摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第10-44页 |
1.1 基于反转录酶的RNA检测技术 | 第10-25页 |
1.1.1 反转录聚合酶链式扩增反应 | 第12-15页 |
1.1.2 反转录-等温扩增检测技术 | 第15-22页 |
1.1.2.1 转录介导的扩增 | 第15-17页 |
1.1.2.2 依赖核酸序列的扩增 | 第17-19页 |
1.1.2.3 滚环扩增 | 第19-21页 |
1.1.2.4 环介导等温扩增 | 第21-22页 |
1.1.3 RNA快速检测方法的社会需求 | 第22-25页 |
1.2 核酸适配体用于凝血酶分子的检测技术 | 第25-43页 |
1.2.1 核酸适配体的研究进展 | 第25-27页 |
1.2.1.1 核酸适配体简介 | 第25-26页 |
1.2.1.2 核酸适配体的应用 | 第26-27页 |
1.2.2 基于核酸适配体对凝血酶的检测研究进展 | 第27-43页 |
1.2.2.1 基于荧光染料和生物标记的检测技术 | 第28-33页 |
1.2.2.2 基于生物酶的荧光检测技术 | 第33-38页 |
1.2.2.3 基于催化物标记的适配体传感器 | 第38-39页 |
1.2.2.4 基于标记物邻近效应的适配体传感器 | 第39-41页 |
1.2.2.5 基于电导率变化的适配体传感器 | 第41-43页 |
1.3 本论文的研究意义与主要内容 | 第43-44页 |
第二章 几种DNA聚合酶具有反转录酶活性的新发现 | 第44-59页 |
2.1 引言 | 第44-45页 |
2.2 实验部分 | 第45-50页 |
2.2.1 仪器与试剂 | 第45-46页 |
2.2.2 RNA的提取 | 第46-47页 |
2.2.3 cDNA的合成 | 第47页 |
2.2.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第47-49页 |
2.2.4.1 尿素-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第48-49页 |
2.2.4.2 电泳检测产物 | 第49页 |
2.2.5 荧光PCR反应检测 | 第49-50页 |
2.2.5.1 实时荧光检测 | 第49-50页 |
2.2.5.2 电泳检测PCR产物 | 第50页 |
2.3 结果与讨论 | 第50-58页 |
2.3.1 几种DNA聚合酶具有反转录酶活性的发现过程及意义 | 第50-51页 |
2.3.2 核酸链的设计 | 第51-52页 |
2.3.3 几种DNA聚合酶进行cDNA合成能力的验证 | 第52-55页 |
2.3.3.1 电泳原理 | 第52-53页 |
2.3.3.2 几种DNA聚合酶具有反转录酶活性的验证 | 第53-55页 |
2.3.4 几种DNA聚合酶的反转录酶活性大小比较 | 第55-56页 |
2.3.5 几种DNA聚合酶反转录产物后续扩增的有效性 | 第56-58页 |
2.4 小结 | 第58-59页 |
第三章 基于核酸适配体对凝血酶的检测技术 | 第59-68页 |
3.1 引言 | 第59页 |
3.2 实验部分 | 第59-61页 |
3.2.1 仪器与试剂 | 第59-60页 |
3.2.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第60页 |
3.2.2.1 聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第60页 |
3.2.2.2 电泳验证反应机理 | 第60页 |
3.2.3 凝血酶检测体系 | 第60-61页 |
3.3 结果与讨论 | 第61-66页 |
3.3.1 实验原理 | 第61-62页 |
3.3.2 实验DNA链的设计 | 第62-64页 |
3.3.3 实验机理验证 | 第64-65页 |
3.3.4 实验灵敏度检测 | 第65-66页 |
3.3.5 实验抗干扰及特异性检测 | 第66页 |
3.4 小结 | 第66-68页 |
结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-78页 |
附录:论文中使用的缩略词 | 第78-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第80-81页 |