| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 前言 | 第9-14页 |
| 1.1 骨肉瘤 | 第9-10页 |
| 1.2 MTX 和骨肉瘤 | 第10页 |
| 1.3 MTX | 第10-11页 |
| 1.4 MTX 耐药 | 第11-12页 |
| 1.5 MTX 和白血病 | 第12页 |
| 1.6 MTX 耐药细胞模型的建立 | 第12-14页 |
| 第2章 材料与方法 | 第14-28页 |
| 2.1 仪器 | 第14-15页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第15-16页 |
| 2.3 主要试剂配制 | 第16-20页 |
| 2.3.1 细胞培养主要试剂配制 | 第16-17页 |
| 2.3.2 Westernblot 相关试剂配制 | 第17-19页 |
| 2.3.3 细胞染色体分析 | 第19-20页 |
| 2.4 实验方法 | 第20-28页 |
| 2.4.1 细胞培养 | 第20-21页 |
| 2.4.2 耐药细胞系建立 | 第21-22页 |
| 2.4.3 Western Blot | 第22-24页 |
| 2.4.4 细胞生长曲线绘制 | 第24-25页 |
| 2.4.5 MTT 检测耐药性 | 第25-26页 |
| 2.4.6 细胞染色体分析 | 第26页 |
| 2.4.7 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第26-28页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第28-40页 |
| 3.1 建立耐药细胞株 | 第28-31页 |
| 3.2 耐药细胞系与原始细胞染色体核型分析 | 第31-32页 |
| 3.3 MTX 耐药细胞与原始细胞细胞总蛋白比对 | 第32-34页 |
| 3.4 IC50 及细胞存活率评价耐药细胞耐药性 | 第34-37页 |
| 3.5 流式细胞术检测各细胞凋亡 | 第37-38页 |
| 3.6 WESTERN BLOT 检测 MTX 作用靶蛋白 DHFR 表达情况 | 第38-40页 |
| 第4章 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 致谢 | 第46页 |