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p18调控小鼠体细胞重编程机制的研究

摘要第5-6页
ABSTRACT第6页
第一章 绪论第9-22页
    1.1 胚胎干细胞第9-11页
        1.1.1 胚胎干细胞的定义和研究历史第9页
        1.1.2 胚胎干细胞的培养体系第9-10页
        1.1.3 胚胎干细胞的信号通路第10-11页
        1.1.4 胚胎干细胞的瓶颈和挑战第11页
    1.2 诱导多能性干细胞第11-17页
        1.2.1 iPS细胞的产生第11-13页
        1.2.2 iPS细胞的诱导第13页
        1.2.3 iPS细胞的鉴定第13-14页
        1.2.4 iPS细胞产生的分子机制第14-16页
        1.2.5 iPS细胞的挑战第16-17页
    1.3 细胞周期第17-20页
        1.3.1 细胞周期与胚胎发育第17-18页
        1.3.2 细胞周期的调控第18-19页
        1.3.3 细胞周期与重编程的关系第19-20页
    1.4 p18的研究第20-22页
        1.4.1 p18的发现第20页
        1.4.2 pl8的作用机理第20-21页
        1.4.3 p18的表达与调控第21页
        1.4.4 p18与重编程第21-22页
第二章:实验的材料与方法第22-42页
    2.1 实验材料第22-28页
        2.1.1 本课题所使用的细胞及来源第22页
        2.1.2 主要试剂与材料第22-23页
        2.1.3 本课题所用的引物总结第23-25页
        2.1.4 本课题所用的抗体总结第25页
        2.1.5 主要仪器第25-26页
        2.1.6 培养基和一些重要试剂配制方法第26-28页
    2.2 实验方法第28-42页
        2.2.1 过表达载体的构建第28-30页
        2.2.2 pSicoR构建shRNAknockdown载体第30-32页
        2.2.3 实时定量PCR第32-33页
        2.2.4 免疫蛋白印迹第33-34页
        2.2.5 小鼠诱导性多能干细胞的诱导和维护第34-38页
        2.2.6 小鼠诱导性多能干细胞的鉴定第38-42页
第三章:实验结果第42-51页
    3.1 小鼠iPS细胞的诱导第42-45页
        3.1.1 重编程病毒的滴度的测定第42-43页
        3.1.2 重编程过程的形态变化第43页
        3.1.3 iPS细胞的核型分析第43-44页
        3.1.4 iPS细胞的分化能力分析第44-45页
    3.2 p18对于重编程的影响第45-51页
        3.2.1 p18可以抑制小鼠重编程效率第45-48页
        3.2.2 p18抑制小鼠重编程效率与Cdk 6活性有关第48-50页
        3.2.3 探究重编程过程中p18,Cdk 6的调控第50-51页
第四章 讨论第51-53页
参考文献第53-63页
附录第63-64页
致谢第64-65页

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