摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
第一章 绪论 | 第9-22页 |
1.1 胚胎干细胞 | 第9-11页 |
1.1.1 胚胎干细胞的定义和研究历史 | 第9页 |
1.1.2 胚胎干细胞的培养体系 | 第9-10页 |
1.1.3 胚胎干细胞的信号通路 | 第10-11页 |
1.1.4 胚胎干细胞的瓶颈和挑战 | 第11页 |
1.2 诱导多能性干细胞 | 第11-17页 |
1.2.1 iPS细胞的产生 | 第11-13页 |
1.2.2 iPS细胞的诱导 | 第13页 |
1.2.3 iPS细胞的鉴定 | 第13-14页 |
1.2.4 iPS细胞产生的分子机制 | 第14-16页 |
1.2.5 iPS细胞的挑战 | 第16-17页 |
1.3 细胞周期 | 第17-20页 |
1.3.1 细胞周期与胚胎发育 | 第17-18页 |
1.3.2 细胞周期的调控 | 第18-19页 |
1.3.3 细胞周期与重编程的关系 | 第19-20页 |
1.4 p18的研究 | 第20-22页 |
1.4.1 p18的发现 | 第20页 |
1.4.2 pl8的作用机理 | 第20-21页 |
1.4.3 p18的表达与调控 | 第21页 |
1.4.4 p18与重编程 | 第21-22页 |
第二章:实验的材料与方法 | 第22-42页 |
2.1 实验材料 | 第22-28页 |
2.1.1 本课题所使用的细胞及来源 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂与材料 | 第22-23页 |
2.1.3 本课题所用的引物总结 | 第23-25页 |
2.1.4 本课题所用的抗体总结 | 第25页 |
2.1.5 主要仪器 | 第25-26页 |
2.1.6 培养基和一些重要试剂配制方法 | 第26-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-42页 |
2.2.1 过表达载体的构建 | 第28-30页 |
2.2.2 pSicoR构建shRNAknockdown载体 | 第30-32页 |
2.2.3 实时定量PCR | 第32-33页 |
2.2.4 免疫蛋白印迹 | 第33-34页 |
2.2.5 小鼠诱导性多能干细胞的诱导和维护 | 第34-38页 |
2.2.6 小鼠诱导性多能干细胞的鉴定 | 第38-42页 |
第三章:实验结果 | 第42-51页 |
3.1 小鼠iPS细胞的诱导 | 第42-45页 |
3.1.1 重编程病毒的滴度的测定 | 第42-43页 |
3.1.2 重编程过程的形态变化 | 第43页 |
3.1.3 iPS细胞的核型分析 | 第43-44页 |
3.1.4 iPS细胞的分化能力分析 | 第44-45页 |
3.2 p18对于重编程的影响 | 第45-51页 |
3.2.1 p18可以抑制小鼠重编程效率 | 第45-48页 |
3.2.2 p18抑制小鼠重编程效率与Cdk 6活性有关 | 第48-50页 |
3.2.3 探究重编程过程中p18,Cdk 6的调控 | 第50-51页 |
第四章 讨论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-63页 |
附录 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |