| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| 第一章 前言 | 第16-30页 |
| 1.1 植物器官脱落 | 第16-17页 |
| 1.1.1 营养失衡导致发生生理脱落 | 第16页 |
| 1.1.2 逆境导致植物发生器官的胁迫脱落 | 第16-17页 |
| 1.2 植物器官脱落与激素调控 | 第17-21页 |
| 1.2.1 生长素类激素对脱落的影响 | 第17-18页 |
| 1.2.2 乙烯与植物器官脱落 | 第18-20页 |
| 1.2.3 植物器官脱落与其它内源激素调控 | 第20-21页 |
| 1.3 影响植物离区形成的基因及脱落的信号转导 | 第21-23页 |
| 1.4 植物中的MAPK级联系统 | 第23-27页 |
| 1.4.1 MAPK的分类及特点 | 第23-24页 |
| 1.4.2 MAPK参与生物胁迫反应 | 第24页 |
| 1.4.3 MAPK参与非生物胁迫反应 | 第24-25页 |
| 1.4.4 番茄MAPK的研究进展 | 第25-26页 |
| 1.4.5 植物MAPK与乙烯 | 第26-27页 |
| 1.5 植物器官脱落过程中相关酶类的研究 | 第27-29页 |
| 1.5.1 纤维素酶 | 第27-28页 |
| 1.5.2 多聚半乳糖醛酸酶 | 第28页 |
| 1.5.3 其它相关酶与脱落的关系 | 第28-29页 |
| 1.6 本研究的意义及内容 | 第29-30页 |
| 第二章 LeMAPKs对花柄外植体脱落的响应 | 第30-43页 |
| 2.1 材料与方法 | 第30-35页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第30-31页 |
| 2.1.2 试验处理 | 第31页 |
| 2.1.3 主要试剂和药品 | 第31页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第31-32页 |
| 2.1.5 番茄和拟南芥MAPK进化树构建 | 第32页 |
| 2.1.6 番茄花柄外植体脱落率调查方法 | 第32页 |
| 2.1.7 LeMAPKs A引物设计 | 第32页 |
| 2.1.8 番茄花柄外植体总RNA的提取 | 第32-33页 |
| 2.1.9 RNA纯度检测 | 第33-34页 |
| 2.1.10 反转录(合成第一条cDNA链) | 第34页 |
| 2.1.11 实时定量PCR体系 | 第34-35页 |
| 2.1.12 数据统计分析 | 第35页 |
| 2.2 结果与分析 | 第35-41页 |
| 2.2.1 LeMAPKs家族基因信息收集和整理 | 第35-36页 |
| 2.2.2 番茄和拟南芥MAPK系统发育进化树构建 | 第36-37页 |
| 2.2.3 番茄花柄外植体脱落进程分析 | 第37页 |
| 2.2.4 引物的设计 | 第37-38页 |
| 2.2.5 番茄总RNA提取结果 | 第38页 |
| 2.2.6 在番茄花柄外植体脱落中LeMAPK1基因相对表达量的变化 | 第38-39页 |
| 2.2.7 在番茄花柄外植体脱落中LeMAPK2基因相对表达量的变化 | 第39-40页 |
| 2.2.8 在番茄花柄外植体脱落中LeMAPK3基因相对表达量的变化 | 第40页 |
| 2.2.9 盐胁迫下番茄花柄外植体脱落中LeMAPKs A基因表达的变化 | 第40-41页 |
| 2.3 本章小结 | 第41-43页 |
| 第三章 LeMAPKs A参与花器官脱落作用机制 | 第43-60页 |
| 3.1 材料与方法 | 第43-47页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第43页 |
| 3.1.2 番茄花柄外植体处理方式 | 第43-44页 |
| 3.1.3 主要试剂和药品 | 第44-45页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第45页 |
| 3.1.5 MAPK阻断剂对番茄花柄外植体LeMAPKs A表达的影响 | 第45页 |
| 3.1.6 MAPK阻断剂对离体番茄花柄脱落的影响 | 第45-46页 |
| 3.1.7 粗酶液的提取 | 第46页 |
| 3.1.8 纤维素酶活力的测定(CMC) | 第46页 |
| 3.1.9 多聚半乳糖醛酸酶活性测定(PG) | 第46页 |
| 3.1.10 果胶酯酶活性测定(PE) | 第46页 |
| 3.1.11 植物激素的提取 | 第46页 |
| 3.1.12 数据统计分析 | 第46-47页 |
| 3.2 结果与分析 | 第47-59页 |
| 3.2.1 番茄花柄脱落率受MAPK阻断剂的影响 | 第47页 |
| 3.2.2 MAPK阻断剂对LeMAPKl相对表达的抑制效果 | 第47-48页 |
| 3.2.3 MAPK阻断剂对LeMAPK2相对表达的抑制效果 | 第48-49页 |
| 3.2.4 MAPK阻断剂对LeMAPK3相对表达的抑制效果 | 第49-50页 |
| 3.2.5 MAPK阻断剂对花柄外植体中生长素含量的影响 | 第50-51页 |
| 3.2.6 MAPK阻断剂对花柄外植体中脱落酸含量的影响 | 第51-53页 |
| 3.2.7 MAPK阻断剂对花柄外植体中赤霉素含量的影响 | 第53-54页 |
| 3.2.8 MAPK阻断剂对花柄外植体中纤维素酶活力的影响 | 第54-56页 |
| 3.2.9 MAPK阻断剂对花柄外植体中多聚半乳糖醛酸酶活力的影响 | 第56-57页 |
| 3.2.10 MAPK阻断剂对花柄外植体中果胶酯酶活力的影响 | 第57-59页 |
| 3.3 本章小结 | 第59-60页 |
| 第四章 LeMAPKs A参与乙烯诱导的番茄花柄外植体的脱落 | 第60-70页 |
| 4.1 材料与方法 | 第60-62页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第60页 |
| 4.1.2 试验处理 | 第60-61页 |
| 4.1.3 主要试剂和药品 | 第61页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第61页 |
| 4.1.5 脱落率的测定 | 第61页 |
| 4.1.6 激素水平、细胞壁降解酶活性的测定 | 第61-62页 |
| 4.1.7 番茄花柄离区的LeMAPKs A表达的检测 | 第62页 |
| 4.1.8 数据统计分析 | 第62页 |
| 4.2 结果与分析 | 第62-68页 |
| 4.2.1 乙烯和MAPK阻断剂对番茄花柄外植体脱落率的影响 | 第62-63页 |
| 4.2.2 MAPK阻断剂对乙烯诱导的番茄外植体脱落中激素水平的影响 | 第63-64页 |
| 4.2.3 乙烯和MAPK阻断剂对番茄花柄外植体纤维素酶的影响 | 第64-65页 |
| 4.2.4 乙烯和MAPK阻断剂对番茄花柄外植体多聚半乳糖醛酸酶的影响 | 第65页 |
| 4.2.5 乙烯和MAPK阻断剂对番茄花柄外植体果胶酯酶的影响 | 第65-66页 |
| 4.2.6 乙烯和MAPK阻断剂对番茄花柄外植体LeMAPK1表达的影响 | 第66-67页 |
| 4.2.7 乙烯和MAPK阻断剂对番茄花柄外植体LeMAPK2表达的影响 | 第67页 |
| 4.2.8 乙烯和MAPK阻断剂对番茄花柄外植体LeMAPK3表达的影响 | 第67-68页 |
| 4.3 本章小结 | 第68-70页 |
| 第五章 番茄再生系统建立及LeMAPKs A遗传转化研究 | 第70-93页 |
| 5.1 材料与方法 | 第70-81页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第70页 |
| 5.1.2 菌株和质粒 | 第70页 |
| 5.1.3 主要试剂和药品 | 第70-71页 |
| 5.1.4 主要仪器 | 第71-72页 |
| 5.1.5 番茄再生系统构建 | 第72-73页 |
| 5.1.6 番茄卡那霉素抗性试验 | 第73页 |
| 5.1.7 农杆菌感受态的制备 | 第73页 |
| 5.1.8 农杆菌的转化 | 第73页 |
| 5.1.9 农杆菌单克隆的验证 | 第73-74页 |
| 5.1.10 农杆菌侵染番茄,获得再生植株 | 第74-75页 |
| 5.1.11 卡那霉素抗性基因PCR引物设计 | 第75页 |
| 5.1.12 植株DNA的提取 | 第75-76页 |
| 5.1.13 抗性基因的扩增反应体系 | 第76页 |
| 5.1.14 植物表达载体构建流程 | 第76-77页 |
| 5.1.15 LeMAPKs A全长克隆 | 第77-78页 |
| 5.1.16 纯化并回收DNA | 第78页 |
| 5.1.17 目的片段与pEASY-Blunt载体连接 | 第78-79页 |
| 5.1.18 大肠杆菌transl-T1的转化 | 第79-80页 |
| 5.1.19 大肠杆菌质粒提取 | 第80页 |
| 5.1.20 质粒DNA双酶切 | 第80-81页 |
| 5.1.21 重组质粒的构建 | 第81页 |
| 5.2 结果与分析 | 第81-91页 |
| 5.2.1 玉米素对Micro-Tom愈伤组织和不定芽的影响 | 第81-82页 |
| 5.2.2 IAA浓度对Micro-Tom番茄愈伤组织产生和不定芽的诱导 | 第82-83页 |
| 5.2.3 不同外植体部位对番茄愈伤组织和不定芽诱导的影响 | 第83-84页 |
| 5.2.4 不同IBA浓度对不定芽生根的诱导 | 第84-85页 |
| 5.2.5 番茄再生过程 | 第85-86页 |
| 5.2.6 Kan浓度对番茄子叶不定芽再生的影响 | 第86页 |
| 5.2.7 抗性芽的再生 | 第86页 |
| 5.2.8 Kan抗性植株的鉴定 | 第86-87页 |
| 5.2.9 番茄A类LeMAPKs目的片段的克隆 | 第87-88页 |
| 5.2.10 菌落PCR验证 | 第88-89页 |
| 5.2.11 番茄的pBI121-LeMAPKs A农杆菌介导转化及植株再生 | 第89页 |
| 5.2.12 过表达LeMAPKs A植株鉴定 | 第89-90页 |
| 5.2.13 LeMAPKs A过表达番茄表型分析 | 第90页 |
| 5.2.14 过表达植株基因LeMAPK1和LeMAPK2相对表达量分析 | 第90-91页 |
| 5.3 本章小结 | 第91-93页 |
| 全文总结 | 第93-99页 |
| 参考文献 | 第99-108页 |
| 附录 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第110页 |
