| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-26页 |
| 1. 研究背景及意义 | 第10-11页 |
| 2. 乳铁蛋白、乳铁蛋白肽以及LfcinB的研究进展 | 第11-20页 |
| 2.1 乳铁蛋白、乳铁蛋白肽以及LfcinB的发现 | 第11-13页 |
| 2.2 乳铁蛋白、乳铁蛋白肽以及LfcinB的分子结构 | 第13-16页 |
| 2.3 乳铁蛋白、乳铁蛋白肽和LfcinB的生物学功能 | 第16-20页 |
| 2.4 乳铁蛋白、乳铁蛋白肽和LfcinB的应用现状及前景 | 第20页 |
| 3. 苏云金芽胞杆菌的研究进展 | 第20-25页 |
| 3.1 苏云金芽胞杆菌概述 | 第20-21页 |
| 3.2 杀虫晶体蛋白分类、结构和作用机理 | 第21-23页 |
| 3.3 Cry60Ba晶体蛋白 | 第23-25页 |
| 4. 研究内容 | 第25-26页 |
| 第二章 LfcinB在苏云金芽胞杆菌中的融合表达 | 第26-38页 |
| 1.材料与方法 | 第26-38页 |
| 1.1 材料 | 第26-31页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第26-27页 |
| 1.1.2 培养基的配制 | 第27-28页 |
| 1.1.3 感受态细胞的制备 | 第28页 |
| 1.1.4 引物设计 | 第28-29页 |
| 1.1.5 菌株及质粒 | 第29页 |
| 1.1.6 抗生素及其使用浓度 | 第29页 |
| 1.1.7 工具酶及Marker | 第29-30页 |
| 1.1.8 试剂盒 | 第30页 |
| 1.1.9 仪器 | 第30-31页 |
| 1.2 研究方法 | 第31-38页 |
| 1.2.1 菌株的培养及保藏 | 第31页 |
| 1.2.2 载体质粒pPFT60B的提取 | 第31-32页 |
| 1.2.3 PCR扩增Cry60Ba-LfcinB基因序列 | 第32页 |
| 1.2.4 目的片段的TA克隆 | 第32-33页 |
| 1.2.5 融合表达载体pPFT60B-LfcinB的构建 | 第33-34页 |
| 1.2.6 大肠杆菌及Bt菌株的转化 | 第34页 |
| 1.2.7 Bt发酵培养及伴胞晶体的提纯 | 第34-35页 |
| 1.2.8 工程菌表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第35页 |
| 1.2.9 重组蛋白的胶内酶解 | 第35-36页 |
| 1.2.10 蛋白酶解肽段的质谱分析 | 第36页 |
| 1.2.11 质谱搜库分析 | 第36页 |
| 1.2.12 融合蛋白的水解 | 第36-37页 |
| 1.2.13 LfcinB的鉴定 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-47页 |
| 1 融合蛋白的表达 | 第38-42页 |
| 1.1 编码基因的设计与合成 | 第38页 |
| 1.2 融合表达载体构建 | 第38-40页 |
| 1.3 目的蛋白在Bt菌株中的融合表达 | 第40-42页 |
| 2.融合蛋白的水解及鉴定 | 第42-47页 |
| 2.1 融合蛋白的水解 | 第42-43页 |
| 2.2 LfcinB蛋白的鉴定 | 第43-47页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第47-49页 |
| 1. 讨论 | 第47-48页 |
| 1.1 与晶体蛋白融合表达的优势 | 第47页 |
| 1.2 LfcinB融合表达系统的选择 | 第47-48页 |
| 2. 结论 | 第48页 |
| 3. 展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
