中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-20页 |
1.1 p,p'-DDT简介 | 第14-16页 |
1.1.1 p,p'-DDT | 第14页 |
1.1.2 DDT的发展历程 | 第14-15页 |
1.1.3 p,p'-DDT的生物毒性 | 第15-16页 |
1.2 大肠癌 | 第16-18页 |
1.2.1 大肠癌简介 | 第16页 |
1.2.2 Wnt/β-catenin信号通路 | 第16-17页 |
1.2.3 Wnt/β-catenin信号通路与大肠癌 | 第17-18页 |
1.2.4 氧化应激与大肠癌 | 第18页 |
1.3 p,p'-DDT与大肠癌 | 第18-19页 |
1.4 本课题研究的目的及意义 | 第19-20页 |
第二章 p,p'-DDT通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进DLD1细胞增殖 | 第20-29页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 实验试剂及抗体 | 第20页 |
2.1.2 细胞株 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-24页 |
2.2.1 DLD1细胞的复苏、冻存和培养 | 第21页 |
2.2.2 药物处理 | 第21页 |
2.2.3 MTT法测定细胞存活 | 第21-22页 |
2.2.4 总蛋白提取 | 第22页 |
2.2.5 细胞浆和细胞核蛋白的提取 | 第22-23页 |
2.2.6 Western印迹 | 第23页 |
2.2.7 RNA干扰实验 | 第23页 |
2.2.8 ROS水平检测 | 第23页 |
2.2.9 SOD活性检测 | 第23-24页 |
2.2.10 统计学分析 | 第24页 |
2.3 实验结果 | 第24-28页 |
2.3.1 低浓度p,p'-DDT暴露促进DLD1细胞增殖 | 第24-25页 |
2.3.2 p,p'-DDT暴露激活Wnt/β-catenin信号通路 | 第25页 |
2.3.3 p,p'-DDT不通过雌激素受体途径促进DLD1细胞增殖 | 第25-27页 |
2.3.4 p,p'-DDT激活DLD1的氧化应激水平 | 第27-28页 |
2.4 讨论 | 第28-29页 |
第三章 p,p'-DDT通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进裸鼠体内大肠癌肿瘤生长 | 第29-35页 |
3.1 实验材料 | 第29页 |
3.1.1 实验试剂及抗体 | 第29页 |
3.1.2 细胞株和裸鼠 | 第29页 |
3.2 实验方法 | 第29-31页 |
3.2.1 DLD1细胞培养 | 第29页 |
3.2.2 裸鼠成瘤模型实验 | 第29-30页 |
3.2.3 免疫组织化学染色 | 第30页 |
3.2.4 总蛋白提取及Western印迹 | 第30-31页 |
3.2.5 SOD活性检测 | 第31页 |
3.2.6 GSH活性检测 | 第31页 |
3.2.7 统计学分析 | 第31页 |
3.3 实验结果 | 第31-34页 |
3.3.1 p,p'-DDT促进裸鼠肿瘤生长 | 第31页 |
3.3.2 p,p'-DDT激活肿瘤组织内氧化应激水平 | 第31-33页 |
3.3.3 p,p'-DDT激活肿瘤组织内Wnt/β-catenin信号通路 | 第33-34页 |
3.4 讨论 | 第34-35页 |
第四章 p,p'-DDT对DLD1细胞粘附的影响 | 第35-43页 |
4.1 实验材料 | 第35页 |
4.1.1 药品、主要试剂和仪器 | 第35页 |
4.1.2 细胞株 | 第35页 |
4.2 实验方法 | 第35-37页 |
4.2.1 DLD1细胞培养 | 第35页 |
4.2.2 细胞聚集实验分析细胞间粘附 | 第35-36页 |
4.2.3 结晶紫染色法检测细胞与基质间粘附 | 第36页 |
4.2.4 总RNA提取 | 第36页 |
4.2.5 Real time PCR检测E-cadherin和CD29 mRNA表达 | 第36-37页 |
4.2.6 Western印迹检测E-cadherin和CD29蛋白表达 | 第37页 |
4.2.7 统计学分析 | 第37页 |
4.3 实验结果 | 第37-41页 |
4.3.1 p,p'-DDT对DLD1细胞-细胞间粘附的影响 | 第37-38页 |
4.3.2 p,p'-DDT对DLD1细胞内E-cadherin表达的影响 | 第38-39页 |
4.3.3 p,p'-DDT对DLD1细胞与基质间粘附的影响 | 第39-40页 |
4.3.4 p,p'-DDT对DLD1细胞内CD29表达的影响 | 第40-41页 |
4.4 讨论 | 第41-43页 |
参考文献 | 第43-48页 |
附录1 英文缩略语表 | 第48-50页 |
附录2 主要试剂配方 | 第50-51页 |
附录3 实验主要仪器设备 | 第51-52页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
个人简况及联系方式 | 第54-55页 |
承诺书 | 第55-56页 |