| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第16-30页 |
| 1.1 植物器官脱落研究进展 | 第16-22页 |
| 1.1.1 离区的形态 | 第17-18页 |
| 1.1.2 离区发育的分子生物学研究进展 | 第18-22页 |
| 1.2 MADS-box基因研究进展 | 第22-28页 |
| 1.2.1 植物MADS-box基因的一般特性 | 第22-28页 |
| 1.2.2 SEP亚族基因研究进展 | 第28页 |
| 1.3 本研究的意义,内容与技术路线 | 第28-30页 |
| 1.3.1 本研究的意义和内容 | 第28-29页 |
| 1.3.2 技术路线 | 第29-30页 |
| 第二章 番茄SLMBP21基因的全长获得与序列分析 | 第30-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 2.1.2 实验中的各种试剂,酶,与耗材 | 第30页 |
| 2.1.3 LB培养基和其它试剂的配制 | 第30-31页 |
| 2.1.4 引物 | 第31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-36页 |
| 2.2.1 SLMBP21 cDNA全长序列的获得 | 第31-36页 |
| 2.2.2 基因结构,蛋白结构,以及系统进化分析 | 第36页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第36-41页 |
| 2.3.1 SLMBP21全长cDNA序列的获得 | 第36-37页 |
| 2.3.2 SLMBP21蛋白序列分析 | 第37-38页 |
| 2.3.3 SLMBP21基因结构分析 | 第38-39页 |
| 2.3.4 SLMBP21的系统进化分析 | 第39-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 2.4.1 SLMBP21同J-2基因之间的关系 | 第41页 |
| 2.4.2 SLMBP21功能研究的意义 | 第41-42页 |
| 第三章 离区发育的组织细胞学分析 | 第42-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第42页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第42页 |
| 3.1.2 实验中的各种试剂,酶与耗材 | 第42页 |
| 3.1.3 试剂配制 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-44页 |
| 3.2.1 组织包埋与切片 | 第42-43页 |
| 3.2.2 石蜡切片染色 | 第43-44页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第44-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 第四章 SLMBP21功能分析 | 第47-70页 |
| 4.1 实验材料 | 第47-49页 |
| 4.1.1 实验中所用植物材料与菌株 | 第47页 |
| 4.1.2 实验中的各种试剂,酶与耗材 | 第47页 |
| 4.1.3 各种试剂盒培养基的配制 | 第47-49页 |
| 4.1.4 实验中所用引物 | 第49页 |
| 4.2 实验方法 | 第49-57页 |
| 4.2.1 载体构建 | 第49-54页 |
| 4.2.2 番茄转化 | 第54-56页 |
| 4.2.3 阳性植株鉴定 | 第56页 |
| 4.2.4 表型观察和组织细胞学分析 | 第56页 |
| 4.2.5 乙烯处理 | 第56-57页 |
| 4.2.6 Real-time PCR | 第57页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第57-69页 |
| 4.3.1 SLMBP21-AS和LeMADS1-AS植株的获得与分析 | 第57-61页 |
| 4.3.2 SLMBP21-RNAi转基因植株的获得与表型分析 | 第61-62页 |
| 4.3.3 SLMBP21过量表达转基因植株的获得和表型分析 | 第62-67页 |
| 4.3.4 J过量表达植株的获得与鉴定 | 第67-69页 |
| 4.4 讨论 | 第69-70页 |
| 4.4.1 SLMBP21参与离区形成过程 | 第69页 |
| 4.4.2 SLMBP21通过影响细胞大小决定离区形成 | 第69-70页 |
| 第五章 SLMBP21,J和MC的互作关系分析 | 第70-88页 |
| 5.1 实验材料 | 第70-72页 |
| 5.1.1 实验中所用菌株和烟草材料 | 第70页 |
| 5.1.2 实验中的各种试剂,酶与耗材 | 第70页 |
| 5.1.3 各种试剂和培养基的配制 | 第70-72页 |
| 5.1.4 实验中所用引物 | 第72页 |
| 5.2 实验方法 | 第72-81页 |
| 5.2.1 酵母双杂交 | 第72-75页 |
| 5.2.2 BiFC(双分子荧光互补实验) | 第75-76页 |
| 5.2.3 酵母三杂交 | 第76-77页 |
| 5.2.4 CoIP(蛋白质免疫共沉淀) | 第77-81页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第81-87页 |
| 5.3.1 SLMBP21,J和MC之间的转录调控关系分析 | 第81-82页 |
| 5.3.2 酵母双杂交结果表明J,MC和SLMBP21之间可以发生两两互作 | 第82-83页 |
| 5.3.3 双分子荧光互补实验验证了J,MC和SLMBP21之间的互作关系 | 第83-85页 |
| 5.3.4 酵母三杂交 | 第85-86页 |
| 5.3.5 蛋白质免疫共沉淀 | 第86-87页 |
| 5.4 讨论 | 第87-88页 |
| 5.4.1 SLMBP21可能通过与J和MC形成蛋白复合体来影响离区发育 | 第87页 |
| 5.4.2 J受MC的转录调控 | 第87-88页 |
| 第六章 SLMBP21,J和MC的表达模式分析 | 第88-100页 |
| 6.1 实验材料 | 第88-89页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第88页 |
| 6.1.2 实验中的各种试剂,酶与耗材 | 第88页 |
| 6.1.3 实验中所用引物 | 第88-89页 |
| 6.2 实验方法 | 第89-95页 |
| 6.2.1 载体构建 | 第89页 |
| 6.2.2 探针制备 | 第89-91页 |
| 6.2.3 石蜡切片 | 第91页 |
| 6.2.4 片子预处理 | 第91-92页 |
| 6.2.5 杂交 | 第92-93页 |
| 6.2.6 洗片及检测 | 第93-95页 |
| 6.3 实验结果与分析 | 第95-98页 |
| 6.3.1 实验条件确定 | 第95页 |
| 6.3.2 SLMBP21,J和MC表达模式分析 | 第95-98页 |
| 6.4 讨论 | 第98-100页 |
| 6.4.1 SLMBP21,J和MC的表达模式各不相同但重叠于离区处的维管束 | 第98-99页 |
| 6.4.2 SLMBP21和J的表达模式决定离区的位置 | 第99-100页 |
| 第七章 SLMBP21,J和MC的转录激活活性分析 | 第100-102页 |
| 7.1 实验材料 | 第100页 |
| 7.1.1 菌株 | 第100页 |
| 7.1.2 实验中的各种试剂,酶与耗材 | 第100页 |
| 7.1.3 各种试剂的配制 | 第100页 |
| 7.2 实验方法 | 第100页 |
| 7.3 实验结果与分析 | 第100-101页 |
| 7.4 讨论 | 第101-102页 |
| 第八章 RNA-seq分析SLMBP21的下游基因 | 第102-110页 |
| 8.1 实验材料 | 第102页 |
| 8.1.1 植物材料 | 第102页 |
| 8.1.2 实验中的各种试剂,酶与耗材 | 第102页 |
| 8.2 实验方法 | 第102-104页 |
| 8.2.1 实验流程 | 第102-103页 |
| 8.2.2 标准信息分析流程 | 第103页 |
| 8.2.3 数据处理 | 第103-104页 |
| 8.3 实验结果与分析 | 第104-109页 |
| 8.3.1 差异基因的获得与分类 | 第104页 |
| 8.3.2 GO功能富集分析 | 第104-106页 |
| 8.3.3 差异基因MapMan分析 | 第106-107页 |
| 8.3.4 SLMBP21,J和MC共同调节的下游基因 | 第107-109页 |
| 8.4 讨论 | 第109-110页 |
| 第九章 全文结论 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-126页 |
| 附录 | 第126-142页 |
| 致谢 | 第142-143页 |
| 作者简历 | 第143页 |
