| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 英文縮略词表 | 第6-9页 |
| 1. 序言 | 第9-18页 |
| 1.1 Cdc42与信号传导 | 第9-12页 |
| 1.1.1 Cdc42的“分子开关”作用 | 第9-10页 |
| 1.1.2 Cdc42的上游激活作用 | 第10-11页 |
| 1.1.3 Cdc42下游效应分子 | 第11-12页 |
| 1.2 Cdc42与细胞迁移、极化和细胞骨架的形成 | 第12-13页 |
| 1.3 Cdc42与Rho家族 | 第13-14页 |
| 1.4 Cdc42与肿瘤 | 第14-15页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 技术路线 | 第17-18页 |
| 第一部分 Cdc42 cDNA克隆及原核表达 | 第18-34页 |
| 2 材料和方法 | 第18-24页 |
| 2.1 主要仪器设备 | 第18页 |
| 2.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.3 主要试剂的配制 | 第18-19页 |
| 2.4 实验方法 | 第19-24页 |
| 2.4.1 海南黄牛Cdc42 cDNA的克隆 | 第19-20页 |
| 2.4.2 生物信息学分析 | 第20页 |
| 2.4.3 原核表达载体的构建 | 第20-23页 |
| 2.4.4 Cdc42原核表达 | 第23-24页 |
| 3 结果 | 第24-34页 |
| 3.1 Cdc42 cDNA的克隆 | 第24-28页 |
| 3.1.1 序列分析 | 第24-26页 |
| 3.1.2 生物信息学分析 | 第26-28页 |
| 3.2 Cdc42的原核表达 | 第28-34页 |
| 3.2.1 pET28a-Cdc42重组质粒的构建 | 第28-29页 |
| 3.2.2 重组质粒的原核表达 | 第29-30页 |
| 3.2.3 可溶性分析 | 第30-31页 |
| 3.2.4 包涵体蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| 3.2.5 Western blot检测 | 第32-34页 |
| 第二部分 Cdc42在海南黄牛不同组织的表达分析 | 第34-47页 |
| 4. 材料和方法 | 第34-39页 |
| 4.1 组织样本的采集 | 第34页 |
| 4.2 主要仪器设备 | 第34页 |
| 4.3 主要试剂 | 第34页 |
| 4.4 主要试剂的配制 | 第34-35页 |
| 4.5 实验方法 | 第35-39页 |
| 4.5.1 各组织总RNA的提取 | 第35页 |
| 4.5.2 反转录cDNA | 第35-36页 |
| 4.5.3 荧光定量PCR反应检测不同组织Cdc42 mRNA表达水平 | 第36-37页 |
| 4.5.4 Western blot检测不同组织Cdc42蛋白的表达 | 第37-38页 |
| 4.5.5 免疫组化检测不同组织Cdc42蛋白的表达 | 第38-39页 |
| 5 结果 | 第39-44页 |
| 5.1 各组织总RNA | 第39页 |
| 5.2 荧光定量PCR扩增曲线和熔解曲线 | 第39-41页 |
| 5.3 荧光定量PCR标准曲线 | 第41页 |
| 5.4 Cdc42 mRNA在不同组织的表达比较 | 第41-42页 |
| 5.5 Western blot检测结果 | 第42-43页 |
| 5.6 免疫组织化学检测结果 | 第43-44页 |
| 6 讨论 | 第44-47页 |
| 6.1 克隆及原核表达 | 第44页 |
| 6.2 组织表达分析 | 第44-45页 |
| 6.3 Cdc42与组织生长发育 | 第45页 |
| 6.4 Cdc42与耐热性 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 在读期间科研成果 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
