| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第9-39页 |
| 1.1 胚胎干细胞简介及研究历史 | 第9-10页 |
| 1.2 诱导性多能干细胞技术概述 | 第10-23页 |
| 1.2.1 诱导性多能干细胞技术的出现 | 第10-12页 |
| 1.2.2 体细胞重编程过程中的间质-上皮转化 | 第12-13页 |
| 1.2.3 体细胞重编程过程中发育相关基因的瞬时表达 | 第13-14页 |
| 1.2.4 端粒酶活性在体细胞重编程中的变化 | 第14-15页 |
| 1.2.5 X染色体活性在重编程中的变化 | 第15-16页 |
| 1.2.6 表观遗传学对重编程的调控 | 第16页 |
| 1.2.7 microRNA对重编程的调控 | 第16-19页 |
| 1.2.8 诱导性多能干细胞技术的发展和改进 | 第19-21页 |
| 1.2.9 诱导性多能干细胞和胚胎干细胞的相似和不同 | 第21-23页 |
| 1.3 胚胎干细胞多能性维持和体细胞重编程的核心转录因子 | 第23-30页 |
| 1.3.1 OCT4 | 第23-26页 |
| 1.3.2 Sox2 | 第26-28页 |
| 1.3.3 Nanog | 第28-30页 |
| 1.4 影响胚胎干细胞多能性维持和体细胞重编程的信号通路 | 第30-34页 |
| 1.4.1 LIF-STAT3信号通路 | 第30-31页 |
| 1.4.2 MEK-ERK信号通路 | 第31-32页 |
| 1.4.3 TGF-beta/SMAD信号通路 | 第32-34页 |
| 1.4.4 PI3K-AKT信号通路 | 第34页 |
| 1.5 PHLDA3基因研究概述 | 第34-36页 |
| 1.6 P53在胚胎干细胞和体细胞重编程中的作用 | 第36-39页 |
| 第2章 结果分析 | 第39-59页 |
| 2.1 PHLDA3在小鼠体细胞和IPS中表达的分析 | 第39-45页 |
| 2.1.1 PHLDA3在MEF、iPS和胚胎干细胞中的表达情况 | 第39-41页 |
| 2.1.2 iPS诱导过程中PHLDA3表达的变化 | 第41-42页 |
| 2.1.3 胚胎干细胞分化过程中PHLDA3的变化 | 第42-45页 |
| 2.2 PHLDA3抑制体细胞重编程 | 第45-52页 |
| 2.2.1 MEF中p53对PHLDA3的调控 | 第45页 |
| 2.2.2 体细胞重编程所得到的iPS克隆的鉴定 | 第45-48页 |
| 2.2.3 PHLDA3抑制体细胞重编程 | 第48-50页 |
| 2.2.4 PHLDA3参与p53介导的体细胞重编程调控 | 第50-52页 |
| 2.3 PHLDA3通过激活GSK3B抑制体细胞重编程 | 第52-54页 |
| 2.4 OCT4转录调控PHLDA3 | 第54-59页 |
| 第3章 讨论 | 第59-63页 |
| 3.1 研究总结 | 第59页 |
| 3.2 研究的意义和创新点 | 第59-60页 |
| 3.3 研究中存在的问题 | 第60-63页 |
| 第4章 附录 | 第63-93页 |
| 4.1 材料与方法 | 第63-71页 |
| 4.1.1 OCT4-GFP MEF的分离 | 第63-64页 |
| 4.1.2 饲养层细胞的制备 | 第64页 |
| 4.1.3 pMXs逆转录病毒的包装 | 第64-66页 |
| 4.1.4 iPS的诱导 | 第66-67页 |
| 4.1.5 碱性磷酸酶染色 | 第67页 |
| 4.1.6 胚胎干细胞的培养 | 第67页 |
| 4.1.7 慢病毒包装和RNA干扰 | 第67-68页 |
| 4.1.8 RNA抽提、qRT-PCR和RT-PCR | 第68-69页 |
| 4.1.9 Wetern Blot检测 | 第69-70页 |
| 4.1.10 免疫荧光染色 | 第70-71页 |
| 4.2 图注 | 第71-74页 |
| 4.3 参考文献 | 第74-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第95页 |
