摘要 | 第3-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
前言 | 第16-20页 |
一 材料 | 第20-24页 |
1.1 主要实验仪器与耗材 | 第20页 |
1.2 主要实验试剂 | 第20-21页 |
1.3 质粒、菌株 | 第21页 |
1.4 试剂配制 | 第21-22页 |
1.5 主要数据库或生物信息学网站 | 第22-23页 |
1.6 使用统计软件和统计方法 | 第23-24页 |
二 方法 | 第24-41页 |
2.1 小鼠DUSP1 mRNA 3'-UTR生物信息学分析 | 第24页 |
2.2 pLuDP荧光素酶报告基因重组质粒的构建与鉴定 | 第24-26页 |
2.3 细胞培养 | 第26页 |
2.4 DUSP1 mRNA 3'-UTR负调控功能的研究 | 第26-28页 |
2.5 采用双荧光素酶报告基因系统筛选与DUSP1 mRNA 3'-UTR相互作用的RBP和miRNA | 第28-32页 |
2.6 Let7/miR-98生物学功能的验证 | 第32-41页 |
三 结果 | 第41-56页 |
3.1 小鼠DUSP1 mRNA 3'-UTR生物信息学分析 | 第41页 |
3.2 pLuDP荧光素酶报告基因重组质粒的鉴定 | 第41-42页 |
3.3 DUSP1 mRNA 3'-UTR负调控功能的研究 | 第42-43页 |
3.4 pLuDP/RL双荧光素酶报告基因重组质粒的鉴定 | 第43-44页 |
3.5 pLuDP/RL与RBP siRNA文库分别共转染NIH3T3细胞,筛选与DUSP1mRNA 3'-UTR相互作用的RBP | 第44-46页 |
3.6 pLuDP/RL与miRNA分别共转染NIH3T3细胞,筛选与DUSP1 mRNA3'-UTR相互作用的miRNA | 第46-48页 |
3.7 突变DUSP1 mRNA 3'-UTR中let-7/miR-98潜在结合位点对荧光素酶表达活性的影响 | 第48-49页 |
3.8 pLuDP/RL、pLuDP-Mut分别与let-7/miR-98共转染对荧光素酶表达活性的影响 | 第49-51页 |
3.9 分别共转染let-7 sponge(7S3)、let-7 sponge mutant(7SM3)对荧光素酶表达活性的影响 | 第51-53页 |
3.10 转染anti-let-7对DUSP1 mRNA水平的影响 | 第53-54页 |
3.11 转染anti-let-7对DUSP1蛋白水平的影响 | 第54-56页 |
四 讨论 | 第56-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
综述 | 第66-76页 |
参考文献 | 第71-76页 |
在硕士期间发表文章 | 第76-77页 |
中英文缩略词表 | 第77-80页 |
致谢 | 第80-81页 |