| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 生物固氮 | 第9-13页 |
| 1.1.1 生物固氮的分类 | 第10-13页 |
| 1.1.2 生物固氮的意义 | 第13页 |
| 1.2 快生型大豆根瘤菌的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3 四碳二羧酸转移酶基因dctABD | 第15-16页 |
| 1.4 本研究的内容及目的 | 第16-17页 |
| 1.5 本研究的技术路线 | 第17-19页 |
| 第2章 材料与方法 | 第19-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 菌株 | 第19页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第19页 |
| 2.1.3 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.4 主要仪器设备及试剂 | 第19页 |
| 2.1.5 引物 | 第19-21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-37页 |
| 2.2.1 快生型大豆根瘤菌15067基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.2 目的基因dctA、dctB、dctD的扩增和回收 | 第22-23页 |
| 2.2.3 表达载体的构建 | 第23-32页 |
| 2.2.4 转基因工程菌株的构建 | 第32-34页 |
| 2.2.5 盆栽试验 | 第34-35页 |
| 2.2.6 质粒的稳定性测定试验 | 第35页 |
| 2.2.7 固氮酶活性的测定 | 第35-36页 |
| 2.2.8 统计分析方法 | 第36-37页 |
| 第3章 结果与分析 | 第37-67页 |
| 3.1 快生型大豆根瘤菌15067基因组DNA的提取 | 第37页 |
| 3.2 目的基因dctA、dctB、dctD的扩增及生物信息学分析 | 第37-41页 |
| 3.2.1 目的基因dctA、dctB、dctD的扩增 | 第37-39页 |
| 3.2.2 目的基因dctA、dctB、dctD的生物信息学分析 | 第39-41页 |
| 3.3 原核生物表达载体的构建 | 第41-55页 |
| 3.3.1 含有dctA基因和lac启动子的表达载体构建 | 第42-47页 |
| 3.3.2 含有dctB基因和lac启动子的表达载体构建 | 第47-51页 |
| 3.3.3 含有dctD基因和lac启动子的表达载体构建 | 第51-55页 |
| 3.4 转基因工程菌菌落发光性的检测 | 第55-57页 |
| 3.5 质粒的遗传稳定性检测 | 第57-58页 |
| 3.5.1 自生传代培养条件下的质粒稳定性检测 | 第57页 |
| 3.5.2 共生条件下质粒的稳定性检测 | 第57-58页 |
| 3.6 盆栽试验结果 | 第58-67页 |
| 3.6.1 转化土著大豆根瘤菌的工程菌株的盆栽试验结果 | 第58-62页 |
| 3.6.2 转化快生型大豆根瘤菌15067的工程菌株的盆栽试验结果 | 第62-67页 |
| 第4章 讨论 | 第67-70页 |
| 4.1 原核表达载体的选择 | 第67-68页 |
| 4.2 关于三亲本接合转移 | 第68页 |
| 4.3 对于本研究中的试验结果的分析 | 第68-69页 |
| 4.4 下一步试验计划 | 第69-70页 |
| 第5章 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 攻读学位论文期间发表的学术论文 | 第83-85页 |
