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火鸡疱疹病毒荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一篇 文献综述第11-35页
 第一章 马立克氏病的研究进展第11-35页
  1 病原第12页
  2 MDV的基本生物学特性第12-16页
  3 MDV培养特性第16-17页
  4 MDV分子水平上的发病机制第17-19页
   ·早期溶细胞感染第17-18页
   ·潜伏感染期第18页
   ·第二次溶细胞性感染第18-19页
   ·肿瘤细胞增生的转化期第19页
  5 免疫抑制的机理第19-20页
  6 MD免疫失败的原因第20-21页
   ·母源抗体的影响第20页
   ·MDV超强毒(wMDV)的感染第20页
   ·免疫抑制性疾病的早期感染第20-21页
   ·疫苗方面的因素第21页
   ·饲养管理方面的因素第21页
  7 MDV毒力的漂移趋势第21-23页
  8 诊断技术第23-30页
   ·病毒分离第23-24页
   ·病毒的鉴定----特异性单克隆抗体鉴定第24页
   ·分子生物学诊断技术第24-25页
   ·聚合酶链反应(PCR)技术第25-30页
  9 MD疫苗第30-35页
   ·常规MD疫苗第30-31页
   ·MD基因工程疫苗第31-33页
   ·MD基因缺失疫苗第33页
   ·MD核酸疫苗第33-34页
   ·疫苗使用情况第34-35页
第二篇 实验部分第35-57页
 第一章 火鸡疱疹病毒荧光定量PCR检测方法的建立第35-47页
  1 材料第35-37页
   ·毒株第35页
   ·主要试剂第35-36页
   ·培养基与抗生素及其配制第36页
   ·主要仪器与设备第36-37页
   ·引物和探针的设计第37页
  2 方法第37-42页
   ·提取病毒DNA第37页
   ·标准品的制备第37-40页
   ·标准品普通PCR第40-42页
  3 结果第42-46页
   ·SOFT基因重组质粒鉴定结果第42页
   ·PCR退火温度的确定第42-43页
   ·反应参数的优化第43页
   ·标准曲线的建立及检测的敏感性试验第43-44页
   ·荧光定量RT-PCR方法的特异性第44-45页
   ·荧光定量RT-PCR方法的重复性第45-46页
  4 讨论第46-47页
 第二章 HVT疫苗中病毒含量的检测第47-57页
  1 应用荧光定量RT-PCR对HVT活疫苗中病毒含量的检测第47-50页
   ·试验材料第47页
   ·试验方法第47-48页
   ·结果第48-50页
  2 火鸡疱疹病毒成品疫苗蚀斑数的测定第50-54页
   ·试验材料第50页
   ·主要试剂第50-51页
   ·主要仪器第51页
   ·方法第51-52页
   ·结果第52-54页
  3 讨论第54-57页
全文总结第57-59页
参考文献第59-65页
致谢第65页

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