| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-23页 |
| ·嗜热微生物简介 | 第14-15页 |
| ·嗜热酶简介 | 第15-16页 |
| ·丝氨酸水解酶催化机制 | 第16-17页 |
| ·酯酶和脂肪酶的性质及应用 | 第17-22页 |
| ·酯酶 | 第18页 |
| ·脂肪酶 | 第18-20页 |
| ·酯酶和脂肪酶的分类 | 第20-21页 |
| ·酯酶和脂肪酶的区别 | 第21-22页 |
| ·立题依据和实验设计 | 第22-23页 |
| 第二章 实验材料 | 第23-33页 |
| ·菌种与质粒 | 第23-24页 |
| ·菌种 | 第23页 |
| ·质粒 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·试剂盒 | 第25页 |
| ·工具酶 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-29页 |
| ·Dictyoglomus turgidum DSM6724 的培养基 | 第25-28页 |
| ·2×YT 液体培养基 | 第28-29页 |
| ·2×YT 固体培养基 | 第29页 |
| ·溶液配制 | 第29-31页 |
| ·常用缓冲液 | 第29-30页 |
| ·常用储备液 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第31-32页 |
| ·软件 | 第32-33页 |
| 第三章 嗜热羧酸酯酶基因的克隆、表达与纯化 | 第33-56页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-43页 |
| ·嗜热细菌Dictyoglomus turgidum DSM 6724 的培养 | 第33页 |
| ·Dictyoglomus turgidum DSM 6724 基因组的提取 | 第33-34页 |
| ·DtEstA 的氨基酸序列分析及同源比对 | 第34页 |
| ·DtEstA 三级结构同源模建 | 第34页 |
| ·Dtur_0242 基因的克隆 | 第34-35页 |
| ·PCR 产物的限制性酶切和纯化 | 第35页 |
| ·重组质粒的制备 | 第35-38页 |
| ·羧酸酯酶DtEstA 的表达 | 第38页 |
| ·羧酸酯酶DtEstA 的分离纯化及鉴定 | 第38-43页 |
| ·实验结果与讨论 | 第43-55页 |
| ·DtEstA 的氨基酸序列分析、进化关系及同源比对结果 | 第43-47页 |
| ·DtEstA 三级结构同源模建 | 第47-48页 |
| ·羧酸酯酶DtEstA 基因克隆 | 第48-50页 |
| ·羧酸酯酶DtEstA 的表达与分离纯化 | 第50-52页 |
| ·羧酸酯酶DtEstA 酶学活力的验证 | 第52-55页 |
| ·本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 重组嗜热羧酸酯酶的酶学性质表征 | 第56-66页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-58页 |
| ·非变性蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第56页 |
| ·羧酸酯酶DtEstA 的酶学性质表征 | 第56-58页 |
| ·实验结果与讨论 | 第58-65页 |
| ·非变性蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第58-59页 |
| ·DtEstA 的酶学性质表征 | 第59-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第70-72页 |
