| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-30页 |
| 1.1 MADS家族蛋白 | 第15-16页 |
| 1.1.1 MADS-box基因 | 第15-16页 |
| 1.1.2 MADS域蛋白 | 第16页 |
| 1.2 AGL18花期分子调控机制 | 第16-19页 |
| 1.2.1 成花诱导途径 | 第16-17页 |
| 1.2.2 AGL18与成花诱导途径 | 第17-19页 |
| 1.3 AGL18在开花调控网络中的作用 | 第19-25页 |
| 1.3.1 AGL18与AGL15功能冗余 | 第19-20页 |
| 1.3.2 AGL18与SOC1、FT的调控作用 | 第20页 |
| 1.3.3 AGL18和AGL24在营养生长阶段抑制花器官发生 | 第20-21页 |
| 1.3.4 AGL18蛋白与AFR1和AFR2蛋白互作 | 第21-22页 |
| 1.3.5 AGL18参与核染色质周期性组蛋白去乙酰化作用 | 第22-24页 |
| 1.3.6 AGL18和AGL15共同调控miR156的表达 | 第24-25页 |
| 1.4 蛋白-蛋白互作的研究方法 | 第25-27页 |
| 1.4.1 酵母双杂交系统 | 第25-26页 |
| 1.4.2 双分子荧光互补技术 | 第26-27页 |
| 1.5 蛋白-DNA相互作用的研究方法 | 第27-29页 |
| 1.5.1 酵母单杂交系统 | 第27-28页 |
| 1.5.2 Dual-Glo?萤光素酶检测系统 | 第28-29页 |
| 1.6 基因功能研究方法 | 第29-30页 |
| 第2章 引言 | 第30-32页 |
| 2.1 研究背景及意义 | 第30-31页 |
| 2.2 技术路线 | 第31-32页 |
| 第3章 芥菜AGL18的克隆及其编码蛋白与SOC1、AGL24蛋白的互作分析 | 第32-66页 |
| 3.1 材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第32页 |
| 3.1.2 菌种及载体 | 第32页 |
| 3.1.3 试验试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.4 主要试验仪器 | 第33页 |
| 3.2 方法 | 第33-46页 |
| 3.2.1 试验试剂的配制 | 第33-34页 |
| 3.2.2 引物设计 | 第34-36页 |
| 3.2.3 AGL18基因克隆 | 第36-41页 |
| 3.2.4 生物信息学分析 | 第41页 |
| 3.2.5 酵母双杂交检测AGL18及其截短体与SOC1、AGL24蛋白互作 | 第41-44页 |
| 3.2.6 BiFC技术检测AGL18与SOC1、AGL24蛋白相互作用 | 第44-46页 |
| 3.3 结果与分析 | 第46-66页 |
| 3.3.1 芥菜AGL18基因cDNA和DNA全长序列的克隆 | 第46-47页 |
| 3.3.2 芥菜AGL18氨基酸序列的生物信息学分析 | 第47-52页 |
| 3.3.3 AGL18Δ1-3 全长及截短体的酵母表达载体构建 | 第52-54页 |
| 3.3.4 毒性和自激活检测 | 第54-57页 |
| 3.3.5 AGL18Δ1-3 全长BiFC载体构建 | 第57页 |
| 3.3.6 AGL18与SOC1蛋白互作检测 | 第57-60页 |
| 3.3.7 AGL18与AGL24蛋白互作检测 | 第60-66页 |
| 第4章 芥菜AGL18与SOC1、AGL24的蛋白-DNA互作分析 | 第66-78页 |
| 4.1 材料 | 第66页 |
| 4.2 方法 | 第66-68页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第66页 |
| 4.2.2 酵母表达载体构建 | 第66-67页 |
| 4.2.3 双萤光素酶载体构建 | 第67页 |
| 4.2.4 酵母单杂交系统检测蛋白-DNA互作 | 第67页 |
| 4.2.5 双萤光素酶活性检测蛋白-DNA互作 | 第67-68页 |
| 4.3 结果与分析 | 第68-78页 |
| 4.3.1 重组质粒构建 | 第68-69页 |
| 4.3.2 融合酵母阳性克隆检测 | 第69-70页 |
| 4.3.3 AGL18与SOC1的蛋白-DNA互作分析 | 第70-73页 |
| 4.3.4 AGL18与AGL24的蛋白-DNA互作分析 | 第73-78页 |
| 第5章 芥菜AGL18与AGL24蛋白互作的关键氨基酸位点筛选与鉴定 | 第78-92页 |
| 5.1 材料 | 第78页 |
| 5.2 方法 | 第78-81页 |
| 5.2.1 AGL18参与蛋白互作的位点预测 | 第78-79页 |
| 5.2.2 AGL18Δ1-3 突变体扩增引物设计 | 第79-80页 |
| 5.2.3 AGL18Δ1-3 突变体的构建 | 第80页 |
| 5.2.4 AGL18蛋白突变体重组质粒构建 | 第80-81页 |
| 5.2.5 酵母双杂交鉴定蛋白互作 | 第81页 |
| 5.2.6 Bi FC鉴定蛋白互作 | 第81页 |
| 5.3 结果与分析 | 第81-92页 |
| 5.3.1 AGL18突变体构建 | 第81-83页 |
| 5.3.2 突变体重组质粒的鉴定 | 第83-84页 |
| 5.3.3 酵母双杂交鉴定AGL18突变体与AGL24的蛋白互作 | 第84-89页 |
| 5.3.4 Bi FC鉴定AGL18-1 突变体与AGL24的蛋白互作 | 第89-92页 |
| 第6章 芥菜AGL18基因的遗传转化研究 | 第92-106页 |
| 6.1 材料 | 第92页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第92页 |
| 6.1.2 菌株与载体质粒 | 第92页 |
| 6.1.3 实验试剂 | 第92页 |
| 6.2 方法 | 第92-97页 |
| 6.2.1 试验试剂的配制 | 第92-93页 |
| 6.2.2 引物设计 | 第93-94页 |
| 6.2.3 植物表达载体构建 | 第94-95页 |
| 6.2.4 农杆菌感受态制备及转化 | 第95页 |
| 6.2.5 农杆菌介导的遗传转化 | 第95-96页 |
| 6.2.6 转化植株的鉴定 | 第96页 |
| 6.2.7 转化植株表型初鉴定 | 第96-97页 |
| 6.3 结果与分析 | 第97-106页 |
| 6.3.1 植物遗传转化表达载体构建 | 第97页 |
| 6.3.2 植物表达载体转化农杆菌 | 第97页 |
| 6.3.3 转基因烟草的检测 | 第97-100页 |
| 6.3.4 转基因烟草相关分析 | 第100-102页 |
| 6.3.5 转基因芥菜的检测 | 第102-104页 |
| 6.3.6 转基因芥菜表型观察 | 第104-106页 |
| 第7章 结论 | 第106-108页 |
| 第8章 讨论及创新点 | 第108-114页 |
| 8.1 讨论 | 第108-112页 |
| 8.2 创新点 | 第112页 |
| 8.3 下一步研究计划 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-122页 |
| 附录 | 第122-130页 |
| 致谢 | 第130-132页 |
| 在校期间发表的学术论文 | 第132-133页 |
| 在校期间参与的科研项目 | 第133页 |
