| 学位论文数据集 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-48页 |
| 1.1 ~(15)NL-苯丙氨酸的性质 | 第18-20页 |
| 1.1.1 ~(15)NL-苯丙氨酸的物理性质 | 第19页 |
| 1.1.2 ~(15)NL-苯丙氨酸的化学性质 | 第19-20页 |
| 1.2 ~(15)NL-苯丙氨酸的应用 | 第20-22页 |
| 1.2.1 L-苯丙氨酸的应用 | 第20页 |
| 1.2.2 同位素标记的氨基酸及~(15)NL-苯丙氨酸的应用 | 第20-22页 |
| 1.2.2.1 同位素标记的氨基酸在医学上的应用 | 第21页 |
| 1.2.2.2 同位素标记的氨基酸在生物学上的应用 | 第21页 |
| 1.2.2.3 同位素标记的氨基酸在药学上的应用 | 第21-22页 |
| 1.2.2.4 ~(15)NL-苯丙氨酸的应用 | 第22页 |
| 1.3 ~(15)NL-苯丙氨酸的制备 | 第22-28页 |
| 1.3.1 L-苯丙氨酸的制备 | 第22-27页 |
| 1.3.1.1 提取法 | 第22页 |
| 1.3.1.2 化学合成法 | 第22-23页 |
| 1.3.1.3 发酵法 | 第23页 |
| 1.3.1.4 酶法 | 第23-25页 |
| 1.3.1.5 苯丙氨酸解氨酶法 | 第25-27页 |
| 1.3.2 ~(15)NL-苯丙氨酸的制备 | 第27-28页 |
| 1.4 ~(15)NL-苯丙氨酸的分离与纯化 | 第28-31页 |
| 1.4.1 L-苯丙氨酸分离与纯化技术 | 第28-31页 |
| 1.4.2 HP20大孔吸附树脂法分离与纯化~(15)NL-苯丙氨酸 | 第31页 |
| 1.5 ~(15)NL-苯丙氨酸的分析方法 | 第31-32页 |
| 1.6 苯丙氨酸解氨酶的分离与纯化 | 第32-38页 |
| 1.6.1 PAL酶分离纯化方法 | 第32-34页 |
| 1.6.2 PAL酶的释放 | 第34-37页 |
| 1.6.2.1 植物及微生物细胞中PAL酶的释放 | 第34-35页 |
| 1.6.2.2 细胞破碎技术的研究进展 | 第35-37页 |
| 1.6.3 水相法分离纯化PAL酶 | 第37-38页 |
| 1.7 研究的目的和意义 | 第38-39页 |
| 1.8 研究思路及内容 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-48页 |
| 第二章 效应物对苯丙氨酸解氨酶活性的影响 | 第48-59页 |
| 2.1 材料与方法 | 第48-50页 |
| 2.1.1 化学试剂 | 第48页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第48页 |
| 2.1.3 菌种 | 第48-49页 |
| 2.1.4 培养基 | 第49页 |
| 2.1.5 培养方法及转化方法 | 第49页 |
| 2.1.6 酶促反应转化条件 | 第49页 |
| 2.1.7 L-苯丙氨酸含量的测定 | 第49页 |
| 2.1.8 PAL相对酶活力的判定 | 第49-50页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第50-56页 |
| 2.2.1 聚乙二醇6000(PEG6000)对酶活的影响 | 第50页 |
| 2.2.2 海藻糖对酶活的影响 | 第50-51页 |
| 2.2.3 二巯基苏糖醇(DTT)对酶活的影响 | 第51-52页 |
| 2.2.4 D-山梨醇对酶活的影响 | 第52页 |
| 2.2.5 甘油对酶活的影响 | 第52-54页 |
| 2.2.6 戊二醛对酶活的影响 | 第54页 |
| 2.2.7 响应面实验 | 第54-56页 |
| 2.3 小结 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 第三章 β-环糊精对酶反应的影响 | 第59-75页 |
| 3.1 材料与方法 | 第59-61页 |
| 3.1.1 化学试剂 | 第59页 |
| 3.1.2 仪器与设备 | 第59页 |
| 3.1.3 菌种 | 第59页 |
| 3.1.4 培养基 | 第59-60页 |
| 3.1.5 培养方法及转化方法 | 第60页 |
| 3.1.6 酶促反应转化条件 | 第60页 |
| 3.1.7 L-苯丙氨酸含量的测定 | 第60页 |
| 3.1.8 PAL酶活测定 | 第60-61页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第61-72页 |
| 3.2.1 肉桂酸对酶的抑制作用 | 第61-62页 |
| 3.2.2 β-环糊精对产酸的影响 | 第62-63页 |
| 3.2.3 高于肉桂酸抑制浓度时,不同添加量的β-环糊精对产酸的影响 | 第63-66页 |
| 3.2.4 不同β-环糊精添加量对肉桂酸抑制浓度的影响 | 第66-67页 |
| 3.2.5 添加β-环糊精及流加肉桂酸对酶促反应的影响 | 第67-69页 |
| 3.2.6 β-环糊精对酶反应的动力学效应 | 第69-72页 |
| 3.3 小结 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-75页 |
| 第四章 ~(15)NL-苯丙氨酸的分离与纯化 | 第75-104页 |
| 4.1 材料与方法 | 第76-80页 |
| 4.1.1 化学试剂 | 第76页 |
| 4.1.2 仪器与设备 | 第76-77页 |
| 4.1.3 上柱液预处理 | 第77页 |
| 4.1.4 树脂预处理 | 第77页 |
| 4.1.5 吸附 | 第77页 |
| 4.1.6 洗脱 | 第77页 |
| 4.1.7 样品脱色 | 第77-78页 |
| 4.1.8 结晶 | 第78页 |
| 4.1.9 L-苯丙氨酸的检测 | 第78页 |
| 4.1.9.1 茚三酮定性检测 | 第78页 |
| 4.1.9.2 HPLC检测 | 第78页 |
| 4.1.10 肉桂酸检测 | 第78-79页 |
| 4.1.11 蛋白检测 | 第79-80页 |
| 4.1.12 凯氏定氮 | 第80页 |
| 4.1.13 质谱分析 | 第80页 |
| 4.1.14 核磁共振分析 | 第80页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第80-102页 |
| 4.2.1 产物的预处理 | 第80-81页 |
| 4.2.2 HP20大孔树脂对L-Phe吸附条件的确定 | 第81-88页 |
| 4.2.2.1 样液浓度和温度对L-Phe在HP20树脂静态吸附量的影响 | 第81-82页 |
| 4.2.2.2 pH值对HP20大孔吸附树脂L-Phe静态吸附量的影响 | 第82-83页 |
| 4.2.2.3 样液L-Phe浓度对HP20动态吸附L-Phe穿透的影响 | 第83-84页 |
| 4.2.2.4 上柱流速对HP20动态吸附L-Phe穿透的影响 | 第84-85页 |
| 4.2.2.5 L-Phe浓度对HP20树脂L-Phe动态吸附率的影响 | 第85-86页 |
| 4.2.2.6 样液中NH_4~+浓度对HP20分离铵盐的影响 | 第86-87页 |
| 4.2.2.7 吸附流速对L-Phe吸附及铵盐分离的影响 | 第87-88页 |
| 4.2.3 HP20大孔树脂上L-Phe洗脱条件的确定 | 第88-92页 |
| 4.2.3.1 HP20大孔吸附树脂洗脱剂的选择 | 第88-89页 |
| 4.2.3.2 去离子水对HP20大孔树脂吸附L-Phe的动态洗脱曲线 | 第89页 |
| 4.2.3.3 60%乙醇水溶液对HP20吸附L-Phe的动态洗脱曲线 | 第89-90页 |
| 4.2.3.4 水洗脱速度对L-Phe及NH4~+洗脱率的影响 | 第90-91页 |
| 4.2.3.5 1.0BV/h水洗脱速度下L-Phe动态洗脱曲线 | 第91-92页 |
| 4.2.4 ~(15)NL-Phe的浓缩、脱色与结晶 | 第92-98页 |
| 4.2.4.1 产品的脱色 | 第93-94页 |
| 4.2.4.2 ~(15)NL-Phe纯度与丰度分析 | 第94-98页 |
| 4.2.5 原料(~(15)NH_4)_2SO_4的回收 | 第98-99页 |
| 4.2.6 ~(15)NL-Phe分离纯化产品收率及铵盐回收总核算 | 第99-100页 |
| 4.2.7 苯丙氨酸解氨酶法生产~(15)NL-Phe工艺的经济效益估算 | 第100-102页 |
| 4.3 小结 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-104页 |
| 第五章 粘红酵母Rhodotorula glutinis胞内苯丙氨酸解氨酶释放的研究 | 第104-115页 |
| 5.1 材料与方法 | 第104-105页 |
| 5.1.1 化学试剂 | 第104-105页 |
| 5.1.2 仪器与设备 | 第105页 |
| 5.1.3 菌种 | 第105页 |
| 5.1.4 粘红酵母湿细胞的制备 | 第105页 |
| 5.1.5 PAL酶活的测定 | 第105页 |
| 5.1.6 蛋白的测定 | 第105页 |
| 5.1.7 细胞破碎率的测定 | 第105页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第105-113页 |
| 5.2.1 液氮低温断裂对酶释放的影响 | 第105-106页 |
| 5.2.2 超声波破碎对酶释放的影响 | 第106-108页 |
| 5.2.3 温和渗透剂对PAL酶活和释放的影响 | 第108-110页 |
| 5.2.4 其它化学渗透剂对PAL酶活及释放的影响 | 第110-112页 |
| 5.2.5 超声与Triton渗透联用对酶释放和酶活的影响 | 第112-113页 |
| 5.3 结论 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-115页 |
| 第六章 双水相法提取胞内苯丙氨酸解氨酶的研究 | 第115-132页 |
| 6.1 材料与方法 | 第116-117页 |
| 6.1.1 化学试剂 | 第116页 |
| 6.1.2 仪器与设备 | 第116页 |
| 6.1.3 菌种 | 第116页 |
| 6.1.4 培养基 | 第116页 |
| 6.1.5 培养方法 | 第116-117页 |
| 6.1.6 粗酶的制备 | 第117页 |
| 6.1.7 双水相体系的制备 | 第117页 |
| 6.1.8 PAL酶活的测定 | 第117页 |
| 6.1.9 蛋白的测定 | 第117页 |
| 6.2 结果与讨论 | 第117-127页 |
| 6.2.1 PAL在PEG/无机盐体系中的分配 | 第117-123页 |
| 6.2.1.1 PAL在PEG/(NH_4)_2SO_4ATPS中的分配 | 第117-119页 |
| 6.2.1.2 PAL在PEG/Na_2SO_4 ATPS中的分配 | 第119-120页 |
| 6.2.1.3 PAL在PEG/Na_2CO_3ATPS中的分配 | 第120-122页 |
| 6.2.1.4 PAL在PEG/potassium phosphate ATPS中的分配 | 第122-123页 |
| 6.2.2 电解质对PAL在11.0%PEG1000/14.0%Na_2SO_4 ATPS分配的影响 | 第123-126页 |
| 6.2.3 PEG1000/Na_2SO_4 ATPS两步法提取粘红酵母胞内PAL | 第126-127页 |
| 6.3 小结 | 第127-129页 |
| 参考文献 | 第129-132页 |
| 第七章 结论与展望 | 第132-135页 |
| 7.1 结论 | 第132-133页 |
| 7.2 展望与建议 | 第133-135页 |
| 论文创新点 | 第135-136页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第136-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 作者简介 | 第138-139页 |
| 导师简介 | 第139-140页 |
| 附件 | 第140-142页 |
