携带TGEV S和PEDV S双基因的减毒沙门氏菌在猪体的免疫动态规律
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 流行性腹泻概述 | 第12-17页 |
| 1.1 病原学 | 第12页 |
| 1.2 基因及其编码蛋白 | 第12-15页 |
| 1.2.1 S基因及其编码蛋白 | 第13页 |
| 1.2.2 M基因及其编码蛋白 | 第13-14页 |
| 1.2.3 N基因及其编码蛋白 | 第14页 |
| 1.2.4 sM基因及其编码蛋白 | 第14-15页 |
| 1.2.5 开放阅读框架ORF3 | 第15页 |
| 1.3 PED传统疫苗 | 第15页 |
| 1.4 基因工程疫苗 | 第15-17页 |
| 1.4.1. 转基因植物疫苗(S蛋白) | 第16页 |
| 1.4.2 乳酸杆菌疫苗(S、N基因) | 第16页 |
| 1.4.3 重组腺病毒疫苗 | 第16页 |
| 1.4.4 亚单位疫苗 | 第16-17页 |
| 2 猪传染性胃肠炎概述 | 第17-19页 |
| 2.1 TGEV的病原学特征 | 第17页 |
| 2.2 TGEV结构蛋白与功能 | 第17-18页 |
| 2.2.1 S基因及其功能 | 第17-18页 |
| 2.3 猪传染性胃肠炎重组活载体疫苗 | 第18-19页 |
| 3 减毒沙门氏菌作为疫苗载体的研究 | 第19-21页 |
| 3.1 关于减毒沙门氏菌的减毒 | 第19-20页 |
| 3.2 关于减毒沙门氏菌作为黏膜免疫载体的应用 | 第20页 |
| 3.3 减毒沙门氏菌作为疫苗载体存在问题 | 第20-21页 |
| 4 黏膜免疫 | 第21-23页 |
| 4.1 黏膜免疫系统 | 第21页 |
| 4.2 黏膜免疫的应用 | 第21-22页 |
| 4.3 口服免疫 | 第22页 |
| 4.4 黏膜免疫存在的问题 | 第22-23页 |
| 5 本研究的目的意义 | 第23-24页 |
| 第二章 研究部分 | 第24-55页 |
| 1 材料 | 第24页 |
| 1.1 菌株及实验动物 | 第24页 |
| 1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 1.3 主要仪器 | 第24页 |
| 2 方法 | 第24-31页 |
| 2.1 疫苗菌株的鉴定 | 第24-26页 |
| 2.1.1 菌株培养 | 第24-25页 |
| 2.1.2 菌株质粒抽提 | 第25页 |
| 2.1.3 重组质粒PCR鉴定 | 第25-26页 |
| 2.1.4 重组质粒酶切鉴定 | 第26页 |
| 2.2 仔猪免疫实验 | 第26-31页 |
| 2.2.1 口服疫苗的制备 | 第26页 |
| 2.2.2 实验动物分组与免疫 | 第26-27页 |
| 2.2.3 样品采集 | 第27页 |
| 2.2.4 仔猪免疫原性测定 | 第27-31页 |
| 3 结果 | 第31-47页 |
| 3.1 重组质粒鉴定 | 第31-32页 |
| 3.1.1 重组质粒PCR鉴定 | 第31页 |
| 3.1.2 重组菌株酶切鉴定 | 第31-32页 |
| 3.2 重组菌株口服免疫结果 | 第32-47页 |
| 3.2.1 仔猪PEDV血清IgG抗体测定结果 | 第32-34页 |
| 3.2.2 仔猪PEDV粪便IgA抗体测定结果 | 第34-36页 |
| 3.2.3 仔猪TGEV血清抗体IgG测定结果 | 第36-38页 |
| 3.2.4 仔猪TGEV粪便IgA抗体测定结果 | 第38-39页 |
| 3.2.5 免疫仔猪血液T淋巴细胞增殖情况 | 第39-40页 |
| 3.2.6 仔猪血清IL-4水平测定结果 | 第40-42页 |
| 3.2.7 仔猪血清γ-干扰素水平测定结果 | 第42-44页 |
| 3.2.8 中和实验结果 | 第44-47页 |
| 4 讨论 | 第47-54页 |
| 4.1 重组减毒沙门氏菌疫苗口服免疫原性分析 | 第47-49页 |
| 4.2 影响DNA疫苗免疫效果的因素 | 第49-51页 |
| 4.2.1 关于免疫途径(口服免疫) | 第49-50页 |
| 4.2.2 关于口服疫苗载体 | 第50-51页 |
| 4.3 关于TGEV和PEDV的双基因疫苗 | 第51-52页 |
| 4.4 小鼠模型在疫苗研究中的应用 | 第52页 |
| 4.5 存在问题 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
