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谷氨酸棒杆菌中分枝硫醇二硫还原酶(Mtr)的抗环境胁迫作用机制研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 文献综述第11-21页
    1.1 细菌的抗氧防线第11-13页
        1.1.1 活性氧自由基(ROS)第11-12页
        1.1.2 抗氧化物酶系统第12-13页
        1.1.3 小分子量抗氧化剂(Low Molecular Mass Antioxidant,LMMA)第13页
    1.2 小分子量硫醇的抗氧机制第13-17页
        1.2.1 小分子量硫醇的研究现状第13-14页
        1.2.2 谷胱甘肽(GSH)的抗氧作用第14-15页
        1.2.3 分枝硫醇(MSH)的抗氧作用第15-16页
        1.2.4 蛋白质的硫醇化修饰第16-17页
    1.3 谷氨酸棒杆菌中MSH二硫还原酶(Mtr)的研究现状第17-19页
        1.3.1 谷氨酸棒杆菌概述第17-18页
        1.3.2 谷胱甘肽还原酶(GR)的抗氧作用第18-19页
        1.3.3 分枝硫醇二硫还原酶(Mtr)的抗氧研究第19页
    1.4 研究目的与意义第19-21页
第二章 材料与方法第21-31页
    2.1 材料第21页
        2.1.1 菌种与质粒第21页
        2.1.2 所用培养基及试剂第21页
    2.2 实验方法第21-31页
        2.2.1 感受态细胞的制备第21-22页
        2.2.2 基因克隆第22-25页
        2.2.3 不同胁迫条件下的存活率检测第25页
        2.2.4 胞内ROS检测第25-26页
        2.2.5 胞内蛋白羰基化检测第26页
        2.2.6 抗氧酶活性及转录水平检测第26-28页
        2.2.7 胞内蛋白巯基水平检测第28-29页
        2.2.8 胞内MSH和MSSM的定量检测第29页
        2.2.9 凝胶阻滞迁移实验(EMSA)和β-半乳糖苷酶活性测定第29-31页
第三章 实验结果第31-42页
    3.1 Mtr在C. glutamicum中是必需的第31页
    3.2 Mtr增强C. glutamicum对氧化剂,烷化剂,抗生素和重金属的抗性第31-34页
    3.3 Mtr能降低胞内ROS水平进而减少蛋白质不可逆氧化第34-37页
        3.3.1 过表达Mtr能增强C. glutamicum清除ROS的能力第34-36页
        3.3.2 过表达Mtr能降低胞内蛋白羰基化水平第36页
        3.3.3 过表达Mtr能增加胞内蛋白质可逆的硫醇化修饰第36-37页
    3.4 过表达Mtr提高胞内MSH:MSSM比例第37-38页
    3.5 过表达Mtr会增强胞内一些抗氧酶的活性第38-39页
    3.6 Mtr的表达受多种胁迫压力诱导并受到SigH的正调控第39-42页
第四章 分析与讨论第42-44页
第五章 结论第44-45页
参考文献第45-50页
附录第50-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页

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