中文摘要 | 第3-4页 |
目录 | 第4-6页 |
引言 | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-17页 |
1.1 物种概念 | 第7-8页 |
1.1.1 生物学物种概念 | 第7页 |
1.1.2 进化物种概念 | 第7-8页 |
1.1.3 种系发生物种概念 | 第8页 |
1.2 物种分化的过程 | 第8-9页 |
1.3 物种分化方式 | 第9-10页 |
1.3.1 异域物种分化 | 第9页 |
1.3.2 同域物种分化 | 第9-10页 |
1.4 昆虫的分子进化研究 | 第10-13页 |
1.4.1 用于昆虫分子进化研究的基因 | 第10页 |
1.4.2 昆虫线粒体DNA研究进展 | 第10-11页 |
1.4.3 昆虫分子进化研究方法-分子标记 | 第11-13页 |
1.4.3.1 RFLP | 第11-12页 |
1.4.3.2 RAPD | 第12页 |
1.4.3.3 微卫星标记 | 第12-13页 |
1.4.3.4 DNA序列测定 | 第13页 |
1.5 从DNA数据到系统发育树 | 第13-14页 |
1.6 桃蛀果蛾复合体研究进展 | 第14-17页 |
1.6.1 寄主范围与地理分布 | 第14页 |
1.6.2 生活史 | 第14页 |
1.6.3 分化研究 | 第14-16页 |
1.6.4 山茱萸蛀果蛾 | 第16-17页 |
第二章 材料和方法 | 第17-24页 |
2.1 试虫的采集和饲养 | 第17页 |
2.2 主要试剂 | 第17页 |
2.3 单个虫体基因组DNA提取 | 第17-18页 |
2.4 检测提取的DNA | 第18页 |
2.4.1 电泳检测降解情况 | 第18页 |
2.4.2 分光光度计检测DNA纯度及浓度 | 第18页 |
2.5 RAPD条件优化及体系建立 | 第18-20页 |
2.5.1 引物筛选 | 第18页 |
2.5.2 RAPD扩增条件优化 | 第18-20页 |
2.5.2.1 Mg2+浓度 | 第19页 |
2.5.2.2 模板浓度 | 第19-20页 |
2.5.2.3 dNTP浓度 | 第20页 |
2.5.2.4 引物浓度 | 第20页 |
2.5.2.5 TaqDNA聚合酶浓度 | 第20页 |
2.5.2.6 预变性时间和模板变性温度 | 第20页 |
2.5.2.7 退火温度 | 第20页 |
2.5.2.8 循环次数 | 第20页 |
2.5.3 RAPD扩增体系的建立 | 第20页 |
2.6 RAPD分析检测桃蛀果蛾复合体的遗传多态性 | 第20-21页 |
2.6.1 种群内DNA多态性检测 | 第20页 |
2.6.2 种群间DNA多态性检测 | 第20-21页 |
2.6.3 扩增产物的琼脂糖凝胶电泳和结果处理 | 第21页 |
2.7 桃蛀果蛾复合体mtDNA特异区段扩增及序列测定 | 第21-24页 |
2.7.1 特异引物设计 | 第21页 |
2.7.2 目的片段PCR | 第21-23页 |
2.7.2.1 DNA特定区段扩增原理 | 第21页 |
2.7.2.2 退火温度的确定 | 第21-22页 |
2.7.2.3 确定扩增体系各个参数 | 第22-23页 |
2.7.3 PCR产物的检测 | 第23页 |
2.7.4 序列测定 | 第23页 |
2.7.5 用Blast软件在NCBI中搜索同源序列和数据处理 | 第23-24页 |
第三章 结果与分析 | 第24-37页 |
3.1 模板检测结果 | 第24页 |
3.2 RAPD条件优化结果 | 第24-27页 |
3.2.1 Mg2+浓度 | 第24-25页 |
3.2.2 模板浓度 | 第25页 |
3.2.3 dNTP浓度 | 第25-26页 |
3.2.4 引物浓度 | 第26页 |
3.2.5 退火温度 | 第26-27页 |
3.3 RAPD扩增体系的建立 | 第27页 |
3.4 特异扩增退火温度筛选结果 | 第27-28页 |
3.5 桃蛀果蛾复合体DNA的RAPD结果与分析 | 第28-34页 |
3.5.1 种群内多态性检测结果 | 第28-29页 |
3.5.2 多样本种群间多态性检测及聚类分析 | 第29-32页 |
3.5.2.1 欧氏距离(Euclidean Distance)及聚类图 | 第29-30页 |
3.5.2.2 Cosine距离及聚类图 | 第30-31页 |
3.5.2.3 Pearson correlation距离及聚类图 | 第31-32页 |
3.5.3 单样本种群间多态性检测及聚类分析 | 第32-34页 |
3.5.3.1 Nei氏遗传距离及聚类图 | 第32-33页 |
3.5.3.2 欧氏距离(Euclidean Distance)及聚类图 | 第33-34页 |
3.5.4 多样本和单样本聚类分析结果比较 | 第34页 |
3.6 桃蛀果蛾复合体DNA序列分析 | 第34-37页 |
3.6.1 序列结果和同源序列检索 | 第34页 |
3.6.2 遗传距离及系统树 | 第34-37页 |
第四章 讨论 | 第37-39页 |
第五章 结论 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
英文摘要 | 第45页 |
附图 | 第46-51页 |
附表 | 第51-61页 |
作者筛介 | 第61页 |