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大白菜抗根肿病基因CRb的分离克隆与功能鉴定

摘要第12-14页
Abstract第14-15页
前言第16-17页
第一章 文献综述第17-32页
    1.1 大白菜根肿病的研究进展第17-22页
        1.1.1 根肿病的寄主、危害及传播途径第17-18页
        1.1.2 根肿病病原菌分类、生活史及生物学特性第18-19页
        1.1.3 根肿病菌致病性分化及其分子检测第19-20页
        1.1.4 大白菜根肿病的防治方法第20-21页
        1.1.5 十字花科蔬菜抗根肿病基因的定位与克隆第21-22页
    1.2 植物抗病基因结构、进化及抗病机制研究进展第22-27页
        1.2.1 植物抗病基因的结构及分类第22-24页
        1.2.2 植物抗病基因的进化第24-25页
        1.2.3 植物抗病基因与病原微生物互作机制第25-27页
    1.3 植物抗病基因克隆方法第27-30页
        1.3.1 图位克隆法第27-28页
        1.3.2 同源克隆法第28页
        1.3.3 表达序列标签法第28-29页
        1.3.4 转座子标签克隆法第29-30页
        1.3.5 差异表达基因克隆方法第30页
    1.4 本研究的目的及意义第30-32页
第二章 大白菜抗根肿病CRb基因的精细定位第32-44页
    2.1 材料与方法第32-38页
        2.1.1 材料与群体构建第32页
        2.1.2 抗病性鉴定第32页
        2.1.3 基因组DNA提取第32-33页
        2.1.4 抗根肿病CRb基因连锁标记的开发第33-37页
        2.1.5 亲本间多态性筛选第37页
        2.1.6 抗根肿病CRb基因的精细定位第37-38页
        2.1.7 抗根肿病CRb基因物理图谱的构建第38页
        2.1.8 候选基因预测与序列分析第38页
    2.2 结果与分析第38-42页
        2.2.1 抗病性鉴定结果第38页
        2.2.2 抗病相关基因序列比对结果第38页
        2.2.3 抗根肿病CRb基因连锁标记的开发第38页
        2.2.4 抗根肿病CRb基因的精细定位第38-41页
        2.2.5 抗根肿病CRb基因的物理图谱构建第41-42页
        2.2.6 候选基因预测与分析第42页
    2.3 讨论第42-43页
    2.4 小结第43-44页
第三章 CRb候选基因克隆及结构分析第44-54页
    3.1 材料与方法第44-47页
        3.1.1 植物材料第44页
        3.1.2 植物总RNA的提取第44-45页
        3.1.3 全长cDNA获得第45-47页
        3.1.4 候选基因CRb1和CRb2的结构分析第47页
    3.2 结果与分析第47-51页
        3.2.1 全长cDNA的获得第47页
        3.2.2 候选基因结构分析第47-49页
        3.2.3 抗病基因与感病等位基因的结构对比第49-51页
    3.3 讨论第51-53页
    3.4 小结第53-54页
第四章 CRb候选基因表达分析第54-61页
    4.1 材料与方法第54-56页
        4.1.1 植物材料第54页
        4.1.2 植物材料处理及样品采集第54页
        4.1.3 植物总RNA提取第54页
        4.1.4 cDNA第一链的合成第54-55页
        4.1.5 候选基因CRb1和CRb2表达分析第55-56页
    4.2 结果与分析第56-59页
        4.2.1 CRb1和CRb2在叶片中的表达分析第56-57页
        4.2.2 CRb1和CRb2在叶柄中的表达分析第57-58页
        4.2.3 CRb1和CRb2在下胚轴中的表达分析第58-59页
        4.2.4 CRb1和CRb2在根系中的表达分析第59页
    4.3 讨论第59-60页
    4.4 小结第60-61页
第五章 CRb候选基因植物表达载体的构建及功能鉴定第61-73页
    5.1 材料与方法第61-65页
        5.1.1 质粒和菌株第61-62页
        5.1.2 候选基因植物表达载体的构建第62-63页
        5.1.3 CRb候选基因的遗传转化第63-64页
        5.1.4 转基因拟南芥的筛选第64页
        5.1.5 转基因拟南芥鉴定第64-65页
    5.2 结果与分析第65-70页
        5.2.1 CRb1和CRb2基因组序列酶切位点查找第65-66页
        5.2.2 CRb1和CRb2植物表达载体构建第66-67页
        5.2.3 CRb1和CRb2植物表达载体农杆菌转化株的鉴定第67-68页
        5.2.4 转基因拟南芥的获得第68页
        5.2.5 转基因拟南芥的鉴定第68-70页
    5.3 讨论第70-72页
    5.4 小结第72-73页
第六章 CRb1和CRb2系统发育分析第73-83页
    6.1 材料与方法第73-74页
        6.1.1 植物材料第73页
        6.1.2 基因组DNA的提取第73页
        6.1.3 构建系统发育树第73-74页
    6.2 结果与分析第74-81页
        6.2.1 候选基因在不同基因组材料中的扩增结果第74页
        6.2.2 CRb1和CRb2在抗病材料及感病材料中的序列比对第74-80页
        6.2.3 CRb1和CRb2的系统发育树构建第80-81页
    6.3 讨论第81-82页
    6.4 小结第82-83页
结论第83-84页
参考文献第84-96页
图版第96-98页
致谢第98-99页
攻读博士学位期间发表论文第99-100页
论文图表统计第100页

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