| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-24页 |
| 1.1 腈化合物的简介及研究意义 | 第13页 |
| 1.2 羧酸化合物简介及研究意义 | 第13-14页 |
| 1.3 制备羧酸化合物的方法 | 第14-15页 |
| 1.3.1 化学合成法 | 第14-15页 |
| 1.3.2 生物催化法 | 第15页 |
| 1.4 生物催化简介 | 第15-16页 |
| 1.5 用腈水解酶生物催化制备羧酸化合物及其在工业中的应用 | 第16-17页 |
| 1.6 固定化细胞技术概况 | 第17-22页 |
| 1.6.1 固定化细胞的定义 | 第17页 |
| 1.6.2 固定化细胞的方法 | 第17-20页 |
| 1.6.3 固定化细胞的载体材料 | 第20-21页 |
| 1.6.4 固定化细胞的性质 | 第21页 |
| 1.6.5 固定化细胞的应用 | 第21-22页 |
| 1.7 本论文的研究意义及思路 | 第22-24页 |
| 第二章 含腈水解酶重组大肠杆菌的发酵优化 | 第24-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 菌种 | 第24页 |
| 2.1.2 培养基 | 第24页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要仪器表 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 培养方法 | 第26页 |
| 2.2.2 OD值的测定 | 第26页 |
| 2.2.3 细胞干重曲线 | 第26-27页 |
| 2.2.4 酶活力的测定 | 第27页 |
| 2.2.5 分析方法用 | 第27页 |
| 2.2.6 1-氰基环己基乙酸标准曲线的绘制 | 第27-29页 |
| 2.2.7 含腈水解酶重组大肠杆菌生长及产酶曲线 | 第29页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第29-35页 |
| 2.3.1 碳源的优化 | 第29-30页 |
| 2.3.2 氮源的优化 | 第30页 |
| 2.3.3 发酵初始p H对菌体生长及产酶的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.4 发酵温度对菌体生长及产酶的影响 | 第31-32页 |
| 2.3.5 接种量对菌体生长及产酶的影响 | 第32-33页 |
| 2.3.6 摇瓶装液量对发酵的影响 | 第33页 |
| 2.3.7 IPTG加入时间对菌体生长及产酶的影响 | 第33-34页 |
| 2.3.8 不同IPTG加入浓度 | 第34-35页 |
| 2.3.9 优化后大肠杆菌的生长及产酶过程 | 第35页 |
| 2.4 本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 含腈水解酶重组大肠杆菌的反应优化 | 第36-50页 |
| 3.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 菌种 | 第36页 |
| 3.1.2 培养基 | 第36页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.4 主要仪器表 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-41页 |
| 3.2.1 含腈水解酶大厂杆菌的培养 | 第37页 |
| 3.2.2 OD值的测定 | 第37页 |
| 3.2.3 酶活力的测定 | 第37页 |
| 3.2.4 分析方法 | 第37-38页 |
| 3.2.5 1-氰基环己基乙酸标准曲线的绘制 | 第38页 |
| 3.2.6 水溶性有机助溶剂的选择 | 第38页 |
| 3.2.7 催化剂量的影响 | 第38页 |
| 3.2.8 反应时间的影响 | 第38-39页 |
| 3.2.9 反应温度的影响 | 第39页 |
| 3.2.10 p H值的影响 | 第39页 |
| 3.2.11 反应体积的影响 | 第39页 |
| 3.2.12 底物粒径的影响 | 第39-40页 |
| 3.2.13 底物抑制实验 | 第40页 |
| 3.2.14 产物抑制实验 | 第40页 |
| 3.2.15 放置天数对酶活的影响 | 第40页 |
| 3.2.16 优化反应条件前后转化率的对比 | 第40-41页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第41-49页 |
| 3.3.1 水溶性有机溶剂的选择 | 第41页 |
| 3.3.2 催化剂量的影响 | 第41-42页 |
| 3.3.3 反应时间的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.4 反应温度及温度稳定性的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.5 反应p H值的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.6 反应体积的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.7 底物粒径的影响 | 第46页 |
| 3.3.8 底物抑制实验 | 第46-47页 |
| 3.3.9 产物抑制的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.10 放置天数对酶活的影响 | 第48页 |
| 3.3.11 转化反应优化前后底物转化率的变化 | 第48-49页 |
| 3.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 第四章 含腈水解酶重组大肠杆菌的固定化及性能研究 | 第50-71页 |
| 4.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 4.1.1 菌种 | 第50页 |
| 4.1.2 培养基 | 第50页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第50-51页 |
| 4.1.4 主要仪器表 | 第51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-56页 |
| 4.2.1 含腈水解酶重组大肠杆菌的培养 | 第51页 |
| 4.2.2 OD值的测定 | 第51-52页 |
| 4.2.3 细胞干重曲线 | 第52页 |
| 4.2.4 酶活力的测定 | 第52页 |
| 4.2.5 机械强度的测定 | 第52页 |
| 4.2.6 固定化细胞的制备 | 第52-53页 |
| 4.2.7 固定化细胞的工艺优化 | 第53-54页 |
| 4.2.8 固定化细胞的性质 | 第54-56页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第56-70页 |
| 4.3.1 固定化细胞的制备 | 第56-57页 |
| 4.3.2 细胞浓度对固定化细胞酶活的影响 | 第57页 |
| 4.3.3 海藻酸钠浓度对固定化细胞酶活的影响 | 第57-58页 |
| 4.3.4 硬化时间对固定化酶活的影响 | 第58-59页 |
| 4.3.5 戊二醛浓度对固定化细胞酶活的影响 | 第59页 |
| 4.3.6 戊二醛中交联时间 | 第59-60页 |
| 4.3.7 聚乙烯亚胺浓度对固定化细胞酶活的影响 | 第60-61页 |
| 4.3.8 在聚乙烯亚胺溶液中交联时间对酶活的影响 | 第61页 |
| 4.3.9 固定化小球在各个时期的颜色变化 | 第61-62页 |
| 4.3.10 最适温度及温度稳定性 | 第62-64页 |
| 4.3.11 最适p H及p H稳定性 | 第64-65页 |
| 4.3.12 储存溶液中钙离子浓度的影响 | 第65页 |
| 4.3.13 不同保存溶液对固定化细胞酶活及机械强度的影响 | 第65-66页 |
| 4.3.14 储存稳定性 | 第66-67页 |
| 4.3.15 0.5M底物的反应时间 | 第67页 |
| 4.3.16 固定化细胞转化反应的最佳转速 | 第67-68页 |
| 4.3.17 添加钙离子的在转化反应中的作用 | 第68-69页 |
| 4.3.18 循环利用 | 第69-70页 |
| 4.4 本章小结 | 第70-71页 |
| 总结与展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
