| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 引言 | 第17-34页 |
| 1. 微藻代谢 | 第17-19页 |
| 1.1 微藻代谢过程关键酶 | 第17-18页 |
| 1.1.1 乙酰辅酶A羧化酶（ACCase） | 第17-18页 |
| 1.1.2 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC） | 第18页 |
| 1.2 微藻生物代谢与脂质合成 | 第18-19页 |
| 2. 叶绿体植物反应器 | 第19-21页 |
| 2.1 叶绿体基因组 | 第20页 |
| 2.2 叶绿体转化难点突破点 | 第20页 |
| 2.3 外源蛋白的表达 | 第20-21页 |
| 3. 莱茵衣藻研究 | 第21-22页 |
| 3.1 莱茵衣藻简介 | 第21-22页 |
| 4. 莱茵衣藻的DNA转化 | 第22-28页 |
| 4.1 细胞核转化 | 第22页 |
| 4.2 叶绿体转化 | 第22-28页 |
| 4.2.1 衣藻叶绿体基因组 | 第22-23页 |
| 4.2.2 衣藻叶绿体研究历程 | 第23-24页 |
| 4.2.3 衣藻叶绿体转化优点 | 第24-25页 |
| 4.2.4 转化株的筛选 | 第25-28页 |
| 4.3 线粒体转化 | 第28页 |
| 5. 莱茵衣藻DNA转化方法 | 第28-31页 |
| 5.1 玻璃珠转化法 | 第28页 |
| 5.2 基因枪转化法( Biolistic) | 第28-29页 |
| 5.3 电穿孔法（Electroporation） | 第29-31页 |
| 6. 生物柴油研究 | 第31-33页 |
| 6.1 能源危机 | 第31-32页 |
| 6.2 生物能源 | 第32页 |
| 6.3 生物柴油 | 第32页 |
| 6.4 微藻基因工程 | 第32-33页 |
| 7. 本研究的目的及意义 | 第33-34页 |
| 7.1 目的 | 第33页 |
| 7.2 意义 | 第33-34页 |
| 第一章 莱茵衣藻“细菌型”pepc2基因细胞核表达及其代谢调控 | 第34-52页 |
| 1.材料方法 | 第35-39页 |
| 1.1 生物信息学分析 | 第35页 |
| 1.2 藻种，培养条件 | 第35页 |
| 1.3 Crpepc2基因的克隆与表达 | 第35-36页 |
| 1.4 RNA提取，反转录和RT-qPCR分析 | 第36页 |
| 1.5 SDS-PAGE电泳和Western blot | 第36-37页 |
| 1.6 总蛋白与PEPC酶活性 | 第37页 |
| 1.7 生长曲线，叶绿素含量 | 第37页 |
| 1.8 不同条件下光合放氧 | 第37-38页 |
| 1.9 总脂与脂肪酸的测定 | 第38页 |
| 1.10 统计学分析 | 第38-39页 |
| 2.结果 | 第39-49页 |
| 2.1 生物信息学分析 | 第39-40页 |
| 2.2 pepc2基因表达的检测 | 第40-42页 |
| 2.2.1 RT-qPCR | 第40页 |
| 2.2.2 SDS-PAGE电泳和Western blot | 第40-41页 |
| 2.2.3 PEPC酶活力 | 第41-42页 |
| 2.3 转Crpepc2藻株叶绿素含量及光合作用变化 | 第42-46页 |
| 2.3.1 叶绿素含量 | 第42-43页 |
| 2.3.2 光合作用响应 | 第43-46页 |
| 2.4 莱茵衣藻生长特性 | 第46-47页 |
| 2.5 转pepc2基因藻株油脂以及蛋白质的测定 | 第47-49页 |
| 2.5.1 油脂含量 | 第47-48页 |
| 2.5.2 总蛋白 | 第48-49页 |
| 3.讨论 | 第49-50页 |
| 4.结论 | 第50-51页 |
| 5.展望 | 第51-52页 |
| 第二章 莱茵衣藻“细菌型”pepc2基因叶绿体表达载体的构建与筛选 | 第52-60页 |
| 1.材料与方法 | 第53-54页 |
| 1.1 菌种，藻种和质粒 | 第53页 |
| 1.2 莱茵衣藻pepc2基因的克隆 | 第53页 |
| 1.3 正反向叶绿体表达载体的构建与鉴定 | 第53-54页 |
| 1.4 莱茵衣藻的转化及转化子的筛选 | 第54页 |
| 2.结果 | 第54-58页 |
| 2.1 莱茵衣藻pepc2基因的克隆 | 第54-55页 |
| 2.2 莱茵衣藻正反向叶绿体表达载体的构建 | 第55-56页 |
| 2.3 重组质粒的鉴定 | 第56-57页 |
| 2.4 莱茵衣藻转化及转化子的筛选 | 第57-58页 |
| 3.讨论 | 第58页 |
| 4.结论 | 第58-59页 |
| 5.展望 | 第59-60页 |
| 第三章 莱茵衣藻“细菌型”pepc2基因的叶绿体表达及对蛋白质，脂质代谢调控 | 第60-73页 |
| 1.材料与方法 | 第61-62页 |
| 1.1 RNA提取，反转录和RT-qPCR分析 | 第61页 |
| 1.2 生长曲线 | 第61页 |
| 1.3 叶绿素含量和不同条件下光合放氧 | 第61页 |
| 1.4 总脂与脂肪酸含量的测定 | 第61页 |
| 1.5 SDS-PAGE电泳和Western blot | 第61-62页 |
| 1.6 总蛋白 | 第62页 |
| 1.7 统计学分析 | 第62页 |
| 2.结果 | 第62-69页 |
| 2.1 Crpepc2基因的表达 | 第62-64页 |
| 2.1.1 RT-qPCR | 第62-63页 |
| 2.1.2 SDS-PAGE电泳和Western blot | 第63-64页 |
| 2.2 生长曲线 | 第64-65页 |
| 2.3 叶绿素含量 | 第65-66页 |
| 2.4 转基因藻株的光合特性 | 第66-68页 |
| 2.5 总蛋白质 | 第68页 |
| 2.6 油脂和脂肪酸含量 | 第68-69页 |
| 3.讨论 | 第69-71页 |
| 4.结论 | 第71-72页 |
| 5.展望 | 第72-73页 |
| 讨论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 附录：科研活动与成果 | 第85页 |
