| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-39页 |
| 1.1 西甜瓜病毒病研究概况 | 第14-22页 |
| 1.1.1 蛋白质介导的病毒抗性 | 第16-17页 |
| 1.1.2 RNA介导的病毒抗性 | 第17-21页 |
| 1.1.3 非病毒来源的抗性 | 第21-22页 |
| 1.1.4 抗病毒基因工程存在的问题 | 第22页 |
| 1.2 西瓜抗病毒基因工程研究进展 | 第22-32页 |
| 1.2.1 西瓜组织培养研究进展 | 第23-27页 |
| 1.2.1.1 种子贮存时间影响丛生芽再生 | 第24页 |
| 1.2.1.2 基因型和苗龄的影响 | 第24页 |
| 1.2.1.3 外植体类型的影响 | 第24-25页 |
| 1.2.1.4 激素组合对西瓜分化的影响 | 第25-26页 |
| 1.2.1.5 培养条件的影响 | 第26页 |
| 1.2.1.6 西瓜组织培养中出现的问题 | 第26-27页 |
| 1.2.2 转基因技术在西瓜育种上的应用 | 第27-32页 |
| 1.2.2.1 筛选标记基因对转化的影响 | 第28-29页 |
| 1.2.2.2 不同的农杆菌菌株对转化的影响 | 第29页 |
| 1.2.2.3 预培养对转化的影响 | 第29-30页 |
| 1.2.2.4 侵染时间和浓度对转化的影响 | 第30页 |
| 1.2.2.5 共培养对转化的影响 | 第30页 |
| 1.2.2.6 农杆菌介导西瓜遗传转化的主要问题 | 第30-32页 |
| 1.3 甜瓜抗病毒基因工程研究进展 | 第32-38页 |
| 1.3.1 甜瓜组织培养体系研究进展 | 第33-35页 |
| 1.3.1.1 基因型 | 第33页 |
| 1.3.1.2 外植体 | 第33-34页 |
| 1.3.1.3 子叶苗龄 | 第34页 |
| 1.3.1.4 植物激素 | 第34页 |
| 1.3.1.5 培养条件 | 第34-35页 |
| 1.3.2 甜瓜转基因技术研究进展 | 第35-38页 |
| 1.4 转基因对西甜瓜抗病性的改良和展望 | 第38-39页 |
| 第二章 西瓜转基因抗病毒研究 | 第39-70页 |
| 2.1 前言 | 第39-40页 |
| 2.2 材料和方法 | 第40-47页 |
| 2.2.1 植物和病毒材料 | 第40页 |
| 2.2.2 菌株和质粒 | 第40页 |
| 2.2.3 人工mi RN A植物表达载体构建 | 第40页 |
| 2.2.4 西瓜再生 | 第40-42页 |
| 2.2.4.1 外植体的获得 | 第40-41页 |
| 2.2.4.2 苗龄对诱导丛生芽的影响 | 第41页 |
| 2.2.4.3 不同部位外植体诱导丛生芽的影响 | 第41页 |
| 2.2.4.4 激素水平对丛生芽再生率的影响 | 第41页 |
| 2.2.4.5 液体和固体培养基对丛生芽诱导的影响 | 第41页 |
| 2.2.4.6 KH_2PO_4水平对诱导丛生芽的影响 | 第41-42页 |
| 2.2.4.7 Fe-EDTA水平对再生芽黄化的影响 | 第42页 |
| 2.2.5 西瓜遗传转化 | 第42-47页 |
| 2.2.5.1 Kan抗性的影响 | 第42-43页 |
| 2.2.5.2 预培养时间 | 第43页 |
| 2.2.5.3 侵染时间 | 第43页 |
| 2.2.5.4 共培养时间 | 第43页 |
| 2.2.5.5 转基因西瓜植株DNA提取 | 第43-44页 |
| 2.2.5.6 转基因西瓜植株PCR阳性检测 | 第44页 |
| 2.2.5.7 Southern杂交 | 第44-46页 |
| 2.2.5.8 病毒接种攻毒试验 | 第46页 |
| 2.2.5.9 ELISA检测CMV病毒积累情况 | 第46-47页 |
| 2.3 结果与分析 | 第47-62页 |
| 2.3.1 培养基对西瓜种子萌发的影响 | 第47-48页 |
| 2.3.2 不同苗龄诱导丛生芽的影响 | 第48-49页 |
| 2.3.3 子叶块部位对丛生芽诱导的影响 | 第49-50页 |
| 2.3.4 激素组合对外植体丛生芽的影响 | 第50-51页 |
| 2.3.5 固体和液体培养基对再生芽的影响 | 第51-52页 |
| 2.3.6 KH_2PO_4水平对丛生芽诱导的影响 | 第52-53页 |
| 2.3.7 Fe-EDTA水平对子叶黄化的影响 | 第53-55页 |
| 2.3.8 Kan敏感性测定 | 第55-57页 |
| 2.3.8.1 Kan处理子叶块浓度筛选 | 第55-56页 |
| 2.3.8.2 Kan处理种子浓度筛选 | 第56-57页 |
| 2.3.9 预培养时间对遗传转化丛生芽诱导的影响 | 第57-58页 |
| 2.3.10 侵染时间对遗传转化丛生芽诱导的影响 | 第58页 |
| 2.3.11 共培养时间对遗传转化丛生芽诱导的影响 | 第58-59页 |
| 2.3.12 转基因西瓜植株嫁接成活情况 | 第59-60页 |
| 2.3.13 转基因西瓜植株PCR检测结果 | 第60页 |
| 2.3.14 转基因西瓜植株Southern blot检测结果 | 第60-61页 |
| 2.3.15 转基因西瓜植株抗病毒试验 | 第61-62页 |
| 2.4 讨论 | 第62-68页 |
| 2.4.1 基本培养基对西瓜种子萌发的影响 | 第62-63页 |
| 2.4.2 苗龄对西瓜再生的影响 | 第63页 |
| 2.4.3 外植体部位对西瓜再生的影响 | 第63-64页 |
| 2.4.4 KH2PO4对西瓜丛生芽诱导的影响 | 第64页 |
| 2.4.5 Fe-EDTA对丛生芽黄化的影响 | 第64-65页 |
| 2.4.6 不同激素组合对西瓜再生的影响 | 第65-66页 |
| 2.4.7 抗生素浓度筛选 | 第66页 |
| 2.4.8 预培养对抗性芽分化的影响 | 第66-67页 |
| 2.4.9 共培养时间对抗性芽分化的影响 | 第67页 |
| 2.4.10 转基因西瓜抗病毒的稳定性 | 第67-68页 |
| 2.5 小结 | 第68-70页 |
| 第三章 甜瓜转基因抗病毒研究 | 第70-92页 |
| 3.1 前言 | 第70-71页 |
| 3.2. 材料和方法 | 第71-76页 |
| 3.2.1 植物和病毒材料 | 第71页 |
| 3.2.2 菌株和质粒 | 第71页 |
| 3.2.3 CWZ RNAi植物表达载体构建 | 第71-72页 |
| 3.2.4 甜瓜遗传转化 | 第72-74页 |
| 3.2.4.1 激素浓度对甜瓜外植体诱导丛生芽再生的影响 | 第73页 |
| 3.2.4.2 甜瓜不同外植体诱导丛生芽 | 第73-74页 |
| 3.2.4.3 甜瓜子叶和种子对Kan的敏感性试验 | 第74页 |
| 3.2.4.4 预培养时间的影响 | 第74页 |
| 3.2.4.5 侵染时间的影响 | 第74页 |
| 3.2.4.6 共培养时间的影响 | 第74页 |
| 3.2.5 转基因甜瓜植株DNA提取 | 第74-75页 |
| 3.2.6 转基因甜瓜植株的PCR检测 | 第75页 |
| 3.2.7 Southern杂交 | 第75页 |
| 3.2.8 GUS染色 | 第75-76页 |
| 3.3 结果与分析 | 第76-85页 |
| 3.3.1 激素浓度对甜瓜子叶诱导丛生芽的影响 | 第76-77页 |
| 3.3.2 激素浓度对甜瓜叶片诱导丛生芽的影响 | 第77-78页 |
| 3.3.3 不同甜瓜子叶部位的影响 | 第78-79页 |
| 3.3.4 预培养时间的研究 | 第79-80页 |
| 3.3.5 侵染时间的影响 | 第80-81页 |
| 3.3.6 共培养时间的影响 | 第81页 |
| 3.3.7 甜瓜对kan的敏感性试验 | 第81-83页 |
| 3.3.8 转基因T0代甜瓜叶片GUS测定 | 第83-84页 |
| 3.3.9 PCR检测CWZ嵌合基因整合情况 | 第84-85页 |
| 3.3.10 Southern进一步检测CWZ基因整合结果 | 第85页 |
| 3.4 讨论 | 第85-89页 |
| 3.5 小结 | 第89-92页 |
| 参考文献 | 第92-102页 |
| 个人简介 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103-105页 |
