| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 前言 | 第10页 |
| 第一篇 文献综述 | 第10-17页 |
| 1.1 牛分枝杆菌及结核分枝杆菌基因差异区研究概况 | 第10-13页 |
| 1.1.1 牛分枝杆菌及结核分枝杆菌的交叉感染 | 第10-11页 |
| 1.1.2 结核分枝杆菌复合群成员 | 第11页 |
| 1.1.3 结核分枝杆菌复合群之间的序列差异 | 第11页 |
| 1.1.4 牛分枝杆菌（AF2122/97）与结核分枝杆菌（H37Rv）基因组差异 | 第11-13页 |
| 1.2 胶体金免疫层析技术在疾病诊断中的应用 | 第13-16页 |
| 1.2.1 胶体金免疫层技术的基本原理 | 第13-14页 |
| 1.2.2 胶体金免疫层析法在抗原检测中的应用 | 第14页 |
| 1.2.3 胶体金免疫层析法在抗体检测中的应用 | 第14-15页 |
| 1.2.4 胶体金免疫层析法在核酸检测中的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二篇 研究内容 | 第17-60页 |
| 第一章 牛分枝杆菌与结核分枝杆菌差异区部分基因克隆 | 第17-33页 |
| 1.1 材料 | 第17-19页 |
| 1.1.1 菌株、基因组及质粒载体 | 第17页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第18页 |
| 1.1.4 公司服务 | 第18页 |
| 1.1.5 主要试剂配制 | 第18-19页 |
| 1.2 方法 | 第19-25页 |
| 1.2.1 牛分枝杆菌与结核分枝杆菌差异区部分基因的引物设计 | 第19页 |
| 1.2.2 引物的稀释 | 第19页 |
| 1.2.3 牛分枝杆菌基因组提取 | 第19-20页 |
| 1.2.4 牛分枝杆菌基因组琼脂糖凝胶电泳验证 | 第20页 |
| 1.2.5 目的基因的克隆 | 第20-25页 |
| 1.2.6 基因序列比对 | 第25页 |
| 1.3 结果与分析 | 第25-31页 |
| 1.3.1 牛分枝杆菌基因组提取结果 | 第25-26页 |
| 1.3.2 差异区基因PCR扩增结果 | 第26-27页 |
| 1.3.3 差异区基因双酶切结果 | 第27-29页 |
| 1.3.4 差异区基因测序结果 | 第29-31页 |
| 1.4 讨论 | 第31-32页 |
| 1.5 小结 | 第32-33页 |
| 第二章 胶体金免疫层析试纸条的组装 | 第33-48页 |
| 2.1 材料 | 第33-34页 |
| 2.1.1 主要试剂及材料 | 第33页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第33-34页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第34页 |
| 2.2 方法 | 第34-38页 |
| 2.2.1 胶体金免疫层析试纸条引物 | 第34-36页 |
| 2.2.2 胶体金免疫层析试纸条的组装条件摸索 | 第36-38页 |
| 2.2.3 胶体金免疫层析试纸条的组装 | 第38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-45页 |
| 2.3.1 胶体金免疫层析试纸条引物特异性检测结果 | 第38-40页 |
| 2.3.2 胶体金免疫层析试纸条标记引物检测结果 | 第40-41页 |
| 2.3.3 胶体金溶液制备结果 | 第41-42页 |
| 2.3.4 胶体金与链霉亲和素偶联最适量的确定 | 第42页 |
| 2.3.5 金标链霉亲和素稀释液的选择结果 | 第42-43页 |
| 2.3.6 硝酸纤维素膜的选择 | 第43-44页 |
| 2.3.7 检测线兔抗异硫氰酸荧光素多克隆抗体浓度的选择 | 第44-45页 |
| 2.3.8 质控线生物素浓度的选择 | 第45页 |
| 2.3.9 样品稀释液的选择 | 第45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-46页 |
| 2.5 小结 | 第46-48页 |
| 第三章 胶体金免疫层析试纸条的性能测定 | 第48-60页 |
| 3.1 材料 | 第48页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第48页 |
| 3.1.2 菌株 | 第48页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第48页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第48页 |
| 3.2 方法 | 第48-49页 |
| 3.2.1 胶体金免疫层析试纸条敏感性检测 | 第48页 |
| 3.2.2 胶体金免疫层析试纸条抗原-半抗原检测 | 第48-49页 |
| 3.2.3 常见病原菌基因组提取 | 第49页 |
| 3.2.4 胶体金免疫层析试纸条特异性检测 | 第49页 |
| 3.3 结果与分析 | 第49-58页 |
| 3.3.1 胶体金免疫层析试纸条敏感性检测结果 | 第49-52页 |
| 3.3.2 胶体金免疫层析试纸条抗原-半抗原检测结果 | 第52-54页 |
| 3.3.3 胶体金免疫层析试纸条特异性检测结果 | 第54-58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-59页 |
| 3.5 小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 作者简介 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
