.5.2 亚基前体在核质中的加工第23-24页
        1.5.3 核糖体亚基前体的核输出第24-27页
        1.5.4 核糖体亚基在胞质中的成熟第27-30页
    1.6 核糖体疾病与信号通路第30-32页
    1.7 冷冻电镜的成像介绍第32-39页
        1.7.1 单颗粒重构的原理第33-35页
        1.7.2 冷冻电镜单颗粒重构的技术性突破第35-36页
        1.7.3 冷冻电镜的研究进展第36-37页
        1.7.4 典型的高分辨率结构的计算流程第37-39页
    1.8 本课题的研究意义第39-41页
第2章 实验材料与方法第41-56页
    2.1 实验仪器第41-42页
    2.2 实验材料第42-43页
        2.2.1 菌株第42页
        2.2.2 载体第42页
        2.2.3 培养基第42页
        2.2.4 缓冲液第42-43页
    2.3 实验方法第43-56页
        2.3.1 目的基因的克隆第43-45页
        2.3.2 蛋白的表达与纯化第45-46页
        2.3.3 核糖体的纯化与分离第46-47页
        2.3.4 Sdo1蛋白与核糖体的结合与验证第47页
        2.3.5 蔗糖密度梯度离心分析第47-48页
        2.3.6 共沉淀分析(Co-sedimentation assay)第48页
        2.3.7 生物膜层表面干涉技术(Bio-layer Interferometry)第48页
        2.3.8 交联质谱分析第48-49页
        2.3.9 TAP方法纯化pre-60S·Nmd3复合物第49页
        2.3.10 电镜样品的制备第49-51页
        2.3.11 冷冻样品数据收集和处理第51-53页
        2.3.12 Pre-60S·Nmd3复合物的原子模型搭建第53-54页
        2.3.13 Pre-60S·Nmd3复合物原子模型的精修第54页
        2.3.14 Pre-60S·Nmd3复合物原子模型的效验第54页
        2.3.15 Pre-60S·Nmd3复合物的数据统计结果第54-56页
第3章 Sdo1在酵母核糖体大亚基成熟过程中的研究第56-72页
    3.1 引言第56-57页
    3.2 实验结果第57-69页
        3.2.1 Sdo1与 60S的体外结合第57-58页
        3.2.2 Sdo1诱导 60S的二聚化第58-62页
        3.2.3 60S-Sdo1复合物的冷冻样品收集和分类分析第62-64页
        3.2.4 Sdo1的结构域I和II与 60S大亚基相互作用第64-65页
        3.2.5 Sdo1的domainI-II诱导引发 60S大亚基的二聚化第65-67页
        3.2.6 利用交联质谱的方法确定Sdo1在 60S上的作用位置第67-68页
        3.2.7 Sdo1与 60S结合模型的分析第68-69页
    3.3 总结第69-72页
第4章 Nmd3在酵母核糖体大亚基成熟过程中的研究第72-91页
    4.1 引言第72页
    4.2 实验结果第72-90页
        4.2.1 TAP纯化pre-60S·Nmd3复合物第72-74页
        4.2.2 冷冻样品数据收集第74页
        4.2.3 冷冻样品数据的处理第74-77页
        4.2.4 Pre-60S·Nmd3复合物原子模型的搭建第77-78页
        4.2.5 Pre-60S·Nmd3复合物结构的整体分析第78-80页
        4.2.6 Nmd3的结构分析第80-81页
        4.2.7 Nmd3与 25S rRNA相互作用关系第81-85页
        4.2.8 Nmd3的OB结构域和uL1和eL42的相互作用第85-86页
        4.2.9 Lsg1存在于pre-60S·Nmd3复合物中第86-87页
        4.2.10 Reh1结合在pre-60S·Nmd3的肽链通道中(peptide exit tunnel)第87-90页
    4.3 总结第90-91页
第5章 总结与展望第91-97页
    5.1 总结第91-95页
    5.2 展望第95-97页
参考文献第97-110页
致谢第110-112页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第112页

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