| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-24页 |
| ·肠炎沙门氏菌对雏鸡的感染 | 第15页 |
| ·肠炎沙门氏菌 LPS 对 TLR4 信号通路的激活 | 第15-16页 |
| ·TLR4 信号通路的研究进展 | 第16-19页 |
| ·MyD88 依赖途径 | 第17-18页 |
| ·MyD88 非依赖途径 | 第18页 |
| ·TLR4 信号途径的反向调控 | 第18-19页 |
| ·TLR4 受体氨基酸突变对信号转导功能的影响 | 第19-20页 |
| ·鸡 TLR4 受体 SNP 与肠炎沙门氏菌抗病的关系 | 第20页 |
| ·同源建模 | 第20-24页 |
| ·同源建模的步骤 | 第21-22页 |
| ·模型的准确性 | 第22-23页 |
| ·同源建模的应用 | 第23-24页 |
| 第二章 鸡TLR4 胞外段和MD-2 同源模建分析 | 第24-37页 |
| ·前言 | 第24页 |
| ·材料与方法 | 第24-26页 |
| ·生物信息数据库 | 第24页 |
| ·生物信息分析软件 | 第24-25页 |
| ·蛋白结构域和信号肽分析 | 第25页 |
| ·模板搜索与分析 | 第25页 |
| ·蛋白初步建模 | 第25页 |
| ·模型动力学优化 | 第25-26页 |
| ·动力学优化后模型进行立体化学合理性和能量合理性评估 | 第26页 |
| ·鸡TLR4 胞外段与MD-2 进行ZDOCK 对接 | 第26页 |
| ·对鸡TLR4 胞外段进行氨基酸突变分析 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-35页 |
| ·蛋白结构域和信号肽分析 | 第26-28页 |
| ·模板搜索与分析 | 第28页 |
| ·初步同源建模 | 第28-29页 |
| ·初始模型动力学优化 | 第29页 |
| ·对优化后的模型进行立体化学合理性评估 | 第29-32页 |
| ·鸡TLR4 胞外段与MD-2 进行ZDOCK 对接 | 第32-34页 |
| ·对鸡TLR4 胞外段进行氨基酸突变分析 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·模型立体化学合理性评估 | 第35-36页 |
| ·鸡MD-2 与TLR4 胞外段ZDOCK 对接 | 第36页 |
| ·对鸡TLR4 胞外段进行氨基酸突变分析 | 第36页 |
| ·结论 | 第36-37页 |
| 第三章 鸡MyD88 原核可溶性表达及单克隆抗体的制备 | 第37-50页 |
| ·前言 | 第37页 |
| ·试验材料 | 第37页 |
| ·试验试剂 | 第37页 |
| ·试剂配制 | 第37页 |
| ·试验方法 | 第37-43页 |
| ·MyD88 基因的获得 | 第37-39页 |
| ·MyD88 原核表达载体的构建与鉴定 | 第39-40页 |
| ·MyD88 诱导可溶性表达 | 第40页 |
| ·MyD88 的大量制备及纯化 | 第40页 |
| ·动物免疫 | 第40-41页 |
| ·骨髓瘤细胞的复苏和培养 | 第41页 |
| ·饲养层细胞的制备 | 第41页 |
| ·脾脏细胞的准备 | 第41-42页 |
| ·细胞融合 | 第42页 |
| ·单克隆抗体细胞株的筛选与建立 | 第42-43页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定及灵敏度检测 | 第43页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第43页 |
| ·单克隆抗体亚型和效价测定 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-47页 |
| ·MyD88 基因的获得 | 第43-44页 |
| ·MyD88 原核表达载体的构建与鉴定 | 第44页 |
| ·MyD88 诱导可溶性表达 | 第44-45页 |
| ·MyD88 的大量制备及纯化 | 第45-46页 |
| ·杂交瘤细胞株建立 | 第46页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定及灵敏度检测 | 第46-47页 |
| ·单克隆抗体腹水制备，亚型和效价测定 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| ·MyD88 原核表达 | 第47-48页 |
| ·MyD88 单克隆抗体制备 | 第48-49页 |
| ·结论 | 第49-50页 |
| 第四章 TLR4 胞外段903 和1832 SNPs 对组织载菌量和MyD88 蛋白表达量的影响 | 第50-65页 |
| ·前言 | 第50页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·试验动物及菌株 | 第50页 |
| ·试剂配制 | 第50页 |
| ·试验方法 | 第50-55页 |
| ·菌株的复活 | 第50-51页 |
| ·菌株的传代，生化分型及鉴定 | 第51页 |
| ·攻毒剂量的确定 | 第51页 |
| ·DNA 的提取 | 第51-52页 |
| ·SNP 分型 | 第52-53页 |
| ·肠炎沙门氏菌攻毒 | 第53页 |
| ·载菌量测定 | 第53页 |
| ·MyD88 蛋白相对定量 | 第53-54页 |
| ·数据统计分析 | 第54-55页 |
| ·结果 | 第55-63页 |
| ·菌株的复活 | 第55页 |
| ·菌株的传代、生化分型及鉴定 | 第55页 |
| ·903 和1832 位点的分型结果 | 第55页 |
| ·脾脏、盲肠和法氏囊MyD88 蛋白WB 相对定量 | 第55-56页 |
| ·903SNP 不同基因型载菌量和MyD88 蛋白相对表达量的差异分析 | 第56-58页 |
| ·1832SNP 不同基因型载菌量和MyD88 蛋白相对表达量的差异分析 | 第58-60页 |
| ·四种不同组合基因型载菌量和MyD88 蛋白相对表达量的差异分析 | 第60-63页 |
| ·讨论 | 第63页 |
| ·结论 | 第63-65页 |
| 第五章 全文结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 附录1: 第三章试验材料及试剂配制 | 第73-78页 |
| 附录2: 第四章试验材料及试剂配制 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简介 | 第81页 |
