摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-15页 |
前言 | 第16-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-32页 |
1.1 大白菜根肿病的研究进展 | 第17-22页 |
1.1.1 根肿病的寄主、危害及传播途径 | 第17-18页 |
1.1.2 根肿病病原菌分类、生活史及生物学特性 | 第18-19页 |
1.1.3 根肿病菌致病性分化及其分子检测 | 第19-20页 |
1.1.4 大白菜根肿病的防治方法 | 第20-21页 |
1.1.5 十字花科蔬菜抗根肿病基因的定位与克隆 | 第21-22页 |
1.2 植物抗病基因结构、进化及抗病机制研究进展 | 第22-27页 |
1.2.1 植物抗病基因的结构及分类 | 第22-24页 |
1.2.2 植物抗病基因的进化 | 第24-25页 |
1.2.3 植物抗病基因与病原微生物互作机制 | 第25-27页 |
1.3 植物抗病基因克隆方法 | 第27-30页 |
1.3.1 图位克隆法 | 第27-28页 |
1.3.2 同源克隆法 | 第28页 |
1.3.3 表达序列标签法 | 第28-29页 |
1.3.4 转座子标签克隆法 | 第29-30页 |
1.3.5 差异表达基因克隆方法 | 第30页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第30-32页 |
第二章 大白菜抗根肿病CRb基因的精细定位 | 第32-44页 |
2.1 材料与方法 | 第32-38页 |
2.1.1 材料与群体构建 | 第32页 |
2.1.2 抗病性鉴定 | 第32页 |
2.1.3 基因组DNA提取 | 第32-33页 |
2.1.4 抗根肿病CRb基因连锁标记的开发 | 第33-37页 |
2.1.5 亲本间多态性筛选 | 第37页 |
2.1.6 抗根肿病CRb基因的精细定位 | 第37-38页 |
2.1.7 抗根肿病CRb基因物理图谱的构建 | 第38页 |
2.1.8 候选基因预测与序列分析 | 第38页 |
2.2 结果与分析 | 第38-42页 |
2.2.1 抗病性鉴定结果 | 第38页 |
2.2.2 抗病相关基因序列比对结果 | 第38页 |
2.2.3 抗根肿病CRb基因连锁标记的开发 | 第38页 |
2.2.4 抗根肿病CRb基因的精细定位 | 第38-41页 |
2.2.5 抗根肿病CRb基因的物理图谱构建 | 第41-42页 |
2.2.6 候选基因预测与分析 | 第42页 |
2.3 讨论 | 第42-43页 |
2.4 小结 | 第43-44页 |
第三章 CRb候选基因克隆及结构分析 | 第44-54页 |
3.1 材料与方法 | 第44-47页 |
3.1.1 植物材料 | 第44页 |
3.1.2 植物总RNA的提取 | 第44-45页 |
3.1.3 全长cDNA获得 | 第45-47页 |
3.1.4 候选基因CRb1和CRb2的结构分析 | 第47页 |
3.2 结果与分析 | 第47-51页 |
3.2.1 全长cDNA的获得 | 第47页 |
3.2.2 候选基因结构分析 | 第47-49页 |
3.2.3 抗病基因与感病等位基因的结构对比 | 第49-51页 |
3.3 讨论 | 第51-53页 |
3.4 小结 | 第53-54页 |
第四章 CRb候选基因表达分析 | 第54-61页 |
4.1 材料与方法 | 第54-56页 |
4.1.1 植物材料 | 第54页 |
4.1.2 植物材料处理及样品采集 | 第54页 |
4.1.3 植物总RNA提取 | 第54页 |
4.1.4 cDNA第一链的合成 | 第54-55页 |
4.1.5 候选基因CRb1和CRb2表达分析 | 第55-56页 |
4.2 结果与分析 | 第56-59页 |
4.2.1 CRb1和CRb2在叶片中的表达分析 | 第56-57页 |
4.2.2 CRb1和CRb2在叶柄中的表达分析 | 第57-58页 |
4.2.3 CRb1和CRb2在下胚轴中的表达分析 | 第58-59页 |
4.2.4 CRb1和CRb2在根系中的表达分析 | 第59页 |
4.3 讨论 | 第59-60页 |
4.4 小结 | 第60-61页 |
第五章 CRb候选基因植物表达载体的构建及功能鉴定 | 第61-73页 |
5.1 材料与方法 | 第61-65页 |
5.1.1 质粒和菌株 | 第61-62页 |
5.1.2 候选基因植物表达载体的构建 | 第62-63页 |
5.1.3 CRb候选基因的遗传转化 | 第63-64页 |
5.1.4 转基因拟南芥的筛选 | 第64页 |
5.1.5 转基因拟南芥鉴定 | 第64-65页 |
5.2 结果与分析 | 第65-70页 |
5.2.1 CRb1和CRb2基因组序列酶切位点查找 | 第65-66页 |
5.2.2 CRb1和CRb2植物表达载体构建 | 第66-67页 |
5.2.3 CRb1和CRb2植物表达载体农杆菌转化株的鉴定 | 第67-68页 |
5.2.4 转基因拟南芥的获得 | 第68页 |
5.2.5 转基因拟南芥的鉴定 | 第68-70页 |
5.3 讨论 | 第70-72页 |
5.4 小结 | 第72-73页 |
第六章 CRb1和CRb2系统发育分析 | 第73-83页 |
6.1 材料与方法 | 第73-74页 |
6.1.1 植物材料 | 第73页 |
6.1.2 基因组DNA的提取 | 第73页 |
6.1.3 构建系统发育树 | 第73-74页 |
6.2 结果与分析 | 第74-81页 |
6.2.1 候选基因在不同基因组材料中的扩增结果 | 第74页 |
6.2.2 CRb1和CRb2在抗病材料及感病材料中的序列比对 | 第74-80页 |
6.2.3 CRb1和CRb2的系统发育树构建 | 第80-81页 |
6.3 讨论 | 第81-82页 |
6.4 小结 | 第82-83页 |
结论 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-96页 |
图版 | 第96-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
攻读博士学位期间发表论文 | 第99-100页 |
论文图表统计 | 第100页 |