| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略词对照一览表 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| 第一节 吸血节肢动物的抗凝机制 | 第9-13页 |
| 1. 致乏库蚊的简介 | 第9-11页 |
| 2. 血小板的聚集 | 第11-12页 |
| 3 凝血级联反应 | 第12页 |
| 4. 血管收缩系统 | 第12-13页 |
| 第二节 蛋白酶抑制剂的研究进展 | 第13-21页 |
| 1. 蛋白酶抑制剂的简介 | 第13页 |
| 2. 蛋白酶抑制剂的分类 | 第13-19页 |
| 2.1 天冬氨酸蛋白酶抑制剂 | 第14页 |
| 2.2 巯基蛋白酶抑制剂 | 第14页 |
| 2.3 金属蛋白酶抑制剂 | 第14-15页 |
| 2.4 丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第15-19页 |
| 3. 蛋白酶抑制剂的功能与应用 | 第19-21页 |
| 3.1 蛋白抑制剂在肿瘤治疗中的应用 | 第19页 |
| 3.2 蛋白酶抑制剂在病虫害防治中的应用 | 第19-20页 |
| 3.3 蛋白酶抑制剂在食品工业中的应用 | 第20-21页 |
| 第二章 致乏库蚊的基因表达 | 第21-39页 |
| 第一节 化学合成法获得致乏库蚊A3199 | 第21-24页 |
| 1. 材料与方法 | 第21-24页 |
| 1.1 目的基因的合成 | 第21页 |
| 1.2 目的基因的修饰 | 第21-24页 |
| 2. 小结 | 第24页 |
| 第二节 原核表达重组载体pET-40b(+)-A3199的构建 | 第24-32页 |
| 1. 材料与方法 | 第24-28页 |
| 1.1 主要试剂 | 第24页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第24-25页 |
| 1.3 重组载体的构建 | 第25-28页 |
| 2. 结果与分析 | 第28-31页 |
| 2.1 pET-28a质粒与pET-40b质粒的提取 | 第28-29页 |
| 2.2 目的基因载体和表达质粒的双酶切鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3 重组质粒的菌落PCR鉴定 | 第30-31页 |
| 2.4 重组质粒的测序鉴定 | 第31页 |
| 3. 小结 | 第31-32页 |
| 第三节 目的基因在大肠杆菌中的表达 | 第32-39页 |
| 1. 材料与方法 | 第32-34页 |
| 1.1 主要试剂 | 第32页 |
| 1.2 主要实验设备和仪器 | 第32页 |
| 1.3 重组蛋白的小量表达及优化 | 第32-34页 |
| 2. 结果与分析 | 第34-38页 |
| 2.1 重组蛋白的小量诱导表达 | 第34页 |
| 2.2 重组蛋白的可溶性检测 | 第34-35页 |
| 2.3 重组蛋白质诱导表达条件的优化 | 第35-38页 |
| 2.3.1 IPTG的最佳诱导温度的优化 | 第35-36页 |
| 2.3.2 IPTG的最佳诱导浓度的优化 | 第36-37页 |
| 2.3.3 IPTG的最佳诱导时间的优化 | 第37-38页 |
| 3. 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 致乏库蚊A3199的重组蛋白的纯化 | 第39-51页 |
| 1. 材料和方法 | 第39-43页 |
| 1.1 主要试剂 | 第39页 |
| 1.2 主要实验设备和仪器 | 第39-40页 |
| 1.3 重组蛋白的纯化过程 | 第40-43页 |
| 2. 结果与分析 | 第43-48页 |
| 2.1 包涵体的收集 | 第43-44页 |
| 2.2 变性蛋白亲和柱各洗脱峰的电泳检测 | 第44页 |
| 2.3 目的蛋白A3199的释放 | 第44-45页 |
| 2.4 Sephadex G-50 凝胶层析 | 第45-46页 |
| 2.5 RP-HPLC和FPLC的分离纯化 | 第46-47页 |
| 2.6 质谱法测定组分 | 第47页 |
| 2.7 致乏库蚊A3199蛋白酶抑制剂的活性测定 | 第47-48页 |
| 3. 小结 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55-57页 |
| 附录 | 第57-62页 |