| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第13-28页 |
| 1 嵌合抗原受体T细胞 | 第13-20页 |
| 2 细胞因子IL-18和IL-21 | 第20-25页 |
| 3 慢病毒载体表达系统 | 第25-26页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
| 第二章 共表达细胞因子IL-18或IL-21的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)的构建及其功能研究 | 第28-74页 |
| 引言 | 第28-30页 |
| 一、材料 | 第30-34页 |
| 1 细胞 | 第30页 |
| 2 菌株及质粒 | 第30-31页 |
| 3 主要试剂 | 第31页 |
| 4 实验器材 | 第31-32页 |
| 5 实验常用试剂配制 | 第32-34页 |
| 二、方法 | 第34-53页 |
| 1 人全长细胞因子IL-18和IL-21序列的体外克隆 | 第34-41页 |
| 2 共表达IL-18或IL-21的CAR分子的重组慢病毒表达载体的构建 | 第41-44页 |
| 3 慢病毒包装 | 第44-48页 |
| 4 JurCAR-T细胞制备 | 第48-49页 |
| 5 JurCAR-T细胞功能检测 | 第49-50页 |
| 6 细胞杀伤实验 | 第50-51页 |
| 7 人脐带血淋巴细胞CAR-T细胞制备 | 第51-53页 |
| 三、结果 | 第53-69页 |
| 1 αCD19scFv、4-1BB-CD3zeta的克隆及拼接 | 第53-54页 |
| 2 IL-18、IL-21、IRES序列的克隆及拼接 | 第54-56页 |
| 3 慢病毒V-CAR19、V-CAR19-IL-18、V-CAR19-IL-21的制备 | 第56-58页 |
| 4 JurCAR-T (JurCAR19、JurCAR19-IL-18、JurCAR19-IL-21)细胞的制备 | 第58-59页 |
| 5 JurCAR19-IL-18、JurCAR19-IL-21细胞IFN-γ表达情况检测 | 第59-60页 |
| 6 JurCAR19-IL-18、JurCAR19-IL-21细胞体外增殖能力检测 | 第60-61页 |
| 7 JurCARI9-IL-18、JurCAR19-IL-21细胞体外杀伤功能检测 | 第61-62页 |
| 8 JurCAR19-IL-18、JurCAR19-IL-21细胞活化水平检测 | 第62-64页 |
| 9 JurCAR19-IL-18、JurCAR19-IL-21细胞激活后体外增殖能力检测 | 第64-65页 |
| 10 CAR-T细胞制备 | 第65-66页 |
| 11 CAR19-IL18-T、CAR19-IL21-T细胞体外杀伤功能检测 | 第66-67页 |
| 12 CAR19-IL18-T、CAR19-IL21-T细胞活化水平检测 | 第67-69页 |
| 四、讨论 | 第69-74页 |
| 第三章 结论 | 第74-76页 |
| 附录 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
