| 致谢 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| 缩略语 | 第7-12页 |
| 第一部分 文献综述与实验设计方案 | 第12-32页 |
| 第一章 血管抑素的研究进展 | 第13-20页 |
| 1 血管抑素的发现 | 第13-14页 |
| 2 血管抑素的结构与功能 | 第14-17页 |
| 2．1 结构 | 第14-15页 |
| 2．2 糖基化与血管抑素 | 第15页 |
| 2．3 内源性血管抑素的来源 | 第15-16页 |
| 2．4 Kringle区之间的关系及功能 | 第16-17页 |
| 3 血管抑素的作用机理 | 第17-18页 |
| 3．1 血管抑素结合在内皮细胞表面的ATP合酶上 | 第17页 |
| 3．2 诱导内皮细胞凋亡 | 第17页 |
| 3．3 其它机理 | 第17-18页 |
| 4 血管抑素的应用 | 第18-19页 |
| 5 展望 | 第19-20页 |
| 第二章 杆状病毒表达载体系统 | 第20-29页 |
| 1 昆虫杆状病毒表达系统的基本原理 | 第20-21页 |
| 2 转移载体 | 第21-22页 |
| 3 重组病毒筛选方法的改进 | 第22-26页 |
| 4 影响昆虫表达量的因素分析 | 第26-27页 |
| 5 杆状病毒表达载体系统的优越性 | 第27-29页 |
| 第三章 实验设计方案 | 第29-32页 |
| 1 本实验的目的和意义 | 第29页 |
| 2 本研究的主要内容 | 第29-30页 |
| 3 本研究所要解决的关键性问题 | 第30页 |
| 4 实验流程图 | 第30-32页 |
| 第二部分 研究内容 | 第32-90页 |
| 第四章 家蚕杆状病毒重组转移载体的构建 | 第33-48页 |
| 4．1 材料和试剂 | 第33-35页 |
| 4．2 实验方法 | 第35-42页 |
| 4．2．1 以质粒pGEM1-angiostatin为模板PCR扩增目的片段 | 第35-36页 |
| 4．2．2 低溶点胶回收目的片段 | 第36-37页 |
| 4．2．3 连接反应 | 第37页 |
| 4．2．4 基因序列测定 | 第37页 |
| 4．2．5 重组转移载体pBacPAK-angiostatin的制备 | 第37-38页 |
| 4．2．6 E．coil TG1感受态细胞的制备 | 第38页 |
| 4．2．7 连接产物转化感受态细胞 | 第38-39页 |
| 4．2．8 碱法小批量抽提质粒DNA | 第39页 |
| 4．2．9 重组转移载体的鉴定 | 第39-41页 |
| 4．2．10 质粒的大量制备 | 第41页 |
| 4．2．11 Sepharose 4B柱纯化大量抽提的质粒DNA | 第41-42页 |
| 4．2．12 核酸电泳 | 第42页 |
| 4．3 结果与分析 | 第42-47页 |
| 4．3．1 血管抑素基因的序列测定 | 第42-44页 |
| 4．3．2 重组转移载体pBacPAK-angiostatin的构建 | 第44-46页 |
| 4．3．3 重组转移载体pBacPAK-angiostatin的鉴定 | 第46-47页 |
| 4．4 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 重组家蚕杆状病毒的筛选和鉴定 | 第48-60页 |
| 5．1 材料和试剂 | 第48-50页 |
| 5．2 实验方法 | 第50-55页 |
| 5．2．1 细胞培养与冻存、复苏 | 第50页 |
| 5．2．2 病毒培养 | 第50-51页 |
| 5．2．3 病毒滴度测定 | 第51页 |
| 5．2．4 Bm-BacPAK6DNA的提取及酶切线性化 | 第51-52页 |
| 5．2．5 重组转移质粒与线性化病毒DNA共转染 | 第52页 |
| 5．2．6 重组病毒的筛选 | 第52-53页 |
| 5．2．7 DNA斑点杂交鉴定 | 第53-55页 |
| 5．2．8 重组病毒的PCR鉴定 | 第55页 |
| 5．3 结果与讨论 | 第55-60页 |
| 5．3．1 病毒Bm-BacPAK6DNA的线性化 | 第55页 |
| 5．3．2 共转染及重组病毒的筛选 | 第55页 |
| 5．3．3 重组病毒的PCR鉴定 | 第55-58页 |
| 5．3．4 重组病毒的DNA点杂交鉴定 | 第58-59页 |
| 5．3．5 重组病毒的滴度测定 | 第59-60页 |
| 第六章 人血管抑素在家蚕细胞、幼虫和蛹中的表达 | 第60-78页 |
| 6．1 材料和试剂 | 第60-63页 |
| 6．2 实验方法 | 第63-66页 |
| 6．2．1 人脐静脉血管内皮细胞的培养 | 第63页 |
| 6．2．2 重组病毒在家蚕细胞及五龄幼虫中的表达 | 第63-64页 |
| 6．2．3 体外抑制人脐静脉内皮细胞增殖的生物活性测定 | 第64页 |
| 6．2．4 SDS-PAGE电泳分析 | 第64页 |
| 6．2．5 表达产物的ELISA检测 | 第64-65页 |
| 6．2．6 表达产物的Western blotting分析 | 第65-66页 |
| 6．3 结果分析 | 第66-75页 |
| 6．3．1 人血管抑素对体外培养的ECV304细胞增殖的影响 | 第66-73页 |
| 6．3．2 ELISA法检测家蚕细胞与幼虫在不同时间表达人血管抑素的水平 | 第73-74页 |
| 6．3．3 重组人血管抑素的SDS-PAGE和Western印迹 | 第74-75页 |
| 6．4 讨论 | 第75-78页 |
| 第七章 人血管抑素与内皮抑素协同作用的初步研究 | 第78-90页 |
| 7．1 材料与试剂 | 第78页 |
| 7．2 实验方法 | 第78-79页 |
| 7．2．1 诱导细胞凋亡实验 | 第78页 |
| 7．2．2 鸡胚尿囊膜实验（CAM） | 第78-79页 |
| 7．3 结果与分析 | 第79-88页 |
| 7．3．1 诱导细胞凋亡实验 | 第79-82页 |
| 7．3．2 鸡胚尿囊膜实验（CAM） | 第82-88页 |
| 7．4 讨论 | 第88-90页 |
| 结论 | 第90-91页 |
| 英文摘要 | 第91页 |
| 参考文献 | 第93-99页 |
| 附录 | 第99-109页 |
| 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第99-100页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第100-101页 |
| 研究论文的录用通知书 | 第101-107页 |
| 基因测序图谱 | 第107-109页 |
